Nova Patents
PL208069B1

Dual specificity antibodies and methods of making and using

Abstract

This record has no abstract on file.

Term

Term ended

Expired 28 June 2021, 5.2 years ago.

  1. Priority
  2. Filed
  3. Granted
  4. Expired
  5. Today

41 claims: 1 independent, 40 dependent

  1. 1
    Sposób uzyskiwania przeciwciała o podwójnej specyficzności lub jego części wiążącej antygen, które specyficznie wiąże dwa różne, lecz strukturalnie pokrewne białka, znamienny tym, że:otrzymuje się antygen przez składanie ze sobą zachodzących na siebie części dwu różnych, lecz strukturalnie pokrewnych białek dla utworzenia peptydu hybrydowego, który to peptyd ma strukturę X-Y-Z, gdzie Y przedstawia region identyczny lub bardzo podobny dla obu pokrewnych białek, PL 208 069 B1 X przedstawia region z jednego z pokrewnych białek, a Z przedstawia region z drugiego z pokrewnych białek;wystawia się repertuar przeciwciał na działanie tego antygenu;i przeprowadza się selekcję repertuaru przeciwciał, które specyficznie wiążą te dwie różne, lecz strukturalnie pokrewne białka, w celu otrzymania przeciwciała o podwójnej specyficzności.
  2. 2
    Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że repertuar przeciwciał wystawia się na działanie antygenu in vivo poprzez immunizację nie będącego człowiekiem zwierzęcia tym antygenem.
  3. 3
    Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że obejmuje ponadto przygotowanie panelu hybrydom z limfocytów zwierzęcia i wybieranie hybrydomy wydzielającej przeciwciało specyficznie wiążące dwa różne, lecz strukturalnie pokrewne białka cząsteczki.
  4. 4
    Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że zwierzę wybiera się z grupy obejmującej myszy, szczury, króliki i kozy.
  5. 5
    Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że jako zwierzę stosuje się mysz z wyłączonym genem pozbawioną endogennej wersji antygenu.
  6. 6
    Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że stosuje się zwierzę będące myszą transgeniczna pod względem ludzkich genów immunoglobulin i wytwarzające w wyniku stymulacji antygenowej ludzkie przeciwciała.
  7. 7
    Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że stosuje się zwierzę będące myszą z ostrym złożonym zespołem braku odporności odbudowanej za pomocą ludzkich obwodowych komórek jednojądrzastych lub komórek limfoidalnych, lub ich prekursorów.
  8. 8
    Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że stosuje się zwierzę będące myszą poddaną naświetleniu śmiertelną dawką promieniowania, następnie poddaną ochronie radiologicznej przez przeszczep komórek szpiku kostnego od myszy z ostrym złożonym zespołem braku odporności, a następnie przeszczepieniu ludzkich, funkcjonalnych limfocytów.
  9. 9
    Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że repertuar przeciwciał wystawia się na działanie antygenu in vitro przez przeszukiwanie biblioteki rekombinowanych przeciwciał z wykorzystaniem tego antygenu.
  10. 10
    Sposób według zastrz. 9, znamienny tym, że biblioteka rekombinowanych przeciwciał jest eksprymowana na powierzchni bakteriofaga.
  11. 11
    Sposób według zastrz. 9, znamienny tym, że biblioteka rekombinowanych przeciwciał jest eksprymowana na powierzchni komórki drożdżowej.
  12. 12
    Sposób według zastrz. 9, znamienny tym, że biblioteka rekombinowanych przeciwciał jest eksprymowana na powierzchni komórki bakterii.
  13. 13
    Sposób według zastrz. 9, znamienny tym, że biblioteka rekombinowanych przeciwciał jest eksprymowana jako produkty fuzyjne RNA-białko.
  14. 14
    Sposób według zastrz. 9, znamienny tym, że biblioteka rekombinowanych przeciwciał jest biblioteką scFv lub biblioteką Fab.
  15. 15
    Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że repertuar przeciwciał jest wystawiany na działanie antygenu przez immunizację in vivo zwierzęcia tym antygenem, a następnie przeszukiwanie in vitro biblioteki rekombinowanych przeciwciał utworzonej z komórek limfoidalnych tego zwierzęcia z użyciem tego antygenu.
  16. 16
    Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że repertuar przeciwciał jest wystawiany na działanie antygenu in vivo poprzez immunizację zwierzęcia tym antygenem, a następnie dojrzewanie powinowactwa in vitro biblioteki rekombinowanych przeciwciał utworzonej z komórek limfoidalnych tego zwierzęcia.
  17. 17
    Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że repertuar przeciwciał jest wystawiany na działanie antygenu przez immunizację in vivo zwierzęcia tym antygenem, a następnie wybieranie pojedynczych komórek wydzielających przeciwciało wiążące antygen, i odzyskiwanie cDNA zmiennych regionów łańcucha lekkiego i ciężkiego z tych pojedynczych komórek.
  18. 18
    Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że uzyskuje się przeciwciało o podwójnej specyficzności będące w pełni ludzkim przeciwciałem.
  19. 19
    Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że uzyskuje się przeciwciało o podwójnej specyficzności będące przeciwciałem chimerycznym.
  20. 20
    Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że uzyskuje się przeciwciało o podwójnej specyficzności będące przeciwciałem z przeszczepionym CDR. PL 208 069 B1
  21. 21
    Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że dwoma różnymi, lecz strukturalnie pokrewnymi białkami są interleukina-1 α i interleukina-1 β.
  22. 22
    Sposób według zastrz. 21, znamienny tym, że jako antygen stosuje się antygen obejmujący sekwencję aminokwasową TKGGQDITDFQILENQ (Sek Id Nr 3).
  23. 23
    Sposób według zastrz. 21, znamienny tym, że repertuar przeciwciał wystawia się na działanie antygenu in vivo, poprzez immunizowanie nie będącego człowiekiem zwierzęcia tym antygenem.
  24. 24
    Sposób według zastrz. 23, znamienny tym, że ponadto przygotowuje panel hybrydom z limfocytów zwierzęcia i wybiera się hybrydomę wydzielającą przeciwciało specyficznie wiążące IL-1 α i IL-1 β.
  25. 25
    Sposób według zastrz. 23, znamienny tym, że stosuje się zwierzę wybrane się z grupy obejmującej mysz, szczura, królika i kozę.
  26. 26
    Sposób według zastrz. 23, znamienny tym, że stosuje się zwierzę będące myszą z wyłączonym genem, nie wytwarzającą IL-1a, IL-1 β lub IL-1a i IL-1 β.
  27. 27
    Sposób według zastrz. 23, znamienny tym, że stosuje się zwierzę będące myszą transgeniczna pod względem ludzkich genów immunoglobulin i wytwarzające w wyniku stymulacji antygenowej ludzkie przeciwciała.
  28. 28
    Sposób według zastrz. 23, znamienny tym, że stosuje się zwierzę będące myszą z ostrym złożonym zespołem braku odporności odbudowanej za pomocą ludzkich obwodowych komórek jednojądrzastych lub komórek limfoidalnych, lub ich prekursorów.
  29. 29
    Sposób według zastrz. 23, znamienny tym, że stosuje się zwierzę będące myszą poddaną naświetleniu śmiertelną dawką promieniowania, następnie poddaną ochronie radiologicznej przez przeszczep komórek szpiku kostnego od myszy z ostrym złożonym zespołem braku odporności, a następnie przeszczepieniu ludzkich, funkcjonalnych limfocytów lub ich prekursorów.
  30. 30
    Sposób według zastrz. 23, znamienny tym, że repertuar przeciwciał wystawia się na działanie antygenu in vitro przez przeszukiwanie biblioteki rekombinowanych przeciwciał z wykorzystaniem tego antygenu.
  31. 31
    Sposób według zastrz. 30, znamienny tym, że biblioteka rekombinowanych przeciwciał jest eksprymowana na powierzchni bakteriofaga.
  32. 32
    Sposób według zastrz. 30, znamienny tym, że biblioteka rekombinowanych przeciwciał jest eksprymowana na powierzchni komórki drożdżowej.
  33. 33
    Sposób według zastrz. 30, znamienny tym, że biblioteka rekombinowanych przeciwciał jest eksprymowana na powierzchni komórki bakterii.
  34. 34
    Sposób według zastrz. 30, znamienny tym, że biblioteka rekombinowanych przeciwciał jest eksprymowana jako produkty fuzyjne RNA-białko.
  35. 35
    Sposób według zastrz. 30, znamienny tym, że biblioteka rekombinowanych przeciwciał jest biblioteką scFv lub biblioteką Fab.
  36. 36
    Sposób według zastrz. 21, znamienny tym, że repertuar przeciwciał jest wystawiany na działanie antygenu przez immunizację in vivo nie będącego człowiekiem zwierzęcia tym antygenem, a następnie przeszukiwanie in vitro biblioteki rekombinowanych przeciwciał utworzonej z komórek limfoidalnych tego zwierzęcia z użyciem tego antygenu.
  37. 37
    Sposób według zastrz. 21, znamienny tym, że repertuar przeciwciał jest wystawiany na działanie antygenu in vivo poprzez immunizację nie będącego człowiekiem zwierzęcia tym antygenem, a następnie dojrzewanie powinowactwa in vitro biblioteki rekombinowanych przeciwciał utworzonej z komórek limfoidalnych tego zwierzęcia.
  38. 38
    Sposób według zastrz. 21, znamienny tym, że repertuar przeciwciał jest wystawiany na działanie antygenu przez immunizację in vivo nie będącego człowiekiem zwierzęcia tym antygenem, a następnie wybieranie pojedynczych komórek wydzielających przeciwciało wiążące antygen, i odzyskiwanie cDNA zmiennych regionów łańcucha lekkiego i ciężkiego z tych pojedynczych komórek.
  39. 39
    Sposób według zastrz. 21, znamienny tym, że uzyskuje się przeciwciało o podwójnej specyficzności będące w pełni ludzkim przeciwciałem.
  40. 40
    Sposób według zastrz. 21, znamienny tym, że uzyskuje się przeciwciało o podwójnej specyficzności będące przeciwciałem chimerycznym.
  41. 41
    Sposób według zastrz. 21, znamienny tym, że uzyskuje się przeciwciało o podwójnej specyficzności będące przeciwciałem z przeszczepionym CDR.
Independent claims41