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MXPA03002145A

Homologous 28-kilodalton immunodominant protein genes of ehrlichia canis and uses thereof.

Abstract

The present invention is directed to the cloning, sequencing and expression of homologous immunoreactive 28-kDa protein genes, p28-1, -2, -3, -5, -6, -7, -9, from a polymorphic multiple gene family of Ehrlichia canis. Further disclosed is a multigene locus encoding all nine homologous 28-kDa protein genes of Ehrlichia canis. Recombinant Ehrlichia canis 28-kDa proteins react with convalescent phase antiserum from an E.canis-infected dog, and may be useful in the development of vaccines and serodiagnostics that are particularly effective for disease prevention and serodiagnosis.

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Expired 12 September 2021, 5 years ago.

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20 claims: 5 independent, 15 dependent

  1. 1
    REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones:1. Una secuencia aislada de ADN que codifica para una proteína de 30 kilodaltones de Ehrlichia canis, caracterizada la proteína porque es inmunorreactiva con el suero anti-Ehrlichia canis.
  2. 2
    La secuencia de ADN de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque la proteína comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste de las SEQ ID Nos. 2, 4, 6, 40, 42, 44 y 46 .
  3. 3
    La secuencia de ADN de conformidad con la reivindicación 2, caracterizada porque la proteína tiene una secuencia de señal N-terminal.
  4. 4
    La secuencia de ADN de conformidad con la reivindicación 3, caracterizada porque la proteína es posttraduccionalmente modificada a una proteína de 28 kilodaltones.
  5. 5
    La secuencia de ADN de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el ADN comprende una secuencia seleccionada del grupo que consiste de las SEQ ID Nos. 1, 3, 5, 39, 41, 43 y 45.
  6. 6
    La secuencia de ADN de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el ADN está contenido en un locus simple de Ehrlichia canis.
  7. 7
    La secuencia de ADN de conformidad con la reivindicación 6, caracterizada porque el locus es un locus de genes múltiples de 10,677 pares de bases de longitud.
  8. 8
    La secuencia de ADN de conformidad con la reivindicación 7, caracterizada porque el locus contiene los genes que codifican para las proteínas homólogas de 28 kilodaltones de Ehrlichia canis.
  9. 9
    La secuencia de ADN de conformidad con la reivindicación 8, caracterizada porque las proteínas homólogas de 28 kilodaltones de Ehrlichia canis son seleccionadas del grupo que consiste de p28-l, p28-2, p283, p28-4, p28-5, p28-6, p28-7, p28-8 y p28-9.
  10. 10
    Un vector, caracterizado porque comprende la secuencia de ADN de conformidad con la reivindicación 1.
  11. 11
    El vector de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado porque el vector es un vector de expresión capaz de expresar un péptido o polipéptido codificado por una secuencia seleccionada del grupo que consiste de las SEQ ID Nos. 1, 3, 5, 39, 41, 43 y 45, cuando el vector de expresión es introducido en una célula.
  12. 12
    Una proteína recombinante, caracterizada porque comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste de las SEQ ID Nos. 2, 4, 6, 40, 42, 44 y 46.
  13. 13
    La proteína recombinante de conformidad con la reivindicación 12, caracterizada porque la secuencia de aminoácidos es codificada por un segmento de ácido nucleico que comprende una secuencia seleccionada del grupo que consiste de las SEQ ID Nos. 1, 3, 5, 39, 41, 43 y 45.
  14. 14
    Una célula huésped, caracterizada porque comprende un segmento de ácido nucleico seleccionado del grupo que consiste de las SEQ ID Nos. 1, 3, 5, 39, 41, 43 y 45 .
  15. 15
    Un método para producir la proteína recombinante de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado el método porque comprende los pasos de:la obtención de un vector que comprende una región de expresión que incluye una secuencia que codifica para la secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste de las SEQ ID Nos. 2, 4, 6, 40, 42, 44 y 46, operativamente enlazada a un promotor;la transfección del vector dentro de una célula;y el cultivo de la célula bajo condiciones efectivas para la expresión de la región de expresión.
  16. 16
    Un anticuerpo, caracterizado porque es inmunorreactivo con un polipéptido que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste de las SEQ ID Nos. 2, 4, 6, 40, 42, 44 y 46.
  17. 17
    Un método para inhibir la infección por Ehrlichia canis en un sujeto, caracterizado porque comprende los pasos de:identificar un sujeto antes de la exposición o sospechoso de estar expuesto a o infectado con Ehrlichia cani s;y administrar una composición que comprende un antígeno de 29 kDa de Ehrlichia canis, en una cantidad efectiva para inhibir la infección por Ehrlichia canis.
  18. 18
    El método de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado porque el antígeno de 28 kDa es una proteína recombinante que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste de las SEQ ID Nos. 2, 4, 6, 40, 42, 44 y 46.
  19. 19
    El método de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque la proteína recombinante es codificada por un gen que comprende una secuencia seleccionada del grupo que consiste de las SEQ ID NOS. 1, 3, 5, 39, 41, 43 y 45.
  20. 20
    El método de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado porque la composición que comprende un antígeno de 2Θ kDa es dispersada en un portador farmacéuticamente aceptable.
Independent claims20