PL214848B1

Glyphosate tolerant wheat plant 33391 and compositions and methods for detection thereof

Abstract

This record has no abstract on file.

PL214848B1, drawing sheet 1
Sheet 1 of 7

Term

Term ended

Expired 25 September 2021, 5 years ago.

  1. Priority
  2. Filed
  3. Granted
  4. Expired
  5. Today

20 claims: 15 independent, 5 dependent

  1. 1
    Sposób wytwarzania tolerancyjnej na glifosat rośliny pszenicy, znamienny tym, że zawiera etapy w których:(1) uzyskuje się konstrukt DNA zawierający pierwszą i drugą kasetę ekspresji, przy czym wspomniana pierwsza kaseta ekspresji w operacyjnym połączeniu zawiera: (i) promotor aktyny 1 ryżu;(ii) intron aktyny 1 ryżu;(iii) cząsteczkę DNA kodującą tranzytowy peptyd chloroplastu;(iv) cząsteczkę DNA kodującą EPSPS z tolerancją glifosatu;i (v) cząsteczkę DNA terminatora transkrypcji;a wspomniana druga kaseta ekspresji zawiera w połączeniu operacyjnym (a) starter CaMV 35S;(b) intron Hsp70;(c) cząsteczkę DNA kodującą tranzytowy peptyd chloroplastu;(d) cząsteczkę DNA kodującą EPSPS z tolerancją glifosatu;i (e) cząsteczkę DNA terminatora transkrypcji;i (2) transformuje się komórki pszenicy wspomnianym konstruktem DNA;i (3) regeneruje się wspomnianą komórkę pszenicy do rośliny pszenicy;i (4) traktuje się wspomnianą roślinę pszenicy skuteczną dawką glifosatu;i (5) wybiera się płodne rośliny pszenicy, które wegetatywnie i reprodukcyjnie tolerują glifosat i zawierają cząsteczkę DNA zawierającą nukleotydy 245-270 SEQ ID nr 5 albo nukleotydy 87-113 SEQ ID nr 6.
  2. 2
    Płodna tolerująca glifosat roślina pszenicy wytworzona sposobem, jak określono w zastrz. 1.
  3. 3
    Nasiono pszenicy wytworzone sposobem, jak określono w zastrz. 1.
  4. 4
    Para cząsteczek DNA zawierająca:pierwszą cząsteczkę DNA i drugą cząsteczkę DNA, przy czym pierwsza cząsteczka DNA zawiera co najmniej 8 sąsiadujących ze sobą nukleotydów od nukleotydu 1 do 257 SEQ ID nr: 5 lub jej pełnego komplementu, a druga cząsteczka DNA zawiera co najmniej 8 sąsiadujących ze sobą nukleotydów od nukleotydu 258 do 399 z SEQ ID nr: 5 lub jej pełnego komplementu, i ta para cząsteczek DNA kiedy jest stosowana w metodzie amplifikacji DNA wytwarza amplikon obejmujący nukleotydy 245-270 o sekwencji SEQ ID nr: 5
  5. 5
    Para cząsteczek DNA zawierająca:pierwszą cząsteczkę DNA i drugą cząsteczkę DNA, przy czym pierwsza cząsteczka DNA zawiera co najmniej 8 sąsiadujących ze sobą nukleotydów od nukleotydu 1 do 100 z SEQ ID nr: 6 pszenicy lub jej pełnego komplementu, a druga cząsteczka DNA zawiera co najmniej 8 sąsiadujących ze sobą nukleotydów od nukleotydu 101 do 431 z SEQ ID nr: 6 lub jej pełnego komplementu, i ta para cząsteczek DNA kiedy jest stosowana w metodzie amplifikacji DNA wytwarza amplikon obejmujący nukleotydy 87-113 sekwencji SEQ ID nr: 6.
  6. 6
    Sposób wykrywania obecności diagnostycznej cząsteczki DNA dla tolerującej glifosat rośliny pszenicy zawierającej nukleotydy 245-270 SEQ ID nr 5 albo nukleotydy 87-113 SEQ ID nr 6 lub jej potomstwa, znamienny tym, że obejmuje etapy w których:(a) ekstrahuje się próbkę DNA ze wspomnianej rośliny pszenicy lub jej nasion potomnych i roślin potomnych lub ich części;i (b) dostarcza się cząsteczki DNA startera jak zdefiniowano w zastrz. 4 lub zastrz. 5;i (c) zapewnia się warunki amplifikacji DNA;i (d) przeprowadza się wspomnianą reakcję amplifikacji DNA, wytwarzając w ten sposób cząsteczkę DNA amplikonu;i (e) wykrywa się cząsteczkę DNA amplikonu.
  7. 7
    Para cząsteczek DNA według zastrz. 4, w której wspomniane cząsteczki DNA zawierają SEQ ID nr:7 i SEQ ID nr: 8.
  8. 8
    Sposób wykrywania sekwencji zawierającej nukleotydy 245-270 SEQ ID nr 5 albo nukleotydy 87-113 SEQ ID nr 6 w próbce DNA, znamienny tym, że sposób zawiera etapy, w których:PL 214 848 B1 (a) ekstrahuje się próbkę DNA z rośliny pszenicy;(b) kontaktuje się próbki DNA z cząsteczką DNA, zawierającą nukleotydy 245-270 z sekwencji SEQ ID nr: 5;lub nukleotydy 87-113 z SEQ ID nr: 6, i (c) poddaje się próbkę i sondę ostrym warunkom hybrydyzacji, i (d) wykrywa się hybrydyzację sondy z tym DNA.
  9. 9
    Sposób wytwarzania rośliny pszenicy z tolerancją glifosatu, znamienny tym, że:zawiera etapy w których (a) krzyżuje się potomstwo pszenicy tolerującej glifosat zawierającej sekwencję zawierającą nukleotydy 245-270 SEQ ID nr 5 albo nukleotydy 87-113 SEQ ID nr 6 z roślinami pszenicy nie tolerującymi glifosatu;i (b) wytwarza się potomstwo roślin pszenicy tej krzyżówki;(c) ekstrahuje się próbki DNA z potomstwa roślin pszenicy;(d) kontaktuje się próbki DNA z parą starterów jak określono w zastrz. 4 lub zastrz. 5;(e) przeprowadza się reakcję amplifikacji DNA;i (f) selekcjonuje się potomstwo roślin pszenicy, które produkuje amplikon obejmujący nukleotydy 245-270 z SEQ ID nr: 5 lub nukleotydy 87-113 z SEQ ID nr: 6.
  10. 10
    Zestaw do wykrywania DNA, znamienny tym, że zawiera kontrolę pozytywną dla sekwencji zawierającej nukleotydy 245-270 SEQ ID nr 5 albo nukleotydy 87-113 SEQ ID nr 6; i albo (a) wspomnianą parę starterów jak zdefiniowano w zastrz. 4 lub 5; (b) sondę zawierającą fragmenty sekwencji SEQ ID nr:5 zawierającą nukleotydy 245-270 o sekwencji SEQ ID nr: 5;albo (c) sondę zawierającą fragmenty sekwencji SEQ ID nr: 6 zawierającą nukleotydy 87-113 o sekwencji SEQ ID nr: 6.
  11. 11
    Nasiono transgenicznej pszenicy zwierające sekwencję zawierającą nukleotydy 245-270 SEQ ID nr 5 albo nukleotydy 87-113 SEQ ID nr 6, przy czym genom wspomnianego nasiona obejmuje insert DNA zawierający dwie kopie cząsteczki DNA kodującego EPSPS z tolerancją glifosatu, gdzie wspomniany insert posiada połączenie 5' z genomowym DNA pszenicy obejmujące SEQ ID nr:5 oraz posiada połączenie 3' z genomowym DNA pszenicy obejmujące SEQ ID nr: 6.
  12. 12
    Roślina pszenicy wytworzona przez hodowlę nasion jak zdefiniowano w zastrz. 11.
  13. 13
    Sposób wytwarzania rośliny pszenicy tolerującej stosowanie glifosatu, znamienny tym, że zawiera etapy w których:(a) krzyżuje się płciowo pierwszą roślinę pszenicy zawierającą sekwencję zawierającą nukleotydy 245-270 SEQ ID nr 5 albo nukleotydy 87-113 SEQ ID nr 6 z drugą rośliną pszenicy z brakiem tolerancji na glifosat, wytwarzając przez to mnogość roślin pierwszego pokolenia;(b) wybiera się roślinę pierwszego pokolenia, (c) doprowadza się do samozapylenia wspomnianą roślinę pierwszego pokolenia, wytwarzając w ten sposób mnogość roślin drugiego pokolenia;(d) nanosi się herbicyd glifosat na wspomnianą roślinę drugiego pokolenia;(e) wybiera się ze wspomnianych roślin drugiego pokolenia roślinę tolerującą glifosat.
  14. 14
    Sposób selektywnego kontrolowania chwastów na polu zawierającym uprawę pszenicy, znamienny tym, że zawiera etapy, w których:(a) sadzi się nasiona jak określono w zastrz. 11, i (b) nanosi się na uprawę pszenicy i chwasty na polu wystarczającą ilość herbicydu glifosatu dla kontrolowania chwastów bez znacznego uszkadzania uprawy pszenicy.
  15. 15
    Cząsteczka DNA obejmująca SEQ ID nr:5 lub jej fragment zawierający nukleotydy 245-270 z SEQ ID nr: 5.
  16. 16
    Cząsteczka DNA obejmująca SEQ ID nr:6 lub jej fragment zawierający nukleotydy 87-113 z SEQ ID nr: 6.
  17. 17
    Roślina pszenicy tolerująca glifosat, której genom zawiera insert DNA zawierający dwie kasety ekspresyjne kodujące oporną na glifosat syntazę 5-enolopirogroniano-szikimowo-3-fosforanową (EPSPS) z Agrobacterium tumefaciens (ARGl) sp. Szczep CP4 i sekwencje połączenia spinające miejsce insertu zawierające nukleotydy 245-270 o SEQ ID nr:5 i nukleotydy 87-113 o sekwencji SEQ ID nr: 6.
  18. 18
    Roślina pszenicy zdolna do wytwarzania diagnostycznego amplikonu obejmującego SEQ ID nr:5 lub SEQ ID nr: 6. PL 214 848 B1
  19. 19
    Nasiono zdolne do wytwarzania diagnostycznego amplikonu obejmującego SEQ ID nr:5 lub SEQ ID nr: 6.
  20. 20
    Komórka zdolna do wytwarzania diagnostycznego amplikonu obejmującego SEQ ID nr:5 lub SEQ ID nr: 6.
Independent claims20