Nova Patents
EP0335423B2

Modified human G-CSF

Abstract

This record has no abstract on file.

EP0335423B2, drawing sheet 1
Sheet 1 of 43

Term

Term ended

Expired 31 March 2009, 17.5 years ago.

  1. Priority
  2. Filed
  3. Granted
  4. Expired
  5. Today

11 claims: 11 independent, 0 dependent

  1. 1
    A modified polypeptide having human granulocyte colony stimulating factor (hG-CSF) activity comprising a polypeptide having hG-CSF activity with at least one amino group thereof substituted with a group of the formula         R1(̵OCH2CH2)̵nX-R2-     (I) wherein R1 is an alkyl or alkanoyl group;n is an optionally variable positive integer;X is O, NH or S;R2 is [where R3 is OH, Cl, O-(CH2CH2O)n-R1, where R1 and n are as defined above, Y may not be present or represents Z-(CH2)pCO, where Z is O, S or NH and p is an optionally variable positive integer], or (CO)-m-(CH2)1CO, where m is 0 or 1;I is an optionally variable positive integer;provided that said modified polypeptide is not prepared from lysine depleted hG-CSF. A modified polypeptide having human granulocyte colony stimulating factor (hG-CSF) activity comprising a polypeptide having hG-CSF activity with at least one amino group thereof substituted with a group of the formula         R1(̵OCH2CH2)̵nX-R2-     (I) wherein R1 is an alkyl or alkanoyl group;n is an optionally variable positive integer;X is O, NH or S;R2 is [where R3 is OH, Cl, O-(CH2CH2O)n-R1, where R1 and n are as defined above, Y may not be present or represents Z-(CH2)pCO, where Z is O, S or NH and p is an optionally variable positive integer], or (CO)-m-(CH2)1CO, where m is 0 or 1;l is an optionally variable positive integer, provided that said modified polypeptide is not prepared from lysine depleted hG-CSF. A process for preparing a modified polypeptide having human granulocyte colony stimulating factor (hG-CSF) activity comprising a polypeptide having hG-CSF activity with at least one amino group thereof substituted with a group of the formula         R1(̵OCH2CH2)̵nX-R2-     (I) wherein R1 is an alkyl or alkanoyl group;n is an optionally variable positive integer;X is O, NH or S;R2 is [where R3 is OH, Cl, O-(CH2CH2O)n-R1, where R1 and n are as defined above, Y may not be present or represents Z-(CH2)pCO, where Z is O, S or NH and p is an optionally variable positive integer], or (CO)-m-(CH2)1CO, where m is 0 or 1;I is an optionally variable positive integer;which process comprises condensation of hG-CSF with a halide of formula (II) wherein R1, n, X and R3 are as defined hereinbefore;or condensation of hG-CSF with a carboxylic acid of formula (III)         R1(̵OCH2CH2)n-X-(CO)m(CH2)1-COOH     (III) wherein R1, n, X, m and I are as defined hereinbefore;or with a carboxylic acid of formula (IV) wherein R1, n, Z, X, R3 and p are as defined hereinbefore;provided that condensation is not performed with lysine depleted hG-CSF. Modifiziertes Polypeptid mit Aktivität von humanem Granulozyten-Kolonie-stimulierenden Faktor (hG-CSF), umfassend ein Polypeptid mit hG-CSF-Aktivität, wobei wenigstens eine Aminogruppe davon mit einer Gruppe der Formel         R1(̵OCH2CH2)̵nX-R2-     (I) substituiert ist, worin R1 für eine Alkyl- oder Alkanoylgruppe steht;n für einen gegebenenfalls variablen, positiven, ganzzahligen Wert steht;X für O, NH oder S steht;R2 für steht, [worin R3 für OH, Cl, O-(CH2CH2O)n-R1 steht, worin R1 und n die oben angegebenen Bedeutungen besitzen, Y fehlt oder für Z-(CH2)pCO steht, worin Z für O, S oder NH steht und p für einen gegebenenfalls variablen, positiven, ganzzahligen Wert steht];oder für (CO)m-(CH2)1CO steht, worin m für 0 oder 1 steht;und l für einen gegebenenfalls variablen, positiven, ganzzahligen Wert steht, mit der Maßgabe, dass das modifizierte Polypeptid nicht aus Lysin-abgereichertem hG-CSF hergestellt ist. Modifiziertes Polypeptid mit Aktivität von humanem Granulozyten-Kolonie-stimulierenden Faktor (hG-CSF), umfassend ein Polypeptid mit hG-CSF-Aktivität, wobei wenigstens eine Aminosäuregruppe davon mit einer Gruppe der Formel         R1(̵OCH2CH2)̵nX-R2-     (I) substituiert ist, worin R1 für eine Alkyl- oder Alkanoylgruppe steht;n für einen gegebenenfalls variablen, positiven, ganzzahligen Wert steht;X für O, NH oder S steht;R2 für steht, [worin R3 für OH, Cl, O-(CH2CH2O)n-R1 steht, worin R1 und n die oben angegebenen Bedeutungen besitzen, Y fehlt oder für Z-(CH2)pCO steht, worin Z für O, S oder NH steht und p für einen gegebenenfalls variablen, positiven, ganzzahligen Wert steht];oder für (CO)m-(CH2)1CO steht, worin m für 0 oder 1 steht;und l für einen gegebenenfalls variablen, positiven, ganzzahligen Wert steht, mit der Maßgabe, dass das modifizierte Polypeptid nicht aus Lysin-abgereichertem hG-CSF hergestellt ist. Polypeptide modifié ayant une activité de facteur de stimulation des colonies de granulocytes humain (hG-CSF), comprenant un polypeptide ayant une activité de hG-CSF, dont au moins un groupe amino est substitué par un groupe de formule         R1-(OCH2CH2)n-X-R2     (I) dans laquelle R1 est un groupe alkyle ou alcanoyle;n est un entier positif éventuellement variable;X est O, NH ou S;R2 est [où R3 est OH, Cl, O-(CH2CH2O)n-R1, R1 et n ayant la définition donnée ci-dessus, Y peut ne pas être présent ou représente Z-(CH2)pCO où Z est O, S ou NH et p est un entier positif éventuellement variable], ou (CO)m-(CH2)1CO, où m est 0 ou 1;l est un entier positif éventuellement variable;pour autant que ledit polypeptide modifié n'est pas préparé à partir de hG-CSF déporvu de lysine. Polypeptide modifié ayant une activité de facteur de stimulation des colonies de granulocytes humain (hG-CSF), comprenant un polypeptide ayant une activité de hG-CSF, dont au moins un groupe amino est substitué par un groupe de formule         R1-(OCH2CH2)n-X-R2     (I) dans laquelle R1 est un groupe alkyle ou alcanoyle;n est un entier positif éventuellement variable;X est O, NH ou S;R2 est [où R3 est OH, Cl, O-(CH2CH2O)n-R1, R1 et n ayant la définition donnée ci-dessus, Y peut ne pas être présent ou représente Z-(CH2)pCO, où Z est O, S ou NH et p est un entier positif éventuellement variable], ou (CO)m-(CH2)1CO, où m est 0 ou 1;l est entier positif éventuellement variable;pour autant que ledit polypeptide modifié n'est pas préparé à partir de hG-CSF dépourvu de lysine. Procédé de préparation d'un polypeptide modifié ayant une activité de facteur de stimulation des colonies de granulocytes humain (hG-CSF), comprenant un polypeptide ayant une activité de hG-CSF, dont au moins un groupe amino est substitué par un groupe de formule         R1-(OCH2CH2)n-X-R2     (I) dans laquelle R1 est un groupe alkyle ou alcanoyle;n est un entier positif éventuellement variable;X est O, NH ou S;R2 est [où R3 est OH, Cl, O-(CH2CH2O)n-R1, R1 et n ayant la définition donnée ci-dessus, Y peut ne pas être présent ou représente Z-(CH2)pCO, où Z est O, S ou NH et p est un entier positif éventuellement variable], ou (CO)m-(CH2)1CO, où m est 0 ou 1;l est un entier positif éventuellement variable;le procédé comprenant la condensation de hG-CSF avec un halogénure de formule (II) dans laquelle R1, n, X et R3 sont tels que définis précédemment;ou la condensation de hG-CSF avec un acide carboxylique de formule (III)         R1-(OCH2CH2)n-X-(CO)m(CH2)1-COO     (III) dans laquelle R1, n, X, m et l sont tels que définis précédemment;ou avec un acide carboxylique de formule (IV) dans laquelle R1, n, Z, X, R3 et p sont tels que définis précédemment ;pour autant que la condensation n'est pas réalisée avec hG-CSF dépourvu de lysine. Verfahren zur Herstellung eines modifizierten Polypeptids mit Aktivität von humanem Granulozyten-Kolonie-stimulierenden Faktor (hG-CSF), umfassend ein Polypeptid mit hG-CSF-Aktivität, wobei wenigstens eine Aminosäuregruppe davon mit einer Gruppe der Formel         R1(̵OCR2CH2)̵nX-R2     (I) substituiert ist, worin R1 für eine Alkyl- oder Alkanoylgruppe steht;n für einen gegebenenfalls variablen, positiven, ganzzahligen Wert steht;X für O, NH oder S steht;R2 für steht, [worin R3 für OH, Cl, O-(CH2CH2O)n-R1 steht, worin R1 und n die oben angegebenen Bedeutungen besitzen, Y fehlt oder für Z-(CH2)pCO steht, worin Z für O, S oder NH steht und p für einen gegebenenfalls variablen, positiven, ganzzahligen Wert steht];oder für (CO)m-(CH2)1CO steht, worin m für 0 oder 1 steht;und l für einen gegebenenfalls variablen, positiven, ganzzahligen Wert steht;umfassend die Kondensation von hG-CSF mit einem Halogenid der Formel (II) worin R1, n, X und R3 die oben angegebenen Bedeutungen besitzen;oder die Kondensation von hG-CSF mit einer Carbonsäure der Formel (III)         R1(̵OCH2CH2)n-X-(CO)m(CH2)1-COOH     (III) worin R1, n, X, m und l die oben angegebenen Bedeutungen besitzen;oder mit einer Carbonsäure der Formel (IV) worin R1, n, Z, X, R3 und p die oben angegebenen Bedeutungen besitzen, mit der Maßgabe, dass die Kondensation nicht mit Lysin-abgereichertem hG-CSF durchgeführt wird.
  2. 2
    Modifiziertes Polypeptid nach Anspruch 1, worin R1 für eine C1-18-Alkyl- oder -Alkanoylgruppe steht. Modifiziertes Polypeptid nach Anspruch 1, worin R1 für eine C1-18-Alkyl- oder -Alkanoylgruppe steht. Polypeptide modifié selon la revendication 1, dans lequel R1 est un groupe alkyle ou alcanoyle en C1-C18. Polypeptide modifié selon la revendication 1, dans lequel R1 est un groupe alkyle ou alcanoyle en C1-C18. Procédé selon la revendication 1, comprenant la condensation de hG-CSF avec un acide carboxylique représenté par la formule (V) dans laquelle R1, n et X sont tels que définis ci-dessus, Z est O, S ou NH et p est un entier positif éventuellement variable. The modified polypeptide of claim 1, wherein R1 is a C1-18 alkyl or alkanoyl group. The modified polypeptide of claim 1, wherein R1 is a C1-18 alkyl or alkanoyl group. The process according to claim 1, comprising condensation of hG-CSF with a carboxylic acid represented by formula (V) wherein R1, n and X are as defined above, Z is O S or NH and p is an optionally variable positive integer. Verfahren nach Anspruch 1, unfassend die Kondensation von hG-CSF mit einer Carbonsäure der Formel (V) worin R1, n und X die oben angegebenen Bedeutungen besitzen, Z für O, S oder NH steht und p für einen gegebenenfalls variablen, positiven, ganzzahligen Wert steht.
  3. 3
    Modifiziertes Polypeptid nach Anspruch 1, worin n für einen positiven, ganzzahligen Wert steht, der nicht größer als 500 ist. Modifiziertes Polypeptid nach Anspruch 1, worin n für einen positiven, ganzzahligen Wert steht, der nicht größer als 500 ist. Polypeptide modifié selon la revendication 1, dans lequel n est un entier positif inférieur ou égal à 500. Polypeptide modifié selon la revendication 1, dans lequel n est un entier positif inférieur ou égal à 500. Procédé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que l'on ajoute l'halogénure ou l'acide carboxylique actif au polypeptide en une proportion (rapport molaire) de 2 à 100 fois la quantité de groupes amino présents dans la molécule du polypeptide, et en ce qu'on laisse le mélange réagir à une température de 4 à 37°C, de préférence de 4 à 10°C, et à un pH de 7 à 10 pendant 1 heure à 2 jours, de préférence pendant 1 à 24 heures, grâce à quoi on produit le hG-CSF chimiquement modifié désiré. The modified polypeptide of claim 1, wherein n is a positive integer of not more than 500. The modified polypeptide of claim 1, wherein n is a positive integer of not more than 500. The process according to claim 1 or 2, characterized in that the halide or active carboxylic acid compound is added to the polypeptide in a proportion (mole ratio) of 2 to 100 times the amount of amino groups present in the polypeptide molecule and the mixture is allowed to react at a temperature of 4 to 37°C, preferably 4 to 10°C and at pH 7 to 10 for 1 hour to 2 days, preferably 1 to 24 hours, whereby the desired chemically modified hG-CSF is produced. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß man das Halogenid oder die aktive Carbonsäureverbindung zum Polypeptid in einem Anteil (Molverhältnis) entsprechend dem 2- bis 100-fachen der Menge an in dem Polypeptidmolekül vorliegenden Aminogruppen zugibt und das Gemisch bei einer Temperatur von 4 bis 37°C, vorzugsweise 4 bis 10°C, und bei einem pH von 7 bis 10 1 Stunde bis 2 Tage, vorzugsweise 1 bis 24 Stunden, reagieren läßt, wobei der gewünschte chemisch modifizierte hG-CSF produziert wird.
  4. 4
    Modifiziertes Polypeptid nach Anspruch 1, worin l für einen positiven, ganzzahligen Wert steht, der nicht größer als 100 ist. Modifiziertes Polypeptid nach Anspruch 1, worin l für einen positiven, ganzzahligen Wert steht, der nicht größer als 100 ist. Polypeptide modifié selon la revendication 1, dans lequel l est un entier positif inférieur ou égal à 100. Polypeptide modifié selon la revendication 1, dans lequel l est un entier positif inférieur ou égal à 100. Procédé selon l'une des revendications 1 à 3, dans lequel R1 est un groupe alkyle ou alcanoyle en C1-C18. The modified polypeptide of claim 1, wherein I is a positive integer of not more than 100. The modified polypeptide of claim 1, wherein I is a positive integer of not more than 100. The process of one of the claims 1 to 3, wherein R1 is a C1-18 alkyl or alkanoyl group. Verfahren gemäß einem der Ansprüche 1 bis 3, worin R1 für eine C1-18-Alkyl- oder -Alkanoylgruppe steht.
  5. 5
    Modifiziertes Polypeptid nach Anspruch 1, worin die Gruppe der Formel (I) ein Molekulargewicht von nicht mehr als 30000 besitzt. Modifiziertes Polypeptid nach Anspruch 1, worin die Gruppe der Formel (I) ein Molekulargewicht von nicht mehr als 30000 besitzt. Polypeptide modifié selon la revendication 1, dans lequel le groupe de formule (I) a une masse moléculaire inférieure ou égale à 30 000. Polypeptide modifié selon la revendication 1, dans lequel le groupe de formule (I) a une masse moléculaire inférieure ou égale à 30 000. Procédé selon l'une des revendications 1 à 3, dans lequel n est un entier positif inférieur ou égal à 500. The modified polypeptide of claim 1, wherein the group of formula (I) has a molecular weight of not more than 30,000. The modified polypeptide of claim 1, wherein the group of formula (I) has a molecular weight of not more than 30,000. The process of one of the claims 1 to 3, wherein n is a positive integer of not more than 500. Verfahren gemäß einem der Ansprüche 1 bis 3, worin n für einen positiven, ganzzahligen Wert steht, der nicht größer als 500 ist.
  6. 6
    A pharmaceutical composition comprising the modified polypeptide of anyone of claims 1 to 5, optionally in combination with a pharmaceutically acceptable carrier. A process for preparing a pharmaceutical composition which process comprises providing a modified polypeptide as defined in anyone of claims 1 to 5, optionally in combination with a pharmaceutically acceptable carrier. Composition pharmaceutique comprenant un polypeptide modifié selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, éventuellement en combinaison avec un support pharmaceutiquement acceptable. Pharmazeutisches Mittel, umfassend ein modifiziertes Polypeptid gemäß einem der Ansprüche 1 bis 5, gegebenenfalls in Kombination mit einem pharmazeutisch akzeptablen Träger. Procédé de préparation d'une composition pharmaceutique, le procédé comprenant la fourniture d'un polypeptide modifié tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 5, éventuellement en combinaison avec un support pharmaceutiquement acceptable. Procédé selon l'une des revendications 1 à 3, dans lequel l est un entier positif inférieur ou égal à 100. The process of one of the claims 1 to 3, wherein I is a positive integer of not more than 100. Verfahren gemäß einem der Ansprüche 1 bis 3, worin l für einen positiven, ganzzahligen Wert steht, der nicht größer als 100 ist. Verfahren zur Herstellung eines pharmazeutisches Mittels, wobei man bei diesem Verfahren ein modifiziertes Polypeptid gemäß einem der Ansprüche 1 bis 5, gegebenenfalls in Kombination mit einem pharmazeutisch akzeptablen Träger bereitstellt.
  7. 7
    Composition pharmaceutique selon la revendication 6, contenant le polypeptide modifié selon l'une quelconque des revendications 1 à 5 sous forme lyophilisée. Pharmazeutisches Mittel nach Anspruch 6, enthaltend das modifizierte Polypeptid gemäß einem der Ansprüche 1 bis 5 in lyophilisierter Form. Procédé selon l'une des revendications 1 à 3, dans lequel le groupe de formule (I) a une masse moléculaire inférieure ou égale à 30 000. Procédé selon la revendication 6, ce procédé comprenant la fourniture du polypeptide modifié tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 5 sous forme lyophilisée. The pharmaceutical composition of claim 6 containing the modified polypeptide of anyone of claims 1 to 5 in lyophilized form. The process of claim 6 which process comprises providing the modified polypeptide as defined in anyone of claims 1 to 5 in lyophilized form. The process of one of the claims 1 to 3, wherein the group of formula (I) has a molecular weight of not more than 30,000. Verfahren gemäß einem der Ansprüche 1 bis 3, worin die Gruppe der Formel (I) ein Molekulargewicht von nicht mehr als 30000 besitzt. Verfahren nach Anspruch 6, wobei man bei diesem Verfahren ein modifiziertes Polypeptid gemäß einem der Ansprüche 1 bis 5 in lyophilisierter Form bereitstellt.
  8. 8
    A process for preparing a chemically modified hG-CSF according to anyone of claims 1 to 5, comprising condensation of hG-CSF with a halide of formula (II) wherein R1, n, X and R3 are as defined hereinbefore;or condensation of hG-CSF with a carboxylic acid of formula (III)         R1(̵OCH2CH2)n-X-(CO)m(CH2)1-COOH     (III) wherein R1, n, X, m and I are as defined hereinbefore;or with a carboxylic acid of formula (IV) wherein R1, n, Z, X, R3 and p are as defined hereinbefore;provided that condensation is not performed with lysine depleted hG-CSF. A process for preparing a chemically modified hG-CSF according to anyone of claims 1 to 5, comprising condensation of hG-CSF with a halide of formula (II) wherein R1, n, X and R3 are as defined hereinbefore;or condensation of hG-CSF with a carboxylic acid of formula (III)         R1(̵OCH2CH2)n-X-(CO)m(CH2)1-COOH     (III) wherein R1, n, X, m and I are as defined hereinbefore;or with a carboxylic acid of formula (IV) wherein R1, n, Z, X, R3 and p are as defined hereinbefore;provided that condensation is not performed with lysine depleted hG-CSF. A process for preparing a pharmaceutical composition which process comprises providing a modified polypeptide as defined in anyone of claims 1 to 7, optionally in combination with a pharmaceutically acceptable carrier. Procédé de préparation d'un hG-CSF chimiquement modifié selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, comprenant la condensation de hG-CSF avec un halogénure de formule (II) dans laquelle R1, n, X et R3 sont tels que définis précédemment;ou la condensation de hG-CSF avec un acide carboxylique de formule (III)         R1-(OCH2CH2)n-X-(CO)m(CH2)1-COOH     (III) dans laquelle R1, n, X, m et l son tels que définis précédemment;ou avec un acide carboxylique de formule (IV) dans laquelle R1, n, Z, X, R3 et p sont tels que définis précédemment ;pour autant que la condensation n'est pas réalisée avec hG-CSF dépourvu de lysine. Procédé de préparation d'un hG-CSF chimiquement modifié selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, comprenant la condensation de hG-CSF avec un halogénure de formule (II) dans laquelle R1, n, X et R3 sont tels que définis précédemment;ou la condensation de hG-CSF avec un acide carboxylique de formule (III)         R1-(OCH2CH2)n-X-(CO)m-COOH     (III) dans laquelle R1, n, X, m et l sont tels que définis précédemment;ou avec un acide carboxylique de formule (IV) dans laquelle R1, n, Z, X, R3 et p sont tels que définis précédemment ;pour autant que la condensation n'est pas réalisée avec hG-CSF dépourvu de lysine. Procédé de préparation d'une composition pharmaceutique, ce procédé comprenant la fourniture d'un polypeptide modifié tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 7, éventuellement en combinaison avec un support pharmaceutiquement acceptable. Verfahren zur Herstellung eines chemisch modifizierten hG-CSF gemäß einem der Ansprüche 1 bis 5, umfassend die Kondensation von hG-CSF mit einem Halogenid der Formel (II) worin R1, n, X und R3 die oben angegebenen Bedeutungen besitzen;oder die Kondensation von hG-CSF mit einer Carbonsäure der Formel (III)         R1(̵OCH2CH2)n-X-(CO)m(CH2)1-COOH     (III) worin R1, n, X, m und l die oben angegebenen Bedeutungen besitzen;oder mit einer Carbonsäure der Formel (IV) worin R1, n, Z, X, R3 und p die oben angegebenen Bedeutungen besitzen, mit der Maßgabe, dass die Kondensation nicht mit Lysin-abgereichertem hG-CSF durchgeführt wird. Verfahren zur Herstellung eines chemisch modifizierten hG-CSF gemäß einem der Ansprüche 1 bis 5, umfassend die Kondensation von hG-CSF mit einem Halogenid der Formel (II) worin R1, n, X und R3 die oben angegebenen Bedeutungen besitzen;oder die Kondensation von hG-CSF mit einer Carbonsäure der Formel (III)         R1(̵OCH2CH2)n-X-(CO)m(CH2)1-COOH     (III) worin R1, n, X, m und l die oben angegebenen Bedeutungen besitzen;oder mit einer Carbonsäure der Formel (IV) worin R1, n, Z, X, R3 und p die oben angegebenen Bedeutungen besitzen, mit der Maβgabe, dass die Kondensation nicht mit Lysin-abgereichertem hG-CSF durchgeführt wird. Verfahren zur Herstellung eines pharmazeutisches Mittels, wobei man bei diesem Verfahren ein modifiziertes Polypeptid gemäß einem der Ansprüche 1 bis 7, gegebenenfalls in Kombination mit einem pharmazeutisch akzeptablen Träger bereitstellt.
  9. 9
    Procédé selon la revendication 8, ce procédé comprenant la fourniture du polypeptide modifié tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 7 sous forme lyophilisée. Procédé selon la revendication 8, comprenant la condensation de hG-CSF avec un acide carboxylique représenté par la formule (V) dans laquelle R1, n et X sont tels que définis ci-dessus, Z est O, S ou NH et p est un entier positif éventuellement variable. Procédé selon la revendication 8, comprenant la condensation de hG-CSF avec un acide carboxylique représenté par la formule (V) dans laquelle R1, n et X sont tels que définis ci-dessus, Z est O, S ou NH et p est un entier positif éventuellement variable. The process according to claim 8, comprising condensation of hG-CSF with a carboxylic acid represented by formula (V) wherein R1, n and X are as defined above, Z is O, S or NH and p is an optionally variable positive integer. The process according to claim 8, comprising condensation of hG-CSF with a carboxylic acid represented by formula (V) wherein R1, n and X are as defined above, Z is O, S or NH and p is an optionally variable positive integer. The process of claim 8 which process comprises providing the modified polypeptide as defined in anyone of claims 1 to 7 in lyophilized form. Verfahren nach Anspruch 8, umfassend die Kondensation von hG-CSF mit einer Carbonsäure der Formel (V) worin R1, n und X die oben angegebenen Bedeutungen besitzen, Z für O, S oder NH steht und p für einen gegebenenfalls variablen, positiven, ganzzahligen Wert steht. Verfahren nach Anspruch 8, unfassend die Kondensation von hG-CSF mit einer Carbonsäure der Formel (V) worin R1, n und X die oben angegebenen Bedeutungen besitzen, Z für O, S oder NH steht und p für einen gegebenenfalls variablen, positiven, ganzzahligen Wert steht. Verfahren nach Anspruch 8, wobei man bei diesem Verfahren ein modifiziertes Polypeptid gemäß einem der Ansprüche 1 bis 7 in lyophilisierter Form bereitstellt.
  10. 10
    Procédé selon la revendication 8 ou 9, caractérisé en ce que l'on ajoute l'halogénure ou l'acide carboxylique actif au polypeptide en une proportion (rapport molaire) de 2 à 100 fois la quantité de groupes amino présents dans la molécule du polypeptide, et en ce qu'on laisse le mélange réagir à une température de 4 à 37°C, de préférence de 4 à 10°C et à un pH de 7 à 10 pendant 1 heure à 2 jours, de préférence pendant 1 à 24 heures, grâce à quoi on produit le hG-CSF chimiquement modifié désiré. Procédé selon la revendication 8 ou 9, caractérisé en ce que l'on ajoute l'halogénure ou l'acide carboxylique actif au polypeptide en une proportion (rapport molaire) de 2 à 100 fois la quantité de groupes amino présents dans la molécule du polypeptide, et en ce qu'on laisse le mélange réagir à une température de 4 à 37°C, de préférence de 4 à 10°C, et à un pH de 7 à 10 pendant 1 heure à 2 jours, de préférence pendant 1 à 24 heures, grâce à quoi on produit le hG-CSF chimiquement modifié désiré. The process according to claim 8 or 9, characterized in that the halide or active carboxylic acid compound is added to the polypeptide in a proportion (mole ratio) of 2 to 100 times the amount of amino groups present in the polypeptide molecule and the mixture is allowed to react at a temperature of 4 to 37°C, preferably 4 to 10°C, and at pH 7 to 10 for 1 hour to 2 days, preferably 1 to 24 hours, whereby the desired chemically modified hG-CSF is produced. The process according to claim 8 or 9, characterized in that the halide or active carboxylic acid compound is added to the polypeptide in a proportion (mole ratio) of 2 to 100 times the amount of amino groups present in the polypeptide molecule and the mixture is allowed to react at a temperature of 4 to 37°C, preferably 4 to 10°C,and at pH 7 to 10 for 1 hour to 2 days, preferably 1 to 24 hours, whereby the desired chemically modified hG-CSF is produced. Verfahren nach Anspruch 8 oder 9, dadurch gekennzeichnet, daß man das Halogenid oder die aktive Carbonsäureverbindung zum Polypeptid in einem Anteil (Molverhältnis) entsprechend dem 2- bis 100-fachen der Menge an in dem Polypeptidmolekül vorliegenden Aminogruppen zugibt und das Gemisch bei einer Temperatur von 4 bis 37°C, vorzugsweise 4 bis 10°C, und bei einem pH von 7 bis 10 1 Stunde bis 2 Tage, vorzugsweise 1 bis 24 Stunden, reagieren läßt, wobei der gewünschte chemisch modifizierte hG-CSF produziert wird. Verfahren nach Anspruch 8 oder 9, dadurch gekennzeichnet, daß man das Halogenid oder die aktive Carbonsäureverbindung zum Polypeptid in einem Anteil (Molverhältnis) entsprechend dem 2- bis 100-fachen der Menge an in dem Polypeptidmolekül vorliegenden Aminogruppen zugibt und das Gemisch bei einer Temperatur von 4 bis 37°C, vorzugsweise 4 bis 10°C, und bei einem pH von 7 bis 10 1 Stunde bis 2 Tage, vorzugsweise 1 bis 24 Stunden, reagieren läßt, wobei der gewünschte chemisch modifizierte hG-CSF produziert wird.
  11. 11
    The use of at least one modified polypeptide of claims 1 to 5 for preparing a pharmaceutical composition showing leukocyte growth promoting activity. The use of at least one modified polypeptide of claims 1 to 5 for preparing a pharmaceutical composition showing leukocyte growth promoting activity. Utilisation d'au moins un polypeptide modifié selon les revendications 1 à 5 pour la préparation d'une composition pharmaceutique manifestant une activité de promotion de la croissance des leucocytes. Utilisation d'au moins un polypeptide modifié selon les revendications 1 à 5 pour la préparation d'une composition pharmaceutique manifestant une activité de promotion de la croissance des leucocytes. Verwendung von wenigstens einem modifizierten Polypeptid nach Anspruch 1 bis 5 zur Herstellung eines pharmazeutischen Mittels mit Leukozytenwachstum-fördernder Aktivität. Verwendung von wenigstens einem modifizierten Polypeptid nach Anspruch 1 bis 5 zur Herstellung eines pharmazeutischen Mittels mit Leukozytenwachstum-fördernder Aktivität.
Independent claims11