Inhibitors of î±-amino-î²-carboxymuconic acid semialdehyde decarboxylase

INHIBIDORES DE ÁCIDO d-AMINO-B-CARBOXIMUCÓNICO SEMIALDHEÍDO

DESCARBOXILASA

SOLICITUDES RELACIONADAS

Esta solicitud reclama el beneficio de, y la prioridad de la Solicitud Provisional de E.U.A. No. 62/043,853 presentada el 29 de agosto de 2014, cuyo contenido se incorpora en la presente como referencia en su totalidad.

CAMPO DELAJNVENCIÓN

La presente descripción se refiere a compuestos capaces de modular la actividad de semialdehído descarboxilasa del ácido o-amino-p-carboximucónico (ACMSD). Los compuestos de la descripción pueden usarse en métodos para la prevención y/o el tratamiento de enfermedades y trastornos asociados con defectos en la biosíntesis de NAD⁺, por ejemplo, trastornos metabólicos, enfermedades neurodegenerativas, enfermedades inflamatorias crónicas, enfermedades renales y enfermedades asociadas con el envejecimiento.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION

ACMSD es una enzima crítica para el metabolismo del triptófano, y regula la biosíntesis de NAD⁺ a partir de triptófano. ACMSD es una amidohidrolasa dependiente de zinc que participa en el ácido picolínico (PA), ácido quinolínico (QA) y homeostasis NAD. ACMSD se encuentra en un punto de ramificación de la ruta biosintética de NAD⁺ del triptófano y determina el destino final del aminoácido, es decir, la transformación en PA, la oxidación completa a través del ciclo del ácido cítrico o la conversión en NAD⁺ mediante la síntesis de QA.

ACMSD se ha purificado de tejidos humanos de hígado, riñón y cerebro. Hay dos ¡soformas ACMSD1 y ACMSD2 derivadas de un empalme diferencial de la transcripción de genes ACMSD pero sólo ACMSD1 está dotado de actividad enzimática. ACMSD1 dirige ACMS (semialdehído del ácido o-amino^-carboximucónico) a la vía de acetil-CoA, y cuando ACMSD1 se inhibe, ACMS no se convierte enzimáticamente en ácido quinolínico (QA) que conduce a la formación de NAD⁺ y un aumento en el nivel intracelular de NAD⁺.

Se ha demostrado que los niveles incrementados de NAD⁺ protegen contra la degeneración neuronal, mejoran la función muscular y el metabolismo oxidativo en ratones, y mejoran la vida útil de los gusanos. Mientras que los niveles reducidos de NAD⁺ se han asociado con

W

OO <0 en <o

IMPI una gama de estados fisiopatológicos incluyendo la diabetes tipo 2 (T2D), hiperlipidemia (colesterol elevado y TAG), enfermedades mitocondríales, neutropenia, cánceres y trastornos renales.

La inhibición de ACMSD representa así un nuevo enfoque para aumentar los niveles de NAD⁺ y modificar las patofisiologías de la enfermedad asociadas con defectos en la biosíntesis de NAD⁺.

BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCION

Es un objeto de las modalidades de la descripción proporcionar nuevas series de compuestos capaces de modular la actividad de semialdehído descarboxilasa del ácido a-amino-βcarboximucónico (ACMSD), compuestos que son útiles para la prevención y/o el tratamiento de enfermedades y trastornos asociados con defectos en la biosíntesis de NAD⁺, por ejemplo, trastornos metabólicos, enfermedades neurodegenerativas, enfermedades inflamatorias crónicas, enfermedades renales y enfermedades asociadas con el envejecimiento.

Los compuestos de fórmula (I), como se definen en el presente documento, pueden usarse en el tratamiento de una enfermedad o trastorno en el que la ACMSD juega un papel. La descripción presenta métodos para tratar una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de ACMSD o con anormalidades en la biosíntesis de NAD⁺ administrando a sujetos que padecen o son susceptibles de desarrollar una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de ACMSD una cantidad terapéuticamente eficaz de uno o más compuestos que incrementa la actividad intracelular NAD⁺ por la inhibición de ACMSD1, en una cantidad suficiente para activar sirtuinas (SIRTs) y los objetivos aguas abajo de SIRT, tales como PGC-lo, FoxOl y/o superóxido dismutasa (SOD). Los métodos de la presente descripción se pueden usar en el tratamiento de enfermedades dependientes de ACMSD mediante la inhibición de ACMSD. La inhibición de ACMSD puede proporcionar un nuevo enfoque para la prevención y tratamiento de trastornos metabólicos, enfermedades neurodegenerativas, enfermedades inflamatorias crónicas, enfermedades renales, enfermedades asociadas con el envejecimiento y otras enfermedades dependientes de ACMSD, o enfermedades caracterizadas por síntesis de NAD⁺ defectuosa.

Por consiguiente, un primer aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto representado por la fórmula (I):

Rí

R^d

I I

I i

R^f

R¹ (I)

IMPI o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo, en donde:

X es O, OH, o Cl;

L es -(CH₂)_mCH₂CH₂-, -(CH₂)_mY(CH₂)_p-, -(CH₂)_mC(O)(CH₂)_p-, -(CH₂)_mC(O)O(CH₂)_p-, -(CH₂)_mC(O)NR²(CH2)p-, o -(CH2)mNR²C(O)(CH2)_p;

Y es O, N o S(O)_q;

R¹ es Ce-Cio arilo o heteroarilo, en donde el arito y heteroarilo están sustituidos con R^a y R^b, y sustituido opcionalmente con una o más R^e;

R² es H o CrC₆ alquilo;

una de R^a y R^b es hidrógeno y el otro es -(CH2)rCO2R^x, -OCH2CO₂R^X, -(CH2)rtetrazol, -(CH2)rOxadiazolona, -(CH2)rtetrazolona, -(CH2)rtiadiazolol, -(CH2)r isoxazol-3-ol, -(CH2)rP(O)(OH)OR^x, -(CH2)_rS(O)₂OH, -(CH₂)_rC(O)NHCN, o -(CH₂)_rC(O)NHS(O)₂alquilo;

R^c es H, CrC6 alquilo, CrC6 haloalquilo, halógeno, -CN, -OR^X, -CO2R^X, o NO₂;

R^d es metilo, arilo de 5 a 10 miembros opcionalmente sustituido, heteroarilo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido, o carbociclo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido;

cada R^x es independientemente en cada ocurrencia hidrógeno o Ci-C₆ alquilo;

cada R^e es independientemente Ci-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halógeno, -OR^y, CrC6 haloalquilo, -NHR^Z, -OH, o -CN;

R^f es H o está ausente;

cada R^y y R^z es independientemente hidrógeno, CrC₆ alquilo, o CrC₆ haloalquilo;

cada m y p es independientemente 0,1 ó 2, donde m + p <3;

q es 0, 1, o 2;

r es 0 o 1; y la línea de puntos es un doble enlace opcional;

con la condición de que R^c no sea hidrógeno o -CN cuando X es O, L es -SCH₂- y R es fenilo opcionalmente sustituido, R^c no sea Ci-C6 alquilo cuando X es O, L es -SCH2- y R^d es metilo, y que R^c no sea -CN cuando X es O, L es -SCH2- y R^d es 2-furilo.

Un segundo aspecto de la presente descripción se refiere a composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y al menos uno de un portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable.

Un tercer aspecto de la descripción se refiere a un método de tratamiento de una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de α-amino-β-carbox¡muconato-ε-semialdehído descarboxilasa (ACMSD) que comprende administrar al sujeto que padece de, o es susceptible a

IMPI desarrollar una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de ACMSD una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de fórmula (I).

Un cuarto aspecto de la descripción se refiere a un método para prevenir una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de α-am¡no-β-carbox¡muconato-ε-semialdehído desearboxílasa (ACMSD) que comprende administrar al sujeto que padece de, o es susceptible a desarrollar una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de ACMSD una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de fórmula (I).

Un quinto aspecto de la descripción se refiere a un método para reducir el riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de a-amino-p-carboximuconato-e-semialdehído decarboxilasa (ACMSD) que comprende administrar al sujeto que padece de, o es susceptible a desarrollar una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de ACMSD una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de fórmula (I).

Un sexto aspecto de la descripción se refiere a un método de tratamiento de una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺) que comprende administrar al sujeto que padece de, o es susceptible a desarrollar una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de NAD⁺ una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de fórmula (I).

Un séptimo aspecto de la descripción se refiere a un método para prevenir una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺) que comprende administrar al sujeto que padece de, o es susceptible a desarrollar una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de NAD⁺ una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de fórmula (I).

Un octavo aspecto de la descripción se refiere a un método para reducir el riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺) que comprende administrar al sujeto que padece de, o es susceptible a desarrollar una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de NAD⁺ una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de fórmula (I).

Un noveno aspecto de la descripción se refiere a un método para tratar un trastorno asociado con disfunción mitocondrial que comprende administrar al sujeto que sufre de o es susceptible al desarrollo de un trastorno metabólico una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de fórmula (I) que incrementa el dinucleótido de nicotinamida adenina intracelular (NAD⁺).

Un décimo aspecto de la descripción se refiere a un método para promover el metabolismo oxidativo que comprende administrar al sujeto que padece o es susceptible al desarrollo de un trastorno metabólico una cantidad terapéuticamente eficaz de uno o más

IMPI compuestos de fórmula (I) que aumenta el dinucleótido de nicotinamida adenina intracelular (NAD⁺).

Un décimo primer aspecto de la descripción se refiere a un método para la fabricación de un medicamento para tratar una enfermedad o afección mediada por ACMSD, donde el medicamento comprende un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Un décimo segundo aspecto de la descripción se refiere a una composición farmacéutica para usar en un método para tratar una enfermedad o afección mediada por ACMSD, donde el medicamento comprende un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Un décimo tercer aspecto de la descripción se refiere a un método de tratamiento de una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de α-amino-β-carboximuconato-ε-sem¡aldehído descarboxilasa (ACMSD), que comprende administrar a un sujeto que lo necesite, una cantidad terapéuticamente eficaz de compuesto que tiene una de las siguientes fórmulas:

NC

NH

NC

NH r^Y^N

NC

NC

NH

NH

NH

NC

NH

NC

NH

NC

NH

Cl co₂h;

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IMPI

INSTITUTO MEXICANO DE LA PROPIEDAD INDUSTRIAL

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NH o

NH

NC

NH

S

N

S í^V^N

O o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

S

CO₂H

H N

OH

IMPI

Un décimo cuarto aspecto de la descripción se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la fabricación de un medicamento para tratar, prevenir o reducir el riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de aamino-p-carboximuconato-E-semialdehído descarboxilasa (ACMSD).

Un décimo quinto aspecto de la descripción se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la fabricación de un medicamento para tratar, prevenir o reducir el riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺).

Un décimo sexto aspecto de la descripción se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la elaboración de un medicamento para el tratamiento, prevención o reducción del riesgo de un trastorno asociado con disfunción mitocondrial.

Un décimo séptimo aspecto de la descripción se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la elaboración de un medicamento para promover el metabolismo oxidativo.

Un décimo octavo aspecto de la descripción se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I), una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la fabricación de un medicamento para tratar, prevenir o reducir el riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de aamino-p-carboximuconata-e-semialdehído decarboxilasa (ACMSD).

Un décimo noveno aspecto de la descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso como un medicamento para el tratamiento, prevención o reducción del riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺).

Un vigésimo aspecto de la descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso como un medicamento para el tratamiento, prevención o reducción del riesgo de un trastorno asociado con disfunción mitocondrial.

Un vigésimo primer aspecto de la descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso en el tratamiento, prevención o reducción del riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺).

Un vigésimo segundo aspecto de la descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso en el tratamiento, prevención o reducción del riesgo de un trastorno asociado con disfunción mitocondrial.

Un vigésimo tercer aspecto de la descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en la promoción del metabolismo

IMPI oxidativo.

Un vigésimo cuarto aspecto de la descripción se refiere a un compuesto que tiene una de las siguientes fórmulas:

NC

NH

NC

NH /\_iX/^_y/OO2H /VY/^CO2H

NC

NH

NC

NH

NH z\/^/^C02H

NC

A_s/x/^co₂h

NH /x/^/C0₂H

NC

NH

NC

NH

AY /χ/^,ΥΟζΗ

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NC

NH

NC

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Br

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NH γΥ n^s^AYA⁰^

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NC

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NH

NH

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N H

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CO₂H

Cl

NC

NH

OH /\/^/CO₂H o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de a-amino-p-carboximuconato-e-semialdehído decarboxilasa (ACMSD).

Un vigésimo quinto aspecto de la descripción se refiere a un compuesto que tiene una de las siguientes fórmulas:

NC

NH

NC

NH í^V^N /^\_^.CO₂H

NC

NH

NH /_X^/CO₂H

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CO₂H

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S /\X^/CO₂H o

NH co₂h

NH

N^s^^Y^V^CO^

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N

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N H

NH

CO₂H

Cl

NC

NH

OH o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para usarse como un medicamento para el tratamiento de una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de o-amino-p-carboximuconato-c-semialdehído decarboxilasa (ACMSD).

Un vigésimo sexto aspecto de la descripción se refiere a un compuesto que tiene una de las siguientes fórmulas:

NC

NH

NC

NH

NC

NH

NC

NH

NC

NH

NH

NC

NC

NH

NH /X^X/C0₂H

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IMPI

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Cl &lt;^Y^N

NH

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NH

Cl /\X^/^CO2Et /\^χ^/θΟ₂Η

<img file="MX389591B_D0003.tif" />

CO₂H x^x\x^^'CO₂H

N-N NH N

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NH z\A n^ s^'Y^'Y⁰⁰^

NC

NH r/Y^N^S^Y/Y

CO₂H

NH sYYYOzH

NH

NQ /=0 N H

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NH

CO₂H

NC

NH

OH n^s^xY^xY&lt;^C0₂H o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para usarse en el tratamiento de una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de a-amino-p-carboximuconato-e-semialdehído decarboxilasa (ACMSD).

O w

o σι &lt;o

IMPI

En ciertos aspectos, los compuestos moduladores de ACMSD pueden administrarse solos o en combinación con otros compuestos, incluyendo otros compuestos moduladores de ACMSD u otros agentes terapéuticos.

A menos que se defina de otra forma, todos los términos técnicos y científicos utilizados en la presente tienen el mismo significado que entiende comúnmente un experto en la técnica al cual pertenece esta invención. En la especificación, las formas singulares también incluyen el plural a menos que el contexto claramente indique lo contrario. Aunque se pueden usar métodos y materiales similares o equivalentes a los descritos aquí en la práctica y ensayo de la descripción, se describen a continuación métodos y materiales adecuados. Todas las publicaciones, solicitudes de patentes, patentes y otras referencias mencionadas aquí están incorporadas por referencia. Las referencias citadas aquí no son admitidas para ser técnica previa a la descripción reclamada. En caso de conflicto, la presente especificación, incluyendo definiciones, se controlarán. Además, los materiales, métodos y ejemplos son ilustrativos y no pretenden ser limitantes.

Otras características y ventajas de la descripción serán evidentes de la siguiente descripción detallada y reivindicaciones.

BREVE DESCRIPCION DE LOS DIBUJOS

La figura 1 es un gráfico de los niveles de NAD⁺ medidos en hepatocitos primarios humanos tratados con el compuesto 4, detectado por LC-EM/EM.

La figura 2 es un gráfico de los niveles de NAD⁺ medidos en hepatocitos primarios murinos tratados con diferentes concentraciones del compuesto 17 durante 24 horas y detectados por LC-EM/EM. Los datos indican un aumento en los niveles de NAD⁺ en hepatocitos primarios murinos tratados con el compuesto 17.

La figura 3 es un gráfico del contenido de NAD⁺ medido en hepatocitos primarios humanos tratados con diversas concentraciones del compuesto 1 y mono-(2-etilhexil)ftalato (MEHP), como un control.

La figura 4A es un gráfico de la expresión génica de Acmsd, Sod-1 y Sod-2 como se determinó por RT-qPCR en células AML-12 tratadas con el compuesto 1 durante 24 horas. La figura 4B es un gráfico de la expresión génica de Sod-1 y Sod-2 como se determinó por RT-qPCR en células Hepa-1,6 tratadas con el compuesto 1 durante 24 horas. La figura 4C es un gráfico de la expresión génica de Acmsd, Sod-1, Sod-2 y Pgcla según se determinó por RT-qPCR en hepatocitos de ratón primarios tratados con el compuesto 17 durante 24 horas. Los gráficos de barras representan la media ± SEM, *** p &lt; 0.005

La figura 5A es un gráfico que muestra la modulación de la actividad de SOD2 en

IMPI células AML-12 tratadas durante 24 horas con el compuesto 1. La figura 5B muestra un gráfico de la modulación de la actividad SOD2 en células AML-12 tratadas durante 24 horas con el compuesto 17. La figura 5C muestra una gráfica de la modulación de la actividad SOD2 en células de hepatocitos murinos primarios tratadas durante 24 horas con el compuesto 17.

La figura 6A es un gel que muestra el efecto del compuesto 1 sobre los niveles de fosforilación de FoxOl. La figura 6B es un gel que muestra el efecto del compuesto 17 sobre los niveles de fosforilación de FoxOl.

La figura 7A es un gráfico de los cambios en la expresión de acsmd-1 y sod-3 a los niveles de ARNm medidos en gusanos de tipo salvaje N2 al día 2 de la edad adulta por silenciamiento acmsd-1 ARNi en Caenorhabditis elegans (C. elegans). La figura 7B es una gráfica de la inducción de la expresión de sod-3 a niveles de proteína en gusanos N2 al día 3 de la edad adulta, cuantificada usando la cepa informadora gfp de SOD-3, después del silenciamiento de ARNi acmsd-1 en C. elegans. La figura 7C es un gráfico que muestra la supervivencia de los gusanos en la subregulación de acmsd-1 alimentando un ARNi específico en C. elegans. La figura 7C muestra que la sub-regulación de acmsd-1 mejora la supervivencia de gusanos en una forma dependiente de SIR2.1 y DAF-16. La figura 7D es un gráfico que muestra que la sub-regulación de acmsd-1 mejora la resistencia al estrés de los gusanos cuando están expuestos al estrés oxidativo inducido por paraquat. La figura 7E es un gráfico que muestra la movilidad de los gusanos en el tiempo alimentados con acmsd-1 ARNi en condición de estrés oxidativo inducida por paraquat. Como las figuras 7C a 7E muestran que la expresión acmsd-1 reducida mejora la supervivencia y la aptitud de los gusanos bajo estrés oxidativo inducido por paraquat. La figura 7F es un gráfico que muestra la supervivencia de los gusanos bajo condiciones de estrés inducidas por paraquat cuando se expusieron a ARNi acmsd-1 durante diferentes etapas de desarrollo.

figura 7F ilustra que la mejora de la supervivencia de los gusanos bajo condiciones de paraquat es independiente de la etapa de desarrollo en la que los gusanos fueron expuestos al ARNi acmsd-1. La figura 7G es un gráfico que muestra la supervivencia del gusano bajo condiciones de estrés inducidas por paraquat tras la sub-regulación de acmsd-1 combinado con la sub-regulación de daf-16 alimentando un RNAi específico en C. elegans. La figura 7G muestra que la supervivencia mejorada de gusanos con acmsd-1 sub-regulada es dependiente de daf-16 en condiciones de estrés oxidativo inducidas por paraquat.

La figura 8A es un gráfico de los cambios en la actividad de caspasa 3/7 inducida por cisplatino en células MDCK cuando se tratan con diferentes concentraciones del compuesto 18 en combinación con cisplatino. La figura 8B es un gráfico de los cambios en la actividad de caspasa 3/7 inducida por cisplatino en células MDCK cuando se trataron con diferentes concentraciones del compuesto 18 una hora antes de la adición de cisplatino.

ΙΜΡΙ g

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN

Compuestos de fórmula (I)

La presente descripción se refiere a compuestos de la fórmula (I):

R2

I

I I

I

R^f

R^d

R¹ (I) o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo, en donde:

X es O, OH, o Cl;

L es -(CH₂)_mCH₂CH₂-, -(CH₂)_mY(CH₂)_p-, -(CH₂)_mC(O)(CH₂)_p-, -(CH₂)_mC(O)O(CH₂)_p-, -(CH₂)_mC(O)NR²(CH2)p-, o -(CH2)mNR²C(O)(CH2)_p;

Y es O, N o S(O)_q;

R¹ es Ce-Cio arilo o heteroarilo, en donde el arilo y heteroarilo están sustituidos con

R y R, y sustituido opcionalmente con una o más R^e;

R² es H o CrC₆ alquilo;

una de R^a y R^b es hidrógeno y el otro es -(CH2)rCO2R^x, -OCH2CO₂R^X, -(CH2)rtetrazol, (CH2)roxadiazolona, -(CH2)rtetrazolona, -(CH2)rtiadiazolol, -(CH2)r isoxazol-3-ol, -(CH2)rP(O)(OH)OR^x, (CH2)_rS(O)₂OH, -(CH₂)_rC(O)NHCN, o -(CH₂)_rC(O)NHS(O)₂alquilo;

R^c es H, CrC6 alquilo, CrC6 haloalquilo, halógeno, -CN, -OR^X, -CO2R^X, o NO₂;

R^d es metilo, arilo de 5 a 10 miembros opcionalmente sustituido, heteroarilo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido, o carbociclo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido;

cada R^x es independientemente en cada ocurrencia hidrógeno o CrC₆ alquilo;

cada R^e es independientemente CrQ alquilo, C2-Ce alquenilo, C2-C6 alquinilo, halógeno, -OR^y, CrC6 haloalquilo, -NHR^Z, -OH, o -CN;

R^f es H o está ausente;

cada R^y y R^z es independientemente hidrógeno, Ci-C₆ alquilo, o Ci-C₆ haloalquilo;

cada m y p es independientemente 0, 1 ó 2, donde m + p &lt;3;

q es 0, 1, o 2;

r es 0 o 1; y la línea de puntos es un doble enlace opcional;

con la condición de que R^c no sea hidrógeno o -CN cuando X es O, L es -SCH₂- y R

IMPI es fenilo opcionalmente sustituido, R^c no sea Ci-C6 alquilo cuando X es O, L es -SCH2- y R^d es metilo, y que R^c no sea -CN cuando L es -SCH2- y R^d sea 2-furilo.

En algunas modalidades de fórmula (I), X es O, OH, o Cl. En otras modalidades, X es O. En otras modalidades, X es OH. En otras modalidades, X es Cl.

En algunas modalidades de fórmula (I), L es -(CH₂)_mCH₂CH₂-, -(CH₂)_mY(CH₂) (CH₂)_mC(O)(CH₂)_p-, -(CH₂)_mC(O)O(CH₂)p-, -(CH₂)_mC(O)NR²(CH2)p-, o -(CH2)mNR²C(O) (CH2)_P. En otras modalidades.

es

-CH₂CH₂-,

-ch₂ch₂ch₂-,-sch₂-, sch₂ch₂-,

-ch₂s-,

-ch₂sch₂-,

-CH₂CH₂S-, -S(O)CH₂-, -S(O)CH₂CH₂-, -CH₂S(O)-, -CH₂S(O)CH₂-, -CH₂CH₂S(O)-, -S(O)₂CH₂-,

S(O)₂CH₂CH₂-, -CH₂S(O)₂-, -CH₂S(O)₂CH₂-, -CH₂CH₂S(O)₂-, -och₂-, -och₂ch₂-,

-ch₂o-,

-ch₂och₂-, -ch₂ch₂o-,-nr²ch₂-,

CH₂NR²-, -CH2NR²CH2-,-CH₂CH₂NR²-, -NR²CH₂CH₂-, -C(O)CH₂-,

-C(O)CH₂CH₂-, -C(O)O-, -C(O)OCH₂-, -CH₂C(O)O-, -C(O)NR²-, -C(O)NR²CH2-, -NR²C(O), -NR²C(O)CH2, o -CH₂NR²C(O). En otras modalidades, L es

CH₂CH₂-, ch₂ch₂ch₂-, -sch₂-, -sch₂ch₂-,

-S(O)CH₂-, -S(O)CH₂CH₂-,-S(O)₂CH₂-, -S(O)₂CH₂CH₂-, -OCH₂-, -OCH₂CH₂-, -NR²CH2-, -NR²CH2CH₂-, -C(O)CH₂-, -C(O)CH₂CH₂-, -C(O)O-, -C(O)OCH₂-,-CH₂C(O)O-, -C(O)NR²-, -C(O)NR²CH2-,-NR²C(O), o NR²C(O)CH2. En otras modalidades, L es -CH₂CH₂-, -CH₂C(O)-, -C(O)CH₂-, -NR²CH2-, -CH2N^R2-, OCH2-, -CH₂O-, -SCH₂-, -CH₂S-, -S(O)CH₂-, -CH₂S(O)-, -CH₂S(O)₂-, o -S(O)₂CH₂-.

En algunas modalidades de fórmula (I), R¹ es C6-Ci0 arilo o heteroarilo, en donde el arilo y heteroarilo se sustituyen con R^a y R^b, y sustituido opcionalmente con uno o más R^e. En otras modalidades, R¹ es C6-Ci₀ arilo sustituido con R^a y R^b, y sustituido opcionalmente con uno o más R^e. En otras modalidades, R¹ es heteroarilo sustituido con R^a y R^b, y sustituido opcionalmente con uno o más R^e. En modalidades adicionales, R¹ es fenilo sustituido con R^a y R^b, y sustituido opcionalmente con uno o más R^e.

En algunas modalidades de fórmula (I), R^a es -(CH2)rCO2R^x, -OCH2CO₂R^X, (CH2)rtetrazol, ~(CH2)roxadiazolona, -(CH2)rtetrazolona, -(CH2)rtiadiazolol, -(CH2)r isoxazol-3-ol, (CH2)rP(O)(OH)OR^x, -(CH2)_rS(O)₂OH, &lt;CH₂)_rC(O)NHCN, o -(CH₂)_rC(O)NHS(O)₂alquilo. En otras modalidades,

R^a es

-(CH₂)_rCO₂R^x,

-OCH₂CO₂R^x, tetrazol, -(CH₂)tetrazol, oxadiazolona, (CH₂)oxadiazolona, tetrazolona, -(CH₂)tetrazolona, tiadiazolol, -(CH₂)tiadiazolol, isoxazol-3-ol, -(CH₂) isoxazol-3-ol, -P(O)(OH)OR^X, -(CH2)P(O)(OH)OR^X, -S(O)2OH , -(CH₂)S(O)₂OH, -C(O)NHCN; (CH₂)C(O)NHCN, -C(O)NHS(O)₂alquilo, o -(CH₂)C(O)NHS(O)₂alquilo. En otras modalidades, R^a es hidrógeno, CO2R^X, CH2CO₂R^X, tetrazol, u oxadiazolona. En modalidades adicionales, R^a es hidrógeno, CO₂H, CH₂CO₂H, tetrazol, o l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona.

En algunas modalidades de fórmula (I), R^b es -(CH2)rCO2R^x, -OCH2CO₂R^X, (CH2)rtetrazol, -(CH2)|Oxadiazolona, -(CH2)rtetrazolona, -(CH2)rtiadiazolol, -(CH2)r isoxazol-3-ol, (CH2)rP(O)(OH)OR^x, -(CH2)_rS(O)₂OH, -(CH₂)_rC(O)NHCN, o -(CH₂)_rC(O)NHS(O)₂alquilo. En otras modalidades,

R^b es -(CH₂)_rCO₂R^x,

-OCH₂CO₂R^x, tetrazol, -(CH₂)tetrazol, oxadiazolona,

IMPI (CH₂)oxadiazolona, tetrazolona, -(CH₂)tetrazolona, tiadiazolol, -(CH₂)tiadiazolol, isoxazol-3-ol, -(CH₂) isoxazol-3-ol, -P(O)(OH)OR^X, -(CH2)P(O)(OH)OR^X, -S(O)2OH , -(CH₂)S(O)₂OH, -C(O)NHCN, (CH₂)C(O)NHCN, -C(O)NHS(O)₂alquilo, o -(CH₂)C(O)NHS(O)₂alquilo. En otras modalidades, R^b es hidrógeno, CO2R^X, CH2CO₂R^X, tetrazol, u oxadiazolona. En modalidades adicionales, R^b es hidrógeno, CO₂H, CH₂CO₂H, tetrazol, o l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona. En modalidades adicionales, R^bes hidrógeno.

En algunas modalidades de fórmula (I), R^c es H, Ci-Cg alquilo, CrC6 haloalquilo, halógeno, -CN, -OR^X, -CO2R^X, o NO₂. En otras modalidades, R^c es CrQ alquilo, CrQ haloalquilo, halógeno, -CN, -0R^x, -CO2R^X, o N02. En otras modalidades, R^c es halógeno, -CN,

OR^X, o C_rC₆ alquilo. En otras modalidades, R^c es halógeno, -CN, -OR^X, o C1-C3 alquilo. En otras modalidades, R es H, -CN, o halógeno. En otras modalidades, R^ces -CN o halógeno.

En algunas modalidades de fórmula (I), R^d es metilo, arilo de 5 a 10 miembros opcionalmente sustituido, heteroarilo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido, o carbociclo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido. En otras modalidades, R^d es metilo, ciclohexilo opcionalmente sustituido, piridinilo opcionalmente sustituido, tiazolilo opcionalmente sustituido, fenilo opcionalmente sustituido, o tienilo opcionalmente sustituido. En otras modalidades, R^d es metilo, ciclohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, o tienilo. En otras modalidades, R^d es ciclohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, o tienilo, en donde cada uno es sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de halógeno, Ci-C6 alquilo, CrC6 hidroxialquilo, Cr Q alcoxi, Ci-C6 haloalquilo, Ci-C6 haloalcoxi, ΌΗ, CN, y amino. En otras modalidades, R^d es ciclohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, o tienilo, en donde cada uno es sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de halógeno, CrC6 alquilo, CrC₆hidroxialquilo, Q-Cg alcoxi, Ci-Ce haloalquilo, y CrQ haloalcoxi. En otras modalidades, R^d es ciclohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, o tienilo, en donde cada uno es sustituido opcionalmente con uno o más halógeno. Todavía en otras modalidades, R^d es ciclohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, o tienilo. En otras modalidades, R^d es ciclohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, 4-clorofenilo, 4-metilfenilo, o tienilo.

En algunas modalidades de fórmula (I), cada R^e es independientemente Ci-Q alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halógeno, -OR^y, Ci-C6 haloalquilo, -NHR^Z, -OH, o -CN. En otras modalidades, CiNHR^Z, -OH, o -CN.

alquilo, C₂-C4 alquenilo, C₂-C₄ alquinilo, halógeno, -OR^V, Ci-C₄ haloalquilo, En algunas modalidades de fórmula (I), R^f es H o está ausente. En otras modalidades, R^f es H. En otras modalidades, R^f está ausente, cuando N al cual se une participa en un doble enlace.

En algunas modalidades de fórmula (I), R^x es hidrógeno o CrC6 alquilo. En otras modalidades, R^x es hidrógeno o CrC3 alquilo. En modalidades adicionales, R^x es hidrógeno, metilo, κ

IMPI

INSTITUTO MEXICANO DE LA PROPIEDAD INDUSTRIAL etilo, n-propilo, o iso-propilo.

En algunas modalidades de fórmula (I), R^y es independientemente hidrógeno, Ci-C6 alquilo, o Ci-C6 haloalquilo. En otras modalidades, R^y es hidrógeno, CrC3 alquilo, o CrC₃ haloalquilo,

En algunas modalidades de fórmula (I), cada R^z es independientemente hidrógeno, Ci-C6 alquilo, o CrC6 haloalquilo. En otras modalidades, R^z es hidrógeno, CrC3 alquilo, o CrC₃haloalquilo,

En algunas modalidades de fórmula (I), m es 0, 1, o 2. En otras modalidades, m es 0. En otras modalidades, m es 1. En otras modalidades todavía, m es 2?

En algunas modalidades de fórmula (I), p es 0, 1, o 2. En otras modalidades, p es 0.

En otras modalidades, p es 1. En otras modalidades todavía, p es 2.

En algunas modalidades de fórmula (I), m + p &lt; 3;

En algunas modalidades de fórmula (I), q es 0, 1, o 2. En otras modalidades, q es 0.

En otras modalidades, q es 1. En otras modalidades, q es 2.

En algunas modalidades de fórmula (I), r es 0, 1, o 1. En otras modalidades, r es 0. En otras modalidades, r es 1.

En algunas modalidades de Fórmula (I), la línea de puntos es un enlace sencillo. En otras modalidades, la línea de puntos es un doble enlace.

En algunas modalidades de fórmula (I), una de R^a y R^b es hidrógeno y el otro es CO2R^x, CH2CO₂R^x, tetrazol, u oxadiazolona. En otras modalidades, R^bes hidrógeno y R^a es CH₂CO₂H, tetrazol, o (l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona).

En algunas modalidades de fórmula (I), R^bes hidrógeno, R^ces -CN, R^des tienilo, y R^aes CH₂CO₂H, tetrazol, o (l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona).

En algunas modalidades de fórmula (I), R^c es halógeno, R^a es -CO2H, y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -Br, R^a es -CO2H, y R^b es H. En modalidades adicionales, R^c es -Cl, R^a es CO₂H, y R^b es H.

En algunas modalidades de fórmula (I), R^c es halógeno, R^a es tetrazol, y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -Br, R^a es tetrazol, y R^b es H. En modalidades adicionales, R^c es -Cl, R^a es tetrazol, y R^b es H.

En algunas modalidades de fórmula (I), R^c es halógeno, R^a es -CH2CO2H, y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -Br, R^a es -CH2CO₂H, y R^b es H. En modalidades adicionales, R^c es -Cl, R^a es -CH₂CO₂H, y R^b es H.

En algunas modalidades de fórmula (I), R^c es halógeno, R^a es (1,2,4-oxadiazol5(4H)-ona), y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -Br, R^a es (l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona), y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -Cl, R^a es (l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona), y R^b es H.

En algunas modalidades de fórmula (I), R^c es -CN, R^a es -CO₂H, y R^b es H. En otras

IMPI modalidades, R^c es -CN, R^a es -CH₂CO₂H, y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -CN, R^a es tetrazol, y R^b es H. Todavía en otras modalidades, R^c es -CN, R^a es (l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona), y R^b es H.

En algunas modalidades de fórmula (I), R^c no es hidrógeno o -CN y X es O, L es SCH2- y R^d es fenilo opcionalmente sustituido. En otras modalidades, R^c no es CrQ alquilo y X es O, L es -SCH2- y R^d es metilo. En otras modalidades, R^c no es -CN y X es O, L es -SCH₂- y R^d es 2furilo.

En algunas modalidades de fórmula (I), R^c no es hidrógeno o -CN cuando X es O, L es -SCH₂- y R^d es fenilo opcionalmente sustituido.

En algunas modalidades de fórmula (I), R^c no es Ci-C₆ alquilo cuando X es O, L es SCH₂- y R^d es metilo.

En algunas modalidades de fórmula (I), R^c no es -CN cuando X es O, L es -SCH₂- y

R^d es 2-furilo.

En una modalidad, el compuesto de fórmula (I) está representado por la fórmula (la):

NH

R¹

R^d (la) o una sal farmacéuticamente aceptable, o tautómero del mismo, en donde:

L es -(CH₂)_mCH₂CH₂-, -(CH₂)_mY(CH₂)_p-, -(CH₂)_mC(O)(CH₂)_p-, -(CH₂)_mC(O)O(CH₂)_p-, (CH₂)_mC(O)NR²(CH2)p-, o -(CH2)mNR²C(O)(CH2)_p;

Y es O, N o S(O)_q;

R¹ es Ce-Cio arilo o heteroarilo, en donde el arilo y heteroarilo están sustituidos con R^a y R^b, y sustituido opcionalmente con una o más R^e;

R es H o Ci-C₆ alquilo;

una de R^a y R^b es hidrógeno y el otro es -(CH2)rCO2R^x, -OCH2CO₂R^X, -(CH2)rtetrazol, (CH2)rOxadiazolona, -(CH2)rtetrazolona, -(CH2)rtiadiazolol, -(CH2)r isoxazol-3-ol, -(CH2)rP(O)(OH)OR^x, (CH2)_rS(O)₂OH, -(CH₂)_rC(O)NHCN, o -(CH₂)_rC(O)NHS(O)₂alquilo;

R^c es H, CrC6 alquilo, CrCe haloalquilo, halógeno, -CN, -OR^X, -CO2R^X, o NO₂;

R^d es metilo, arilo de 5 a 10 miembros opcionalmente sustituido, heteroarilo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido, o carbociclo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido;

cada R^x es independientemente en cada ocurrencia hidrógeno o CrC₆ alquilo;

ΙΜΡΙ cada R^e es independientemente CrC₆ alquilo, C₂-C₆ alquenilo, C₂-C₆ alquinilo, halógeno, -OR^y, Ci-Q haloalquilo, -NHR^Z, -OH, o -CN;

cada R^y y R^z es independientemente hidrógeno, CrC₆ alquilo, o CrC₆ haloalquilo;

cada m y p es independientemente 0, 1 ó 2, donde m + p &lt;3;

q es 0, 1, o 2; y r es 0 o 1;

con la condición de que R^c no se hidrógeno o -CN cuando L es -SCH2- y R^d es fenilo opcionalmente sustituido, R^c no sea CrC6 alquilo cuando L es -SCH₂- y R^d es metilo, y que R^c no sea -CN cuando L es -SCH₂- y R^d es 2-furilo.

En algunas modalidades de fórmula (la),

L es -CH₂CH₂-, -CH₂C(O)-, -C(O)CH₂-, -NR²CH2-, -CH2NR²-, -OCH2-, -CH₂O-, -SCH₂-, -CH₂S-, -S(O)CH₂-, -CH₂S(O)-, -CH₂S(O)₂-, o -S(O)₂CH₂-;

Y es O, N o S(O)_q;

R¹ es Cs-Cio arilo o heteroarilo, en donde el arilo y heteroarilo están sustituidos con R^a y R^b, y sustituido opcionalmente con una o más R^e;

R² es H o CrC₆ alquilo;

una de R^a y R^b es hidrógeno y el otro es -(CH2)rCO2R^x,-OCH2CO₂R^x, -(CH2)rtetrazol, -(CH2)rOxadiazolona, -(CH2)rtetrazolona, -(CH2)rtiadiazolol, -(CH2)r isoxazol-3-ol, -(CH2)rP(O)(OH)OR^x, -(CH2)_rS(O)₂OH, -(CH₂)_rC(O)NHCN, o -(CH₂)_r C(O)NHS(O)₂alquilo;

R^c es CrC6 alquilo, CrC6 haloalquilo, halógeno, -CN, -OR^X, -CO2R^X, o NO₂;

R^d es metilo, arilo de 5 a 10 miembros opcionalmente sustituido, heteroarilo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido, o carbociclo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido;

cada R^x es independientemente en cada ocurrencia hidrógeno o Ci-C₆ alquilo;

cada R^e es independientemente Ci-C₆ alquilo, C₂-Ce alquenilo, C₂-C₆ alquinilo, halógeno, -OR^y, CrQ haloalquilo, -NHR^Z, -OH, o -CN;

cada R^y y R^z es independientemente hidrógeno, CrC₆ alquilo, o CrC₆ haloalquilo;

cada m y p es independientemente 0,1 ó 2, donde m + p &lt;3;

q es 0, 1, o 2; y r es 0 o 1;

con la condición de que R^c no sea -CN cuando L es -SCH2- y R^d es fenilo opcionalmente sustituido, R^c no sea CrC6 alquilo cuando L es -SCH₂- y R^d es metilo, y que R^c no sea -CN cuando L es -SCH₂- y R^d es 2-furilo.

En algunas modalidades de fórmula (la), L es -(CH₂)_mCH₂CH₂-, -(CH₂)_mY(CH₂)_p-, -(CH₂)_mC(O)(CH₂)_p-, -(CH₂)_mC(O)O(CH₂)_p-, -(CH₂)_mC(O)NR²(CH2)p-, O -(CH2)mNR²C(O) (CH2)_P. En otras modalidades, L es -CH₂CH₂-, -CH₂CH₂CH₂-,-SCH₂-, -SCH₂CH₂-, -CH₂S-,

CH₂SCH₂-,

IMPI

-CH₂CH₂S-, -S(O)CH₂-,

S(O)CH₂CH₂-, -CH₂S(O)-, -CH₂S(O)CH₂-, -CH₂CH₂S(O)-, -S(O)₂CH₂-,

-S(O)₂CH₂CH₂-,

CH₂S(O)₂-, -CH₂S(O)₂CH₂-,

CH₂CH₂S(O)₂-, -och₂-,

-och₂ch₂-,

-ch₂o-,

-CH₂OCH₂-, -CH₂CH₂O-,-NR²CH₂-, - CH₂NR²-, -CH2NR²CH2-,-CH₂CH₂NR²-, -NR²CH₂CH₂-, -C(O)CH₂-,

-C(O)CH₂CH₂-, -C(O)O-, -C(O)OCH₂-, -CH₂C(O)O-, -C(O)NR²-, -C(O)NR²CH2-, -NR²C(O), -NR²C(O)CH2, o -CH₂NR₂C(O). En otras modalidades, L es -CH₂CH₂-, -CH₂CH₂CH₂-,

SCH₂-, -sch₂ch₂-,

-S(O)CH₂-, -S(O)CH₂CH₂-,-S(O)₂CH₂-, -S(O)₂CH₂CH₂-, -OCH₂-, -OCH₂CH₂-, -nr²ch2-, -nr²ch2ch₂-, -C(O)CH₂-, -C(O)CH₂CH₂-, -C(O)O-, -C(O)OCH₂-, -CH₂C(O)O-, -C(O)NR²-, -C(O)NR²CH2-,-NR²C(O), o - NR²C(O)CH2. En otras modalidades, L es -CH₂CH₂-, -CH₂C(O)-, -C(O)CH₂-, -NR²CH2-, -CH2NR²-, -OCH2-, -CH₂O-, -SCH₂-, -CH₂S-, -S(O)CH₂-, -CH₂S(O)-, -CH₂S(O)₂-, o -S(O)₂CH₂-.

En algunas modalidades de fórmula (la), R¹ es Ce“Cio arilo o heteroarílo, en donde el arilo y heteroarílo se sustituyen con R^a y R^b, y sustituido opcionalmente con uno o más R^e. En otras modalidades, R¹ es C₆-Cio arilo sustituido con R^a y R^b, y sustituido opcionalmente con uno o más R^e. En otras modalidades, R¹ es heteroarílo sustituido con R^a y R^b, y sustituido opcionalmente con uno o más R^e. En modalidades adicionales, R¹ es fenilo sustituido con R^a y R^b, y sustituido opcíonalmente con uno o más R^e.

En algunas modalidades de fórmula (la), R^a es -(CH2)rCO2R^x, -OCH2CO₂R^X, -(CH2)rtetrazol, -(CH2)rOxadiazolona, -(CH2)rtetrazolona, -(CH2)rtiadiazolol, -(CH2)r isoxazol-3-ol, -(CH2)rP(O)(OH)OR^x, -(CH2)_rS(O)₂OH, -(CH₂)_rC(O)NHCN, o -(CH₂)_rC(O)NHS(O)₂alquilo. En otras modalidades,

R^a es

-(CH₂)_rCO₂R^x,

-OCH₂CO₂R^X, tetrazol, -(CH₂)tetrazol, oxadiazolona,

-(CH₂)oxadiazolona, tetrazolona, -(CH₂)tetrazolona, tiadiazolol, -(CH₂)tiadiazolol, isoxazol-3-ol, -(CH₂) isoxazol-3-ol,

-P(O)(OH)OR^X,

-(CH₂)P(O)(OH)OR^x,

-S(O)₂OH,

-(CH₂)S(O)₂OH,

-C(O)NHCN -(CH₂)C(O)NHCN, -C(O)NHS(O)₂alquilo, o -(CH₂)C(O)NHS(O)₂alquilo. En otras modalidades, R^a es hidrógeno, CO2R^X, CH2CO₂R^X, tetrazol, u oxadiazolona. En modalidades adicionales, R^a es hidrógeno, CO₂H, CH₂CO₂H, tetrazol, o l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona.

En algunas modalidades de fórmula (la), R^b es -(CH2)rCO2R^x, -OCH2CO₂R^X, ~(CH2)rtetrazol, -(CH2)roxadiazolona, -(CH2)rtetrazolona, -(CH2)rtiadiazolol, -(CH2)r isoxazol-3-ol, -(CH2)rP(O)(OH)OR^x, -(CH2)_rS(O)₂OH, -(CH₂)_rC(O)NHCN, o -(CH₂)_rC(O)NHS(O)₂alquilo. En otras modalidades,

R^b es

-(CH₂)_rCO₂R^x,

-OCH₂CO₂R^x, tetrazol, (CH₂)tetrazol, oxadiazolona,

-(CH₂)oxadiazolona, tetrazolona, -(CH₂)tetrazolona, tiadiazolol, -(CH₂)tiadiazolol, isoxazol-3-ol, -(CH₂)

Ϊ5ΟΧ3ΖΟ|-3“ΟΙ,

-P(O)(OH)OR^X, -(CH2)P(O)(OH)OR^x, -S(O)2OH, -(CH₂)S(O)₂OH, -C(O)NHCN

-(CH₂)C(O)NHCN, -C(O)NHS(O)₂alquilo, o -(CH₂)C(O)NHS(O)₂alquilo. En otras modalidades, R^b es hidrógeno, CO2R^X, CH2CO₂R^X, tetrazol, u oxadiazolona. En modalidades adicionales, R^b es hidrógeno, CO₂H, CH₂CO₂H, tetrazol, o l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona. En modalidades adicionales, R^bes hidrógeno.

En algunas modalidades de fórmula (la), R^c es H, CrQ alquilo, CrC6 haloalquilo, halógeno, -CN, -OR^X, -CO2R^X, o NO₂. En otras modalidades, R^c es CrCe alquilo, Ci-Q haloalquilo,

IMPI halógeno, -CN, -OR^X, -CO2R^X, o NO2. En otras modalidades, R^c es halógeno, -CN, -OR^X, o CrC₆ alquilo. En otras modalidades, R^ces halógeno, -CN, -OR^X, o C1-C3 alquilo. En otras modalidades, R es H, -CN, o halógeno. En otras modalidades, R^ces -CN o halógeno.

En algunas modalidades de fórmula (la), R^d es metilo, arilo de 5 a 10 miembros opcionalmente sustituido, heteroarilo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido, o carbociclo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido. En otras modalidades, R^d es metilo, ciclohexilo opcionalmente sustituido, piridinilo opcionalmente sustituido, tiazolilo opcionalmente sustituido, fenilo opcionalmente sustituido, o tienilo opcionalmente sustituido. En otras modalidades, R^d es ciclohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, o tienilo, en donde cada uno es sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de halógeno, CrCe alquilo, Ct-C6 hidroxialquilo, Ci-C6 alcoxi, CrC6 haloalquilo, Ci-C6 haloalcoxi, -OH, CN, y amino. En otras modalidades, R^d es ciclohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, o tienilo, en donde cada uno es sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de halógeno, CrC6 alquilo, Ci-C₆ hidroxialquilo, Ci-Q alcoxi, CrC₆ haloalquilo, y Ci-C₆ haloalcoxi. En otras modalidades, R^d es ciclohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, o tienilo, en donde cada uno es sustituido opcionalmente con uno o más halógeno. En otras modalidades, R^d es metilo, ciclohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, o tienilo. Todavía en otras modalidades, R^d es ciclohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, o tienilo. En otras modalidades, R^d es ciclohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, 4-clorofenilo, 4-metilfenilo, o tienilo.

En algunas modalidades de fórmula (la), cada R^e es independientemente CrC6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-Cg alquinilo, halógeno, -OR^y, CrC6 haloalquilo, -NHR^Z, -OH, o -CN. En otras modalidades, Cr

-NHR^Z, -OH, o -CN.

alquilo, C2-C4 alquenilo, C2-C4 alquinilo, halógeno, -OR^y, C1-C4 haloalquilo,

En algunas modalidades de fórmula (la), R^x es hidrógeno o Ci-Ce alquilo. En otras modalidades, R^x es hidrógeno o CrC₃ alquilo. En modalidades adicionales, R^x es hidrógeno, metilo, etilo, n-propilo, o iso-propilo.

En algunas modalidades de fórmula (la), R^y es independientemente hidrógeno, CrQ alquilo, o Ci-C6 haloalquilo. En otras modalidades, R^y es hidrógeno, CrC3 alquilo, o C_rC₃ haloalquilo.

En algunas modalidades de fórmula (la), cada R^z es independientemente hidrógeno, CrC6 alquilo, o CrQ haloalquilo. En otras modalidades, R^z es hidrógeno, Ci-C3 alquilo, o CrC₃haloalquilo.

En algunas modalidades de fórmula (la), m es 0, 1, o 2. En otras modalidades, m es 0. En otras modalidades, m es 1. En otras modalidades todavía, m es 2.

En algunas modalidades de fórmula (la), p es 0, 1, o 2. En otras modalidades, p es 0. En otras modalidades, p es 1. En otras modalidades todavía, p es 2.

En algunas modalidades de fórmula (la), q es 0, 1, o 2. En otras modalidades, q es w

&lt;o σι &lt;o

IMPI

0. En otras modalidades, q es 1. En otras modalidades, q es 2.

En algunas modalidades de fórmula (la), r es 0 o 1. En otras modalidades, r es 0. En otras modalidades, r es 1.

En algunas modalidades de fórmula (la), una de R^a y R^b es hidrógeno y el otro es CO2R^x, CH2CO₂R^x, tetrazol, u oxadiazolona. En otras modalidades, R^b es hidrógeno y R^a es CH₂CO₂H, tetrazol, o (l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona).

En algunas modalidades de fórmula (la), R^b es hidrógeno, R^c es -CN, R^d es tienilo, y R^a es CH₂CO₂H, tetrazol, o (l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona).

En algunas modalidades de fórmula (la), R^c es halógeno, R^a es ₂H, y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -Br, R^a es -CO2H, y R^b es H. En modalidades adicionales, R^c es -Cl, R^a es CO2H, y R^b es H.

En algunas modalidades de fórmula (la), R^c es halógeno, R^a es tetrazol, y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -Br, R^a es tetrazol, y R^b es H. En modalidades adicionales, R^c es -Cl, R^a es tetrazol, y R^b es H.

En algunas modalidades de fórmula (la), R^c es halógeno, R^a es -CH2CO2H, y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -Br, R^a es -CH2CO₂H, y R^b es H. En modalidades adicionales, R^c es -Cl, R^a es -CH₂CO₂H, y R^b es H.

En algunas modalidades de fórmula (la), R^c es halógeno, R^a es (1,2,4-oxadiazol5(4H)-ona), y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -Br, R^a es (l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona), y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -Cl, R^a es (l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona), y R^b es H.

En algunas modalidades de fórmula (la), R^c es -CN, R^a es -CO2H, y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -CN, R^a es -CH2CO₂H, y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -CN, R^a es tetrazol, y R^b es H. Todavía en otras modalidades, R^c es -CN, R^a es (l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona), y R^b es H.

En algunas modalidades de fórmula (la), R^c no es hidrógeno o -CN y L es -SCH2- y R^d es fenilo opcionalmente sustituido. En otras modalidades, R^c no es Ci~C6 alquilo y L es -SCH₂- y R^des metilo. En otras modalidades, R^c no es -CN y L es -SCH₂- y R^d es 2-furilo.

En algunas modalidades de fórmula (la), R^c no es hidrógeno o -CN cuando L es SCH₂- y R^d es fenilo opcionalmente sustituido.

En algunas modalidades de fórmula (la), R^c no es CrC₆ alquilo cuando L es -SCH₂- y

R^d es metilo.

En algunas modalidades de fórmula (la), R^c no es -CN cuando L es -SCH₂- y R^d es 2furilo.

En otra modalidad, el compuesto de fórmula (I) está representado por la fórmula (Ib):

ΙΜΡΙ

Rí

NH (R^e)n

R^a σί

R^d

R^b (Ib), *>

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en donde:

R^a y R^b es hidrógeno y el otro es -(CH2)rCO2R^x, -OCH2CO₂R^X, -(CH2)rtetrazol, -(CH2)roxadiazolona, -(CH2)rtetrazolona, -(CH2)rtiadiazolol, -(CH2)r isoxazol-3-ol, -(CH2)rP(O)(OH)OR^x, -(CH2)_rS(O)₂OH, -(CH₂)_rC(O)NHCN, o -(CH₂)_rC(O)NHS(O)₂alquilo;

R^c es H, Ci-C₆ alquilo, Ci-Q haloalquilo, halógeno, -CN, -OR^X, -CO2R^X, o NO2;

R^d es metilo, arilo de 5 a 10 miembros opcionalmente sustituido, heteroarilo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido, o carbociclo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido;

cada R^x es independientemente en cada ocurrencia hidrógeno o Ci-Ce alquilo;

cada R^e es independientemente Ci-C₆ alquilo, C₂-C₆ alquenilo, C₂-C₆ alquinilo, halógeno, -OR^y, Ci-Ce haloalquilo, -NHR², -OH, o -CN;

cada R^y y R^z es independientemente hidrógeno, CrC₆ alquilo, o Ci-C₆ haloalquilo; y n es 0, 1, 2, o 3;

con la condición de que R^c no sea hidrógeno o -CN cuando y R^d es fenilo opcionalmente sustituido, R^c no sea CrC₆ alquilo cuando R^d es metilo, y que R^c no sea -CN cuando R^d es 2-furilo.

En algunas modalidades de fórmula (Ib), una de R^a y R^b es hidrógeno y el otro es -(CH2)rCO2R^x, -OCH2CO₂R^X, -(CH2)rtetrazol, -(CH2)rOxadiazolona, -(CH2)rtetrazolona, -(CH2)rtiadiazolol, -(CH2)r isoxazol-3-ol, -(CH2)rP(O)(OH)OR^x, -(CH2)_rS(O)₂OH, -(CH₂)_rC(O)NHCN, o -(CH₂)_r C(O)NHS(O)₂alquilo;

R^c es Ci-Q alquilo, CrC₆ haloalquilo, halógeno, -CN, -OR^X, -CO2R^X, o NO2;

R^d es metilo, arilo de 5 a 10 miembros opcionalmente sustituido, heteroarilo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido, o carbociclo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido;

cada R^x es independientemente en cada ocurrencia hidrógeno o Ci-C₆ alquilo;

cada R^e es independientemente Ci-Q alquilo, C₂-Ce alquenilo, C₂-C₆ alquinilo, halógeno, -OR^y, Ci-Ce haloalquilo, -NHR^Z, -OH, o -CN;

con la condición de que R^c no sea hidrógeno o -CN cuando R^d es fenilo opcionalmente sustituido, R^c no sea Ci-C₆ alquilo cuando R^d es metilo, y que R^c no sea -CN cuando

IMPI

R^d es 2-furilo.

En algunas modalidades de fórmula (Ib), una de R^a y R^b es hidrógeno y el otro es CO2R^X, CH2CO₂R^X, tetrazol, u oxadiazolona;

R^c es halógeno, -CN, -OR^X, o Ci-C₆ alquilo; 1

R^d es metilo, arilo de 5 a 10 miembros opcionalmente sustituido, heteroarilo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido, o carbociclo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido; y

R^x es hidrógeno o CrC₆ alquilo;

cada R^e es independientemente Ci-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halógeno, -OR^y, CrC6 haloalquilo, -NHR^Z, -OH, o -CN;

cada R^y y R^z es independientemente hidrógeno, Ci-C₆ alquilo, o CrC₆ haloalquilo; y n es 0, 1, 2, o 3;

con la condición de que R^c no sea -CN cuando R^d es fenilo opcionalmente sustituido, R^c no sea Ci-C₆ alquilo cuando R^d es metilo, y que R^c no sea -CN cuando R^d es 2-furilo.

En algunas modalidades de fórmula (Ib), R^a es -(CH2)rCO2R^x, -OCH2CO₂R^X, ^_(CH2)rtetrazol, -(CH2)fOxad¡azolona, -(CH2)rtetrazolona, -(CH2)rtiadiazolol, -(CH2)r isoxazol-3-ol, -(CH2)rP(O)(OH)OR^x, -(CH2)_rS(O)₂OH, -(CH₂)_rC(O)NHCN, o -(CH₂)_rC(O)NHS(O)₂alquilo. En otras modalidades,

R^a es

-(CH₂)_rCO₂R^x,

-OCH₂CO₂R^x, tetrazol, -(CH₂)tetrazol, oxadiazolona,

-(CH₂)oxadiazolona, tetrazolona, -(CH₂)tetrazolona, tiadiazolol, -(CH₂)tiadiazolol, isoxazol-3-ol, -(CH₂) isoxazol-3-ol, -P(O)(OH)OR^X, -(CH2)P(O)(OH)OR^X, -S(O)2OH , -(CH₂)S(O)₂OH, -C(O)NHCN -(CH₂)C(O)NHCN, -C(O)NHS(O)₂alquilo, o -(CH₂)C(O)NHS(O)₂alquilo. En otras modalidades, R^a es hidrógeno, CO2R^X, CH2CO₂R^X, tetrazol, u oxadiazolona. En modalidades adicionales, R^a es hidrógeno, CO₂H, CH₂CO₂H, tetrazol, o l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona.

En algunas modalidades de fórmula (Ib), R^b es -(CH2)rCO2R^x, -OCH2CO₂R^X, -(CH2)rtetrazol, -(CH2)rOxadiazolona, -(CH2)rtetrazolona, -(CH2)rtiadiazolol, -(CH2)r ¡soxazol-3-ol, -(CH2)rP(O)(OH)OR^x, -(CH2)_rS(O)₂OH, -(CH₂)_rC(O)NHCN, o -(CH₂)_rC(O)NHS(O)₂alquilo. En otras modalidades,

R^b es

-(CH₂)_rCO₂R^x,

-OCH₂CO₂R^x, tetrazol, -(CH₂)tetrazol, oxadiazolona,

-(CH₂)oxadiazolona, tetrazolona, -(CH₂)tetrazolona, tiadiazolol, -(CH₂)tiadiazolol, isoxazol-3-ol, -(CH₂) isoxazol-3-ol,

-P(O)(OH)OR^X, -(CH₂)P(O)(OH)OR^X,

-S(O)₂OH, -(CH₂)S(O)₂OH, -C(O)NHCN

-(CH₂)C(O)NHCN, -C(O)NHS(O)₂alquilo, o -(CH₂)C(O)NHS(O)₂alquilo. En otras modalidades, R^b es hidrógeno, CO2R^X, CH2CO₂R^X, tetrazol, u oxadiazolona. En modalidades adicionales, R^b es hidrógeno, CO₂H, CH₂CO₂H, tetrazol, o l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona. En modalidades adicionales, R^bes hidrógeno.

En algunas modalidades de fórmula (Ib), R^c es H, Ci-C₆ alquilo, Ci-Ce haloalquilo, halógeno, -CN, -OR^X, -CO2R^X, o NO2. En otras modalidades, R^c es CrCe alquilo, CrC₆ haloalquilo, halógeno, -CN, -OR^X, -CO2R^X, o NO2. En otras modalidades, R^c es halógeno, -CN,

OR^X, o C_rC₆ alquilo. En otras modalidades, R^c es halógeno, -CN, -OR^X, o Ci-C₃ alquilo. En otras modalidades, R

IMPI es H, -CN, o halógeno. En otras modalidades, R^c es -CN o halógeno.

En algunas modalidades de fórmula (Ib), R^d es metilo, arilo de 5 a 10 miembros opcionalmente sustituido, heteroarilo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido, o carbociclo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido. En otras modalidades, R^d es metilo, cidohexilo opcionalmente sustituido, piridinilo opcionalmente sustituido, tiazolilo opcionalmente sustituido, fenilo opcionalmente sustituido, o tienilo opcionalmente sustituido. En otras modalidades, R^d es cidohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, o tienilo, en donde cada uno es sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de halógeno, CrC₆ alquilo, CrC₆hidroxialquilo, Ci-C₆ alcoxi, CrC₆ haloalquilo, CrC₆ haloalcoxi, -OH, CN, y amino. En otras modalidades, R es cidohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, o tienilo, en donde cada uno es sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de halógeno, CrC₆alquilo, Ci-C₆ hidroxialquilo, CrCe alcoxi, CrC₆ haloalquilo, y CrC₆ haloalcoxi. En otras modalidades, R^d es cidohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, o tienilo, en donde cada uno es sustituido opcionalmente con uno o más halógenos. En otras modalidades, R^d es metilo, cidohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, o tienilo. Todavía en otras modalidades, R^d es cidohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, o tienilo. En otras modalidades, R^d es cidohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, 4-clorofenilo, 4-metilfenilo, o tienilo.

En algunas modalidades de fórmula (Ib), cada R^e es independientemente CrQ alquilo, C₂-C₆ alquenilo, C₂-C₆ alquinilo, halógeno, -OR^y, CrCe haloalquilo, -NHR^Z, -OH, o -CN. En otras modalidades, Ci-C₄ alquilo, C₂-C₄ alquenílo, C₂-NHR^Z, -OH, o -CN.

alquinilo, halógeno, -OR^Y, CrC₄ haloalquilo,

En algunas modalidades de fórmula (Ib), R^x es hidrógeno o CrC6 alquilo. En otras modalidades, R^x es hidrógeno o CrC3 alquilo. En modalidades adicionales, R^x es hidrógeno, metilo, etilo, n-propilo, o iso-propilo.

En algunas modalidades de fórmula (Ib), R^y es independientemente hidrógeno, CrC6 alquilo, o Ci-C6 haloalquilo. En otras modalidades, R^y es hidrógeno, CrC3 alquilo, o CrC₃ haloalquilo.

En algunas modalidades de fórmula (Ib), cada R^z es independientemente hidrógeno, CrC6 alquilo, o CrC6 haloalquilo. En otras modalidades, R^z es hidrógeno, CrC3 alquilo, o Ci-C₃haloalquilo.

En algunas modalidades de fórmula (Ib), n es 0, 1, 2 o 3. En algunas modalidades, n es 0 o 1. En otras modalidades, n es 0.

En algunas modalidades de fórmula (Ib), una de R^a y R^b es hidrógeno y el otro es CO2R^x, CH2CO₂R^x, tetrazol, u oxadiazolona. En otras modalidades, R^b es hidrógeno y R^a es CH₂CO₂H, tetrazol, o (l,2,4-oxadiazol-5(4H)-pna).

En algunas modalidades de fórmula (Ib), R^b es hidrógeno, R^c es -CN, R^d es tienilo, y R^a es CH₂CO₂H, tetrazol, o (l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona).

IMPI

En algunas modalidades de fórmula (Ib), R^c es halógeno, R^a es -CO2H, y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -Br, R^a es -CO2H, y R^b es H. En modalidades adicionales, R^c es -Cl, R^a es CO₂H, y R^b es H.

En algunas modalidades de fórmula (Ib), R^c es halógeno, R^a es tetrazol, y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -Br, R^a es tetrazol, y R^b es H. En modalidades adicionales, R^c es -Cl, R^aes tetrazol, y R^b es H.

En algunas modalidades de fórmula (Ib), R^c es halógeno, R^a es -CH2CO2H, y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -Br, R^a es -CH2CO₂H, y R^b es H. En modalidades adicionales, R^c es -Cl, R^a es -CH₂CO₂H, y R^b es H.

En algunas modalidades de fórmula (Ib), R^c es halógeno, R^a es (1,2,4-oxadiazol5(4H)-ona), y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -Br, R^a es (l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona), y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -Cl, R^a es (l,2,4-oxad¡azol-5(4H)-ona), y R^b es H.

En algunas modalidades de fórmula (Ib), R^c es -CN, R^a es -CO2H, y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -CN, R^a es -CH2CO₂H, y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -CN, R^a es tetrazol, y R^b es H. Todavía en otras modalidades, R^c es -CN, R^a es (l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona), y R^b es H.

En algunas modalidades de fórmula (Ib), R^c no es hidrógeno o -CN y R^d es fenilo opcionalmente sustituido. En otras modalidades, R^c no es Ci-C₆ alquilo y R^d es metil. En otras modalidades, R^c no es -CN y R^d es 2-furilo.

En algunas modalidades de fórmula (Ib), R^c no es hidrógeno o -CN cuando y R^d es fenilo opcionalmente sustituido.

En algunas modalidades de fórmula (Ib), R^c no es Ci-C₆ alquilo cuando R^d es metilo.

En algunas modalidades de fórmula (Ib), R^c no es -CN cuando R^d es 2-furilo.

En otra modalidad, el compuesto de fórmula (I) está representado por la fórmula (II):

R5

NH

R^d (Π) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde:

R^c es halógeno, -CN, -OR^X, o Ci-C₆ alquilo;

R^d es metilo, arilo de 5 a 10 miembros opcionalmente sustituido, heteroarilo de 5 o 6

ΙΜΡΙ miembros opcionalmente sustituido, o carbociclo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido; y

R^x es hidrógeno o Ci-Q alquilo con la condición de que R^c no sea -CN cuando y R^d es fenilo opcionalmente sustituido, R^c no sea Ct-C₆ alquilo cuando R^d es metilo, y que R^c no sea -CN cuando R^d es 2-furilo.

En algunas modalidades de fórmula (II), R^c es halógeno, -CN, -OR^X, o CrC6 alquilo; R^d es metilo, arilo de 5 a 10 miembros opcionalmente sustituido, heteroarilo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido, o carbociclo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido; y R^x es hidrógeno o Ci-C6 alquilo con la condición de que R^c no sea Q-Q alquilo cuando R^d es metilo, y que R^c no sea -CN cuando R^d es 2-furilo.

En algunas modalidades de fórmula (II), R^c es halógeno, -CN, -OR^X, o CrC₆ alquilo. En otras modalidades, R^c es halógeno, -CN, -OR^X, o C1-C3 alquilo. En modalidades adicionales, R^c es -CN o halógeno.

En algunas modalidades de fórmula (II), R^d es metilo, arilo de 5 a 10 miembros opcionalmente sustituido, heteroarilo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido, o carbociclo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido. En otras modalidades, R^d es ciclohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, o tienilo, en donde cada uno es sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de halógeno, CrC6 alquilo, CrC6 hidroxialquilo, Ci-C6 alcoxi, Cr C6 haloalquilo, CrC6 haloalcoxi, -OH, CN, y amino. En otras modalidades, R^d es ciclohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, o tienilo, en donde cada uno es sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de halógeno, CrQ alquilo, CrC6 hidroxialquilo, Cr C₆ alcoxi, CrC₆ haloalquilo, y C_x-C₆ haloalcoxi. En otras modalidades, R^d es ciclohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, o tienilo, en donde cada uno es sustituido opcionalmente con uno o más halógeno. En modalidades adicionales, R^d es metilo, ciclohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, o tienilo.

En algunas modalidades de fórmula (II), R^b es hidrógeno, CO2R^X, CH2CO₂R^X, tetrazol, u oxadiazolona. En otras modalidades, R^b es hidrógeno, CO₂H, CH₂CO₂H, tetrazol, o 1,2,4-oxadiazol5(4H)-ona. En modalidades adicionales, R^bes hidrógeno.

En algunas modalidades de fórmula (II), R^a es hidrógeno, CO2R^X, CH2CO₂R^X, tetrazol, u oxadiazolona. En modalidades adicionales, R^a es hidrógeno, CO₂H, CH₂CO₂H, tetrazol, o 1,2,4oxadiazol-5(4H)-ona.

En algunas modalidades de fórmula (II), cada R^e es independientemente Ci-C6 alquilo, C2-Cg alquenilo, C2-Ce alquinilo, halógeno, -OR^y, CrC6 haloalquilo, -NHR^Z, -OH, o -CN.

En algunas modalidades de fórmula (II), cada R^y es independientemente hidrógeno, Ct-C₆ alquilo, o CrC₆ haloalquilo.

En algunas modalidades de fórmula (II), cada R^z es independientemente hidrógeno, CrC₆ alquilo, o CrQ haloalquilo.

ΙΜΡΙ

En algunas modalidades de fórmula (II), n es 0, 1, 2 o 3. En algunas modalidades, n es 0 o 1. En otras modalidades, n es 0.

En algunas modalidades de fórmula (II), una de R^a y R^b es hidrógeno y el otro es CO2R^X, CH2CO₂R^x, tetrazol, u oxadiazolona. En otras modalidades, R^bes hidrógeno y R^a es CH₂CO₂H, tetrazol, o (l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona).

En algunas modalidades de fórmula (II), R^b es hidrógeno, R^c es -CN, R^d es tienilo, y R^a es CH₂CO₂H, tetrazol, o (l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona).

En algunas modalidades de fórmula (II), R^c es halógeno, R^a es -CO2H, y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -Br, R^a es -CO2H, y R^b es H. En modalidades adicionales, R^c es -Cl, R^a es -CO₂H, y R^b es H.

En algunas modalidades de fórmula (II), R^c es halógeno, R^a es tetrazol, y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -Br, R^a es tetrazol, y R^b es H. En modalidades adicionales, R^c es -Cl, R^a es tetrazol, y R^b es H.

En algunas modalidades de fórmula (Π), R^c es halógeno, R^a es -CH2CO2H, y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -Br, R^a es -CH2CO₂H, y R^b es H. En modalidades adicionales, R^c es -Cl, R^a es -CH₂CO₂H, y R^b es H.

En algunas modalidades de fórmula (II), R^c es halógeno, R^a es (1,2,4-oxadiazol5(4H)-ona), y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -Br, R^a es (l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona), y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -Cl, R^a es (l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona), y R^b es H.

En algunas modalidades de fórmula (II), R^c es -CN, R^a es -CO2H, y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -CN, R^a es -CH2CO₂H, y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -CN, R^a es tetrazol, y R^b es H. Todavía en otras modalidades, R^c es -CN, R^a es (l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona), y R^b es H.

En otra modalidad, el compuesto de fórmula (I) está representado por la fórmula (III):

Cl (R^e)n

R^a

R^d o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en donde:

R^a y R^b es hidrógeno y el otro es -(CH2)rCO2R^x, -OCH2CO2R^X, -(CH₂)_rtetrazol, £

ΙΜΡΙ

-(CH₂)_roxadiazolona, -(CH₂)_rtetrazolona, -(CH₂)_rtiadiazolol, -(CH₂)_r isoxazol-3-ol, -(CH₂)_rP(O)(OH)OR^x, -(CH₂)_rS(O)₂OH, -(CH₂)_rC(O)NHCN, o -(CH₂)_rC(O)NHS(O)₂alquilo;

R^c es H, CrC₆ alquilo, Ci-C₆ haloalquilo, halógeno, -CN, -OR^X, -CO2R^X, o NO2;

R^d es metilo, arilo de 5 a 10 miembros opcionalmente sustituido, heteroarilo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido, o carbociclo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido;

cada R^x es independientemente en cada ocurrencia hidrógeno o Ci-C₆ alquilo;

cada R^e es independientemente Ci-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halógeno, -OR^y, CrC₆ haloalquilo, -NHR^Z, -OH, o -CN;

cada R^y y R^z es independientemente hidrógeno, Ci-C₆ alquilo, o Ci-C₆ haloalquilo; y n es 0, 1, 2, o 3.

En algunas modalidades de fórmula (III), una de R^a y R^b es hidrógeno y el otro es -(CH2)rCO2R^x, -OCH2CO₂R^X, -(CH2)rtetrazol, -(CH2)roxadiazolona, -(CH2)rtetrazolona, -(CH2)rtiadiazolol, -(CH2)r isoxazol-3-ol, -(CH2)rP(O)(OH)OR^x, -(CH2)_rS(O)₂OH, -(CH₂)_rC(O)NHCN, o -(CH₂)_r C(O)NHS(O)₂alquilo;

R^c es CrQ alquilo, Ci-C₆ haloalquilo, halógeno, -CN, -OR^X, -CO2R^X, o NO2;

R^d es metilo, arilo de 5 a 10 miembros opcionalmente sustituido, heteroarilo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido, o carbociclo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido;

cada R^x es independientemente en cada ocurrencia hidrógeno o Ci-C₆ alquilo;

cada R^e es independientemente Q-Q alquilo, C2-Q alquenilo, C2-C6 alquinilo, halógeno, -OR^y, Ci-C6 haloalquilo, -NHR^Z, -OH, o -CN.

En algunas modalidades de fórmula (III), una de R^a y R^b es hidrógeno y el otro es CO2R^X, CH2CO₂R^X, tetrazol, u oxadiazolona;

R^c es halógeno, -CN, -OR^X, o Ci-C₆ alquilo;

R^d es metilo, arilo de 5 a 10 miembros opcionalmente sustituido, heteroarilo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido, o carbociclo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido; y

R^x es hidrógeno o CrQ alquilo;

cada R^e es independientemente Ci-C₆ alquilo, C₂-C₆ alquenilo, C₂-C₆ alquinilo, halógeno, -OR^y, CrCfihaloalquilo, -NHR^Z, -OH, o -CN;

cada R^y y R^z es independientemente hidrógeno, Ci-C₆ alquilo, o Ci-C₆ haloalquilo; y n es 0, 1, 2, o 3;

con la condición de que R^c no sea hidrógeno o -CN cuando R^d es fenilo opcionalmente sustituido y que R^c no sea -CN cuando R^d es 2-furilo.

En algunas modalidades de fórmula (III), R^a es -(CH2)rCO2R^x, -OCH2CO₂R^X,

-(CH₂)_rtetrazol, -(CH₂)_roxadiazolona, -(CH₂)_rtetrazolona, -(CH₂)_rtiadiazolol, -(CH₂)_r isoxazol-3-ol, -(CH₂)_rP(O)(OH)OR^x, -(CH₂)_rS(O)₂OH, -(CH₂)_rC(O)NHCN, o -(CH₂)_rC(O)NHS(O)₂alquilo. En otras

IMPI modalidades,

R^a es

-(CH₂)_rCO₂R^x,

-OCH₂CO₂R^x, tetrazol,

-(CH₂)tetrazol, oxadiazolona,

-(CH₂)oxadiazolona, tetrazolona, -(CH₂)tetrazolona, tiadiazolol, -(CH₂)tiadiazolol, isoxazol-3-ol, -(CH₂) isoxazol-3-ol,

-P(O)(OH)OR^X, -(CH2)P(O)(OH)OR^x, -S(O)2OH, -(CH₂)S(O)₂OH, -C(O)NHCN

-(CH₂)C(O)NHCN, -C(O)NHS(O)₂alquilo, o -(CH₂)C(O)NHS(O)₂alquilo. En otras modalidades, R^a es hidrógeno, CO2R^X, CH2CO₂R^X, tetrazol, u oxadiazolona. En modalidades adicionales, R^a es hidrógeno, CO₂H, CH₂CO₂H, tetrazol, o l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona.

En algunas modalidades de fórmula (III), R^b es -(CH2)rCO2R^x, -OCH2CO₂R^X, -(CH₂)_r tetrazol,

-(CH₂)rOxadiazolona,

-(CH₂)_rtetrazolona,

-(CH₂)_rtiadiazolol,

-(CH₂)_r isoxazol-3-ol,

-(CH₂)_rP(O)(OH)OR^x, -(CH₂)_rS(O)₂OH, -(CH₂)_rC(O)NHCN, o &lt;CH₂)_rC(O)NHS(O)₂alquilo. En otras modalidades,

R^b es

-(CH₂)_rCO₂R^x,

-OCH₂CO₂R^x, tetrazol, -(CH₂)tetrazol, oxadiazolona,

-(CH₂)oxadiazolona, tetrazolona, -(CH₂)tetrazolona, tiadiazolol, -(CH₂)tiadiazolol, isoxazol-3-ol, -(CH₂) isoxazol-3-ol,

-P(O)(OH)OR^X, -(CH₂)P(O)(OH)OR^x,

-S(O)₂OH, -(CH₂)S(O)₂OH, -C(O)NHCN

-(CH₂)C(O)NHCN, -C(O)NHS(O)₂alquilo, o -(CH₂)C(O)NHS(O)₂alquilo. En otras modalidades, R^b es hidrógeno, CO2R^X, CH2CO₂R^X, tetrazol, u oxadiazolona. En modalidades adicionales, R^b es hidrógeno, CO₂H, CH₂CO₂H, tetrazol, o 1,2,4-οχ3όΐ3ζοΙ-5(4Η)-οη3. En modalidades adicionales, R^bes hidrógeno.

En algunas modalidades de fórmula (III), R^c es H, CrQ alquilo, Ci-C₆ haloalquilo, halógeno, -CN, -OR^X, -CO2R^X, o NO2. En otras modalidades, R^c es Ci-Q alquilo, Ci-C₆ haloalquilo, halógeno, -CN, -OR^X, -CO2R^X, o NO2. En otras modalidades, R^c es halógeno, -CN, -OR^X, o Ci-C₆ alquilo. En otras modalidades, R^c es halógeno, -CN, -OR^X, o Ci-C₃ alquilo. En otras modalidades, R es H, -CN, o halógeno. En otras modalidades, R^c es -CN o halógeno.

En algunas modalidades de fórmula (III), R^d es metilo, arilo de 5 a 10 miembros opcionalmente sustituido, heteroarilo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido, o carbociclo de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido. En otras modalidades, R^d es metilo, ciclohexilo opcionalmente sustituido, piridinilo opcionalmente sustituido, tiazolilo opcionalmente sustituido, fenilo opcionalmente sustituido, o tienilo opcionalmente sustituido. En otras modalidades, R^d es ciclohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, o tienilo, en donde cada uno es sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de halógeno, CrC6 alquilo, Ci-C6 hidroxialquilo, Ci-C6 alcoxi, CpCe haloalquilo, CrC6 haloalcoxi, ΌΗ, CN, y amino. En otras modalidades, R^d es ciclohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, o tienilo, en donde cada uno es sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de halógeno, CrC6 alquilo, C^Q hidroxialquilo, CrC₆ alcoxi, CrC₆ haloalquilo, y Ci-C₆ haloalcoxi. En otras modalidades, R^d es ciclohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, o tienilo, en donde cada uno es sustituido opcionalmente con uno o más halógeno. En otras modalidades, R^d es metilo, ciclohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, o tienilo. Todavía en otras modalidades, R^d es ciclohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, o tienilo. En otras modalidades, R^d es ciclohexilo, piridinilo, tiazolilo, fenilo, 4-clorofenilo, 4-metilfenilo, o tienilo.

IMPI σι

En algunas modalidades de fórmula (III), cada R^e es independientemente CrC6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-Cg alquinilo, halógeno, -OR^y, Cx-C6 haloalquilo, -NHR^Z, -OH, o -CN. En otras modalidades, CpC, alquilo, C₂-NHR^Z, -OH, o -CN.

alquenilo, C₂-C₄ alquinilo, halógeno, -0R^y, C1-C4 haloalquilo,

En algunas modalidades de fórmula (III), R^x es hidrógeno o CrC6 alquilo. En otras modalidades, R^x es hidrógeno o CrC3 alquilo. En modalidades adicionales, R^x es hidrógeno, metilo, etilo, n-propilo, o iso-propilo.

En algunas modalidades de fórmula (III), R^y es independientemente hidrógeno, Ci-C6 alquilo, o CrC6 haloalquilo. En otras modalidades, R^y es hidrógeno, CrC3 alquilo, o CrC₃ haloalquilo.

En algunas modalidades de fórmula (III), cada R^z es independientemente hidrógeno, Ci-C6 alquilo, o Ci-Cg haloalquilo. En otras modalidades, R^z es hidrógeno, CrC3 alquilo, o CrC₃haloalquilo.

En algunas modalidades de fórmula (III), n es 0, 1, 2 o 3. En algunas modalidades, n es 0 o 1. En otras modalidades, n es 0.

En algunas modalidades de fórmula (III), una de R^a y R^b es hidrógeno y el otro es CO2R^x, CH2CO₂R^x, tetrazol, u oxadiazolona. En otras modalidades, R^b es hidrógeno y R^a es CH₂CO₂H, tetrazol, o (l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona).

En algunas modalidades de fórmula (III), R^b es hidrógeno, R^c es -CN, R^d es tienilo, y R^a es CH₂CO₂H, tetrazol, o (l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona). -¹.

En algunas modalidades de fórmula (III), R^c es halógeno, R^a es -CO2H, y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -Br, R^a es -CO2H, y R^b es H. En modalidades adicionales, R^c es -Cl, R^a es -CO₂H, y R^b es H.

En algunas modalidades de fórmula (III), R^c es halógeno, R^a es tetrazol, y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -Br, R^a es tetrazol, y R^b es H. En modalidades adicionales, R^c es -Cl, R^aes tetrazol, y R^b es H.

En algunas modalidades de fórmula (III), R^c es halógeno, R^a es -CH2CO2H, y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -Br, R^a es -CH2CO₂H, y R^b es H. En modalidades adicionales, R^c es -Cl, R^a es -CH₂CO₂H, y R^b es H.

En algunas modalidades de fórmula (III), R^c es halógeno, R^a es (1,2,4-oxadiazol5(4H)-ona), y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -Br, R^a es (l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona), y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -Cl, R^a es (l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona), y R^b es H.

En algunas modalidades de fórmula (III), R^c es -CN, R^a es -CO2H, y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -CN, R^a es -CH2CO₂H, y R^b es H. En otras modalidades, R^c es -CN, R^a es tetrazol, y R^b es H. Todavía en otras modalidades, R^c es -CN, R^a es (l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona), y R^b es H.

En algunas modalidades de fórmula (III), R^c no es hidrógeno o -CN cuando R^d es

IMPI fenilo opcionalmente sustituido, R^c no es Ci-C₆ alquilo cuando R^d es metilo, y que R^c no es -CN cuando R^d es 2-furilo.

En algunas modalidades de fórmula (I), (la), (Ib), (II) y (III), una de R^a o R^b es un ácido carboxílico o un bioisoéster de ácido carboxíiico.

En algunas modalidades de fórmula (I), (la), (Ib), (II) y (III), R^a es -CO2H, -(CH2)CO2H, o -OCH2CO2H. En otras modalidades, R^a es -CO2CH₃, -CO₂CH₂CH₃, -CO₂CH₂CH₂CH₃, -CO₂CH(CH₃)₂, -(CH₂)CO₂CH₃, -(CH₂)CO₂CH₂CH₃, -(CH₂)CO₂CH₂CH₂CH₃, o -(CH₂)CO₂CH(CH₃)₂.

En algunas modalidades de fórmula (I), (la), (Ib), (II) y (III), R^a es -P(O)(OH)OH,

-(CH₂)P(O)(OH)OH

-P(O)(OH)OCH₃,

-P(O)(OH)OCH₂CH₃,

-P(O)(OH)OCH₂CH₂CH₃,

-P(O)(OH)OCH(CH₃)₂, -(CH₂) P(O)(OH)OCH₃, -(CH₂)P(O)(OH)OCH₂CH₃, -(CH₂)P(O)(OH)OCH₂CH₂CH₃, o -(CH₂)P(O)(OH)OCH(CH₃)₂.

En algunas modalidades de fórmula (I), (la), (Ib), (II) y (III), R^a es -S(O)₂OH, -(CH₂)S(O)₂OH, -C(O)NHCN, o -(CH₂)C(O)NHCN.

En algunas modalidades de fórmula (I), (la), (Ib), (II) y (III), R^a es

-C(O)NHS(O)₂CH₃,

-C(O)NHS(O)₂CH₂CH₃,

-C(O) N H S(O)₂CH ₂CH₂CH ₃,

-C(O)NHS(O)₂CH(CH₃)₂,

-(CH₂)C(O)NHS(O)₂CH₃,

-(CH₂)C(O)NHS(O)₂CH(CH₃)₂.

-(CH₂)C(O)NHS(O)₂CH₂CH₃,

-(CH₂)C(O)NHS(O)₂CH₂CH₂CH₃,

En algunas modalidades de fórmula (I), (la), (Ib), (II) y (III), R^a es

<img file="MX389591B_D0004.tif" />

HO

OH

<img file="MX389591B_D0005.tif" />

OH

HO

NH

<img file="MX389591B_D0006.tif" />

OH

<img file="MX389591B_D0007.tif" />

OH

<img file="MX389591B_D0008.tif" />

OH

OH •\ I Γ

N^S

Y o

NH

OH

OH l \^Ns /O

En algunas modalidades de fórmula (I), (la), (Ib), (II), y (III), R^a es

<img file="MX389591B_D0009.tif" />

HO

OH

OH l Γ /S _V^N>( N V

NH

<img file="MX389591B_D0010.tif" />

HO

N i NH 1

En algunas modalidades de fórmula (I), (la), (Ib), (II) y (III), R^b es -CO2H, -(CH2)CO2H, o -OCH2CO2H. En otras modalidades, R^b es -CO2CH₃, -CO₂CH₂CH₃, -CO₂CH₂CH₂CH₃, -CO₂CH(CH₃)₂, -(CH₂)CO₂CH₃, -(CH₂)CO₂CH₂CH₃, -(CH₂)CO₂CH₂CH₂CH₃, o -(CH₂)CO₂CH(CH₃)₂.

IMPI

En algunas modalidades de fórmula (I), (la), (Ib), (II) y (III), R^b es -P(O)(OH)OH,

-(CH₂)P(O)(OH)OH,

-P(O)(OH)OCH₃,

-P(O)(OH)OCH₂CH₃,

-P(O)(OH)OCH₂CH₂CH_3z

-P(O)(OH)OCH(CH₃)₂, -(CH₂) P(O)(OH)OCH₃, -(CH₂)P(O)(OH)OCH₂CH₃, -(CH₂)P(O)(OH)OCH₂CH₂CH o -(CH₂)P(O)(OH)OCH(CH₃)₂.

3/

En algunas modalidades de fórmula (I), (la), (Ib), (II) y (III), R^b es -S(O)₂OH, -(CH₂)S(O)₂OH, -C(O)NHCN, o -(CH₂)C(O)NHCN.

En algunas modalidades de fórmula (I), (la), (Ib), (II) y (III), R^b es

-C(O)NHS(O)₂CH₃,

-C(O)NHS(O)₂CH₂CH₃,

-C(O)NHS(O)₂CH₂CH₂CH₃,

-C(O)NHS(O)₂CH(CH₃)₂,

-(CH₂)C(O)NHS(O)₂CH₃,

-(CH₂)C(O)NHS(O)₂CH(CH₃)₂.

-(CH₂)C(O)NHS(O)₂CH₂CH₃,

-(CH₂)C(O)NHS(O)₂CH₂CH₂CH₃,

En algunas modalidades de fórmula (I), (la), (Ib), (II) y (III), R^b es

<img file="MX389591B_D0011.tif" />

HO

OH

<img file="MX389591B_D0012.tif" />

N

OH

HO ’X l P ,S N Y

NH

OH

OH

N s'

<img file="MX389591B_D0013.tif" />

OH

OH

L>

N

NH * o

<img file="MX389591B_D0014.tif" />

OH

OH

I > s

En algunas modalidades de fórmula (I), (la), (Ib), (II), y (III), R^b es

OH

<img file="MX389591B_D0015.tif" />

HO

NA yS

OH

NH o

<img file="MX389591B_D0016.tif" />

HO

N

JS N

NH

En algunas modalidades, el compuesto proporcionado aquí es un compuesto de una de las siguientes fórmulas:

NC

NC

NH ^s^/V^^zC°^2H

NH

IMPI

O

N

NH

NC

NH

NC

NC

NH

NH

Br

A_s^_v^^c°₂h

NH

Br

NH /^&lt;^CO₂H

Cl

NH

NH

<img file="MX389591B_D0017.tif" />

CO₂H ;N NH

Ν

NH

NH n-Q

Cl í^V^N o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

La definición anterior de los compuestos de fórmula (I) se denomina aquí por las expresiones compuesto de fórmula (1) como se define aquí, o simplemente compuestos de fórmula (I), etc. La definición anterior de los compuestos de fórmula (la) se denomina aquí por las expresiones compuesto de fórmula (la) como se define aquí, o simplemente compuestos de fórmula (la), etc. La definición anterior de los compuestos de fórmula (Ib) se refiere aquí por las expresiones compuesto de fórmula (Ib) como se define aquí, o simplemente compuestos de

IMPI fórmula (Ib), etc. La definición anterior de los compuestos de fórmula (II) se define aquí por las expresiones compuesto de fórmula (II) como se define aquí, o simplemente compuestos de fórmula (II), etc. La definición anterior de los compuestos de fórmula (III) se denomina aquí por las expresiones compuesto de fórmula (III) como se define aquí, o simplemente compuestos de fórmula (III), etc. Debería entenderse, que tales referencias pretenden abarcar no sólo la fórmula general anterior, sino también todas y cada una de las modalidades, etc., discutidas en lo siguiente: También debe entenderse que, a menos que se indique lo contrario, tales referencias también abarcan isómeros, mezclas de isómeros, sales, solvatos y profármacos farmacéuticamente aceptables de los compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), y fórmula (III).

Definiciones

El término alquilo tal como se utiliza aquí se refiere a una cadena de hidrocarburo saturada, lineal o ramificada. La cadena de hidrocarburo contiene preferiblemente de uno a ocho átomos de carbono (alquilo Ci-₈), más preferida de uno a seis átomos de carbono (alquilo Ci-₆), en particular de uno a cuatro átomos de carbono (alquilo Ci-₄), que incluyen metilo, etilo, propilo, isopropílo, butilo, ¡sobutilo, butilo secundario, butilo terciarlo, pentilo, isopentilo, neopentilo, pentilo terciario, hexilo, isohexilo, heptilo y octilo. En una modalidad preferida, alquilo representa un grupo alquilo ^.₄, que puede incluir en particular metilo, etilo, propilo, isopropílo, butilo, isobutilo, butilo secundario y butilo terciario. Correspondientemente, el término alquileno significa el correspondiente biradical (alquilo-).

El término cicloalquilo o carbociclo, tal como se utiliza aquí, se refiere a un grupo alquilo cíclico, que contiene preferiblemente de tres a diez átomos de carbono (cicloalquilo C₃-i₀ o carbociclo C₃.i₀), tal como de tres a ocho átomos de carbono (cicloalquilo C

3-8 o carbociclo C₃-i₀), preferiblemente de tres a seis átomos de carbono (cicloalquilo C₃.₆ o carbociclo C₃-i₀), incluyendo ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo y ciclooctilo. Además, el término cicloalquilo tal como se utiliza aquí también puede incluir grupos policíclicos tales como por ejemplo b¡ciclo[2.2.2]octilo, biciclo[2.2.1] heptanilo, decalinilo y adamantilo. Correspondientemente, el término cicloalquileno significa el correspondiente biradical (cicloalquilo-). Los grupos alquilo y cicloalquilo pueden estar opcionalmente sustituidos con 1-4 sustituyentes. Los ejemplos de sustituyentes en grupos alquilo incluyen, pero no se limitan a, alquilo, alquenilo, alquinilo, halógeno, haloalquilo, alcoxi, heteroarilo, arilo, carbociclilo, hidroxilo, carbamoilo, oxo y -CN.

El término alquenilo tal como se utiliza aquí se refiere a una cadena de hidrocarburo lineal o ramificada o hidrocarburos cíclicos que contienen uno o más dobles enlaces, incluyendo di-enos, tri-enos y poli-enos. Típicamente, el grupo alquenilo comprende de dos a ocho átomos de carbono (alquenilo C₂.₈), tal como de dos a seis átomos de carbono (alquenilo C₂.₆), en

IMPI particular de dos a cuatro átomos de carbono (alquenilo C₂.₄, que incluyen al menos un doble enlace. Los ejemplos de grupos alquenilo incluyen etenilo; 1- o 2-propenilo; 1-, 2- o 3-butenilo, o 1,3-butdienilo; 1-, 2-, 3-, 4- o 5-hexenilo, o 1,3-hex-dienilo, o 1,3,5-hex-trienilo; 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, o 710 octenilo o 1,3-octadienilo,

1,3,5-octatrienilo, o 1,3,5,7-octatetraenilo, ciclohexenilo.

Correspondientemente, el término alquenileno significa el correspondiente biradical (alquenil-). Los grupos alquenilo pueden estar opcionalmente sustituidos con 1-4 sustituyentes. Los ejemplos de sustituyentes en grupos alquenilo incluyen, pero no se limitan a, alquilo, alquenilo, alquinilo, halógeno, haloalquilo, alcoxi, heteroarilo, arilo, carbociclilo, hidroxilo, carbamoilo, oxo y -CN.

El término alquinilo tal como se utiliza aquí se refiere a una cadena de hidrocarburo lineal o ramificada que contiene uno o más enlaces triples, incluyendo di-inos, tri-inos y poli-inos. Típicamente, el grupo alquinilo comprende de dos a ocho átomos de carbono (alquinilo C₂.₈), tal como de dos a seis átomos de carbono (alquinilo C₂.₆), en particular de dos a cuatro átomos de carbono (alquinilo C₂.₄), incluyendo al menos un triple enlace. Los ejemplos de grupos alquinilo -preferidos incluyen etinilo; 1- o 2-propinilo; 1-, 2- o 3-butinilo, o 1,3-but-diinilo; 1-, 2-, 3-, 4- o 5hexinilo, o 1,3-hex-diinilo, o 1,3,5-hex-triinilo; 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7-octinilo, o l,3-oct-7-octtetrainilo. Correspondientemente, el término alquinileno significa el correspondiente biradical (alquinilo-). Los grupos alquinilo pueden estar opcionalmente sustituidos con 1-4 sustituyentes. Los ejemplos de sustituyentes en grupos alquinilo incluyen, pero no se limitan a, alquilo, alquenilo, alquinilo, halógeno, haloalquilo, alcoxi, heteroarilo, arilo, carbociclilo, hidroxilo, carbamoilo, oxo y CN.

Los términos halo y halógeno, tal como se usan aquí, se refieren a flúor, cloro, bromo o yodo. Así, un grupo trihalometilo representa, por ejemplo, un grupo trifluorometilo, o un grupo triclorometilo. Preferiblemente, los términos halo y halógeno designan flúor o cloro.

El término haloalquilo tal como se utiliza aquí se refiere a un grupo alquilo, como se define aquí, que está sustituido una o más veces con uno o más halógenos. Los ejemplos de grupos haloalquilo incluyen, pero no se limitan a, trifluorometilo, difluorometilo, pentafluoroetilo, triclorometilo, etc.

El término alcoxi tal como se utiliza aquí se refiere a un grupo alquilo-O-, en donde alquilo es como se definió anteriormente.

El término hidroxialquilo tai como se utiliza aquí se refiere a un grupo alquilo (como se ha definido anteriormente aquí), cuyo grupo alquilo está sustituido una o más veces con hidroxi. Ejemplos de grupos hidroxialquilo incluyen HO-CH₂-, HO-CH₂-CH₂- y CH₃-CH(OH)-.

El término oxi como se usa en la presente se refiere a un grupo Ό-.

El término oxo como se usa en la presente se refiere a un grupo =O.

El término amina tal como se utiliza en el presente documento se refiere a aminas

IMPI primaria (R-NH₂, R * H), secundaria ((R)₂-NH, (R)₂ H) y terciaria ((R)₃-N, R * H). Una amina sustituida pretende significar una amina en donde al menos uno de los átomos de hidrógeno ha sido reemplazado por el sustituyente.

El término carbamoilo tal como se utiliza aquí se refiere a un grupo ”H₂N(C=O)-.

El término arilo, tal como se utiliza aquí, a menos que se indique otra cosa, incluye sistemas de anillos aromáticos carbocíclicos derivados de un hidrocarburo aromático por eliminación de un átomo de hidrógeno. Arilo incluye además sistemas de anillo bi-, tri- y policíclico. Los ejemplos de radicales arilo preferidos incluyen fenilo, naftilo, indenilo, indanilo, fluorenilo, bifenilo, indenilo, naftilo, antracenilo, fenantrenilo, pentalenilo, azulenilo y bifenilenilo. El arilo preferido es fenilo, naftilo o indanilo, en particular fenilo, a menos que se indique lo contrario. Cualquier arilo usado puede estar opcionalmente sustituido. Correspondientemente, el término arileno significa el correspondiente biradical (arilo-). Los grupos arilo pueden estar opcionalmente sustituidos con 1-4 sustituyentes. Los ejemplos de sustituyentes en grupos arilo incluyen, pero no se limitan a, alquilo, alquenilo, alquinilo, halógeno, haloalquilo, alcoxi, heteroarilo, arilo, carbociclilo, hidroxilo, y -CN.

El término heteroarilo, como se usa aquí, se refiere a grupos aromáticos que contienen uno o más heteroátomos seleccionados de O, S y N, preferiblemente de uno a cuatro heteroátomos, y más preferiblemente de uno a tres heteroátomos. Heteroarilo incluye además, grupos bi-, tri- y policíclicos, en donde al menos un anillo del grupo es aromático, y al menos uno de los anillos contiene un heteroátomo seleccionado de O, S y N. Heteroarilo también incluye sistemas de anillos sustituidos con uno o más radicales oxo. Los ejemplos de radicales heteroarilo preferidos incluyen N-hidroxitetrazolilo, N-hidroxitriazolilo, N-hidroxiimidazolilo, furanilo, triazolilo, pirani tiadiazinilo, benzotiofenilo, dihidro-benzo[b]tiofenilo, xantenilo, isoindanii, acridinilo, benzoisoxazoli quinolinilo, isoquinolinilo, fteridinilo, azepinilo, diazepinifo, imidazolilo, tiazolilo, carbazolilo, piridini piridazinilo, pirimidinilo, pirazolilo, pirazinilo, tetrazolilo, furilo, tienilo, isoxazolilo, oxazoli isotiazolilo, pirrolilo, indolilo, bencimidazolilo, benzofuranilo, cinnolinilo, indazolilo, indolizini ftalazinilo, triazinilo, isoindolilo, purinilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, furazanilo, benzofurazani benzotiofenilo, benzotriazolilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, naftiridini dihidroquinolilo.

tetrahidroquinolilo, dihidroisoquinolilo, tetrahidroisoquinolilo, benzofuri furopiridinilo, pirolopirimidinilo, azaindolilo, pirazolinilo, l,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona, y pirazolidini Los ejemplos no limitativos de derivados parcialmente hidrogenados son 1,2,3,4-tetrahidronafti

0/

0/

O,

0/ o, o,

0/ o,

o.

0/

1,4-dihidronaftilo y 1-octalina. Correspondientemente, el término heteroarileno significa el correspondiente biradical (heteroarilo-). Los grupos heteroarilo pueden estar opcionalmente sustituidos con 1-4 sustituyentes. Los ejemplos de sustituyentes en grupos heteroarilo incluyen, pero no se limitan a, alquilo, alquenilo, alquinilo, halógeno, haloalquilo, alcoxi, heteroarilo, arilo, carbociclilo, hidroxilo y -CN.

IMPI

El término heterociclilo como se usa aquí, se refiere a grupos no aromáticos cíclicos que contienen uno o más heteroátomos seleccionados de O, S y N, preferiblemente de uno a cuatro heteroátomos, y más preferiblemente de uno a tres heteroátomos. El heterociclilo incluye además grupos no aromáticos bi-, tri- y poliddicos, y al menos uno de los anillos contiene un heteroátomo seleccionado entre O, S y N. Heterociclilo también incluye sistemas de anillo sustituidos con uno o más radicales oxo. Los ejemplos de grupos heterocíclicos son oxetano, pirrolidinilo, pirrolilo, 3Hpirrolilo, oxolanilo, furanilo, tiolanilo, tiofenilo, pirazolilo, pirazolidinilo, imidazoliio, imidazolidinilo, 3Hpirazolilo, 1,2-oxazolilo, 1,3-oxazolilo, 1,2-tiazolilo, 1,3-tiazolilo, 1,2,5-oxadiazolilo, piperidinilo, piridinilo, oxanilo, 2-H-piranilo, 4-H-piranilo, tianilo, 2H-tiopiranilo, piridazinilo, 1,2-diazinanilo, pirimidinilo 1,3-diazinanilo, pirazinilo, piperazinilo, 1,4-dioxinilo, 1,4-dioxanilo, 1,3-diazinanilo, 1,4oxazinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, 1,4-oxatianilo, benzofuranilo, isobenzofuranilo, indazolilo, bencimidazolilo, quinolinilo, isoquinolinilo, cromanilo, isociromanilo, 4H-cromenilo, IH-isocromenilo, cinolinilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, ftalazinilo, purinilo, naftiridinilo, pteridinilo, indolizinilo, 1Hpirrolízinilo, 4H-quinolizinilo y aza-8-biciclo [3.2.1]octano. Correspondientemente, el término heterociclileno significa el correspondiente biradical (heterociclilo-). Los grupos heterociclilo pueden estar opcionalmente sustituidos con 1-4 sustituyentes. Los ejemplos de sustituyentes en grupos heterociclilo incluyen, pero no se limitan a, alquilo, alquenilo, alquinilo, halógeno, haloalquilo, alcoxi, heteroarilo, arilo, carbociclilo, hidroxilo y -CN.

El término anillo N-heterocíclico tal como se utiliza aquí, se refiere a un heterociclilo o un heteroarilo, como se ha definido anteriormente, que tiene al menos un átomo de nitrógeno, y está unido a través de un átomo de nitrógeno. Los ejemplos de tales anillos N-heterocíclicos son pirrolidinilo, pirrolilo, 3H-pirrolilo, pirazolilo, pirazolidinilo, imidazoliio, imidazolidinilo, 3H-pirazolilo, 1,2-oxazolilo, 1,2-tiazolilo, 1,3-tiazolilo, piperidinilo, piridinilo, piridazinilo, pirazinilo, piperazinilo, morfolinilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazolilo, pirazinilo, tetrazolilo, etc.

Isómeros

En la presente especificación, la fórmula estructural del compuesto representa un cierto isómero por conveniencia en algunos casos, pero la presente descripción incluye todos los isómeros, tales como isómeros geométricos, isómeros ópticos basados en un carbono asimétrico, estereoisómeros, tautómeros y lo similar. Por consiguiente, debe entenderse que la definición de compuestos de fórmulas (I), (la), (Ib), (II) y (III) incluyen cada isómero individual correspondiente a la fórmula: Las fórmulas (I), (la), (Ib), (II) y (III), que incluyen isómeros cis-trans, estereoisómeros y tautómeros, así como mezclas racémicas de éstos y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. Por tanto, la definición de compuestos de fórmulas (I), (la), (Ib), (II) y (III) también pretende abarcar todos los isómeros R y S de una estructura química en cualquier relación, por

ΙΜΡΙ ejemplo, con enriquecimiento (es decir, exceso enantiomérico o exceso diastereomérico) de uno de los posibles isómeros y relaciones menores correspondientes de otros isómeros. Además, puede estar presente un polimorfismo cristalino para los compuestos representados por las fórmulas (I), (la), (Ib), (II) y (III). Se observa que cualquier forma cristalina, mezcla de forma cristalina, o anhídrido o hidrato de la misma está incluida en el alcance de la presente descripción. Además, el denominado metabolito que se produce por degradación del presente compuesto in vivo está incluido en el alcance de la presente descripción.

Isomerismo significa compuestos que tienen fórmulas moleculares idénticas pero difieren en la secuencia de unión de sus átomos o en la disposición de sus átomos en el espacio. Los isómeros que difieren en el arreglo de sus átomos en el espacio se denominan estereoisómeros. Los estereoisómeros que no son imágenes en el espejo entre sí se denominan diastereoisómeros, y estereoisómeros que son imágenes en el espejo no superponibles entre sí se denominan enantiómeros o a veces isómeros ópticos. Una mezcla que contiene cantidades ¡guales de formas enantioméricas individuales de quiralidad opuesta se denomina una mezcla racémica.

Un átomo de carbono unido a cuatro sustituyentes no idénticos se denomina un centro quiral.

Isómero quiral significa un compuesto con al menos un centro quiral. Los compuestos con más de un centro quiral pueden existir como diastereómeros individuales o como una mezcla de diastereómeros, denominada mezcla diastereomérica. Cuando está presente un centro quiral, un estereoisómero puede caracterizarse por la configuración absoluta (R o S) de ese centro quiral. La configuración absoluta se refiere a la disposición en el espacio de los sustituyentes unidos al centro quiral. Los sustituyentes unidos al centro quiral bajo consideración se clasifican de acuerdo con la Sequence Rule of Cahn, Ingold y Prelog. (Cahn et al._f Angew. Chem. Inter. Edit. 1966, 5, 385; errata 511; Cahn et ai., Angew. Chem. 1966, 78, 413; Cahn y Ingold, J. Chem. Soc. 1951 (London), 612; Cahn etai, Experientia 1956, 12, 81; Cahn, J. Chem. Educ. 1964, 41, 116).

Los diastereoisómeros, es decir, los isómeros estereoquímicos no superponibles, se pueden separar por medios convencionales tales como cromatografía, destilación, cristalización o sublimación. Los isómeros ópticos pueden obtenerse por resolución de las mezclas racémicas de acuerdo con procedimientos convencionales, por ejemplo por formación de sales diastereoisoméricas por tratamiento con un ácido o base ópticamente activo. Los ejemplos de ácidos apropiados incluyen, sin limitación, ácido tartárico, diacetiltartárico, dibenzoiltartárico, ditoluoiltartárico y alcanforsulfónico. La mezcla de diastereoisómeros puede separarse por cristalización seguida por liberación de las bases ópticamente activas a partir de estas sales. Un procedimiento alternativo para la separación de isómeros ópticos incluye el uso de una columna de cromatografía quiral elegida óptimamente para maximizar la separación de los enantiómeros. Todavía otro método disponible

IMPI implica la síntesis de moléculas diastereoisoméricas covalentes al hacer reaccionar compuestos de fórmula (I), (la), (Ib), (II) o (III) con un ácido ópticamente puro en una forma activada o un isocianato ópticamente puro. Los diastereoisómeros sintetizados se pueden separar por medios convencionales tales como cromatografía, destilación, cristalización o sublimación, y luego hidrolizarse para obtener el compuesto enantioméricamente puro. Los compuestos ópticamente activos de fórmulas (I), (la), (Ib), (Π) y (III) pueden obtenerse asimismo utilizando materiales de partida ópticamente activos y/o utilizando un catalizador quiral. Estos isómeros pueden estar en forma de un ácido libre, una base libre, un éster o una sal. Los ejemplos de técnicas de separación quiral se dan en Chiral Separation Techniques, A Practical Approach, 2^a ed. by G. Subramanian, Wiley-VCH, 2001.

II

Isómero geométrico significa los diastereómeros que deben su existencia a la rotación impedida alrededor de dobles enlaces. Estas configuraciones se diferencian en sus nombres por los prefijos cis y trans, o Z y E, que indican que los grupos están en el mismo o lado opuesto del doble enlace en la molécula de acuerdo con las reglas de Cahn-Ingold-Prelog.

Además, las estructuras y otros compuestos discutidos en esta descripción incluyen todos sus isómeros atrópicos. Los isómeros atrópicos son un tipo de estereoisómero en el que los átomos de dos isómeros están dispuestos de manera diferente en el espacio. Los isómeros atrópicos deben su existencia a una rotación restringida causada por el impedimento de la rotación de grandes grupos alrededor de un enlace central. Dichos isómeros atrópicos existen típicamente como una mezcla, sin embargo como un resultado de los avances recientes en técnicas de cromatografía; ha sido posible separar mezclas de dos isómeros atrópicos en casos selectos.

Tautómero es uno de dos o más isómeros estructurales que existen en equilibrio y se convierte fácilmente de una forma isomérica a otra. Esta conversión resulta en la migración formal de un átomo de hidrógeno acompañada por un cambio de dobles enlaces conjugados adyacentes. Los tautómeros existen como una mezcla de un conjunto tautomérico en solución. En forma sólida, generalmente un tautómero predomina. En soluciones en las que es posible la tautomerización, se alcanzará un equilibrio químico de los tautómeros. La relación exacta de los tautómeros depende de varios factores, que incluyen temperatura, solvente y pH. El concepto de tautómeros que son interconvertibles por tautomerizaciones se llama tautomerismo.

De los diversos tipos de tautomerismo que son posibles, dos se observan comúnmente. En el tautomerismo de ceto-enol se produce un desplazamiento simultáneo de electrones y un átomo de hidrógeno. El tautomerismo de cadena de anillo surge como resultado del grupo aldehido (-CHO) en una molécula de cadena de azúcar que reacciona con uno de los grupos hidroxi (-OH) en la misma molécula para darle una forma cíclica (en forma de anillo) como se muestra por glucosa.

ΙΜΡΙ

Los pares tautoméricos comunes son: cetona-enol, amida-nitrilo, lactama-lactim, tautomerismo de ácido amida-imídico en anillos heterocíclicos (por ejemplo, en nucleobases tales como guanina, timina y citosina), amina-enamina y enamina-enamina. Debe entenderse que los compuestos de la presente descripción se pueden representar como diferentes tautómeros. También debe entenderse que cuando los compuestos tienen formas tautoméricas, se pretende que todas las formas tautoméricas estén incluidas en el alcance de la presente descripción, y la designación de los compuestos no excluye ninguna forma de tautómero.

El término polimorfos cristalinos, polimorfos o formas cristalinas significa estructuras cristalinas en las que un compuesto (o una sal o solvato del mismo) puede cristalizar en diferentes disposiciones de envasado de cristal, todas las cuales tienen la misma composición elemental. Diferentes formas cristalinas tienen generalmente diferentes patrones de difracción de rayos X, espectros infrarrojos, puntos de fusión, densidad, dureza, forma cristalina, propiedades ópticas y eléctricas, estabilidad y solubilidad. El solvente de recristalización, velocidad de cristalización, temperatura de almacenamiento, y otros factores pueden causar una forma cristalina para dominar. Los polimorfos cristalinos de los compuestos se pueden preparar por cristalización bajo diferentes condiciones.

Además, los compuestos de la presente descripción, por ejemplo, las sales de los compuestos, pueden existir en cualquier forma hidratada solvatos con otras moléculas de solventes. Ejemplos monohidratos, dihidratos, etc. Ejemplos no limitantes de solvatos de acetona, etc.

o no hidratada (el anhidro) o como no limitantes de hidratos incluyen solvatos incluyen solvatos de etanol.

Solvato significa formas de adición de solvente que contienen cantidades estequiométricas o no estequ¡ométricas de un solvente. Algunos compuestos tienen una tendencia a atrapar una relación molar fija de moléculas de solvente en el estado sólido cristalino, formando de esta manera un solvato. Si el solvente es agua, el solvato formado es un hidrato; y si el solvente es alcohol, el solvato formado es un alcohólate. Los hidratos se forman por la combinación de una o más moléculas de agua con una molécula de la sustancia en la que el agua retiene su estado molecular como H₂O.

La presente descripción se pretende incluir todos los isótopos de los átomos que se producen en los compuestos presentes. Isótopos incluyen esos átomos tienen el mismo número atómico, pero diferentes números de masa. A modo de ejemplo general y sin limitación, los isótopos de hidrógeno incluyen tritio y deuterio, e isótopos de carbono incluyen C-13 y C-14.

A lo largo de la descripción y las reivindicaciones de esta especificación, las palabras comprende y contiene y variaciones de las palabras, por ejemplo que comprende y comprende, significan incluyendo pero sin limitarse a, y no excluyen otras porciones, aditivos,

IMPI componentes, enteros o pasos. A lo largo de la descripción y reivindicaciones de esta descripción, el singular abarca el plural a menos que el contexto lo requiera de otra manera. En particular, cuando se usa el artículo indefinido, la memoria descriptiva debe entenderse como contemplando la pluralidad así como la singularidad, a menos que el contexto lo requiera de otra manera.

Todas las referencias, incluyendo cualquier solicitud de patente o patente, citadas en esta especificación se incorporan por referencia. No se hace admisión de que cualquier referencia constituya técnica anterior. Además, no se hace admisión de que cualquier técnica anterior constituya parte del conocimiento general común en la técnica.

Método de tratamiento

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un método de tratamiento de una enfermedad o trastorno en donde a-amino-p-carboximuconato-s-semialdehído desearboxilasa (ACMSD) juega un papel que comprende administrar al sujeto que lo necesita una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un método de tratamiento de una enfermedad o trastorno asociado con disfundón de α-amino-β-carboximuconato-ε-semialdehído decarboxilasa (ACMSD) que comprende administrar al sujeto que padece de, o es susceptible a desarrollar una enfermedad o trastorno asociado con disfundón de ACMSD una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un método para prevenir una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de a-amino-p-carboximuconato-e-semialdehído decarboxilasa (ACMSD) que comprende administrar al sujeto que padece de, o es susceptible a desarrollar una enfermedad o trastorno asociado con disfundón de ACMSD una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Todavía en otro aspecto, la presente descripción se refiere a un método para reducir el riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con disfundón de a-amino-p-carboximuconato-εsemialdehído decarboxilasa (ACMSD) que comprende administrar al sujeto que padece de, o es susceptible a desarrollar una enfermedad o trastorno asociado con disfundón de ACMSD una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un método para el mejoramiento del riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con disfundón de a-amino-p-carboximuconato-ε35

ΙΜΡΙ sem¡aldehido decarboxilasa (ACMSD) que comprende administrar al sujeto que padece de, o es susceptible a desarrollar una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de ACMSD una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un método de tratamiento de una enfermedad o trastorno en donde la modulación de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺) juega un papel que comprende administrar al sujeto que lo necesita una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un método para prevenir una enfermedad o trastorno en donde la modulación de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺) juega un papel que comprende administrar al sujeto que lo necesita una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un método para reducir el riesgo de una enfermedad o trastorno en donde la modulación de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺) juega un papel que comprende administrar al sujeto que lo necesita una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un método de mejoramiento de una enfermedad o trastorno en donde la modulación de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺) juega un papel que comprende administrar al sujeto que lo necesita una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un método de tratamiento de una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺) que comprende administrar al sujeto que padece de, o es susceptible a desarrollar una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de NAD⁺ una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

La presente descripción se refiere también a un método para prevenir una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺) que comprende administrar al sujeto que padece de, o es susceptible a desarrollar una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de NAD⁺ una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula

ΙΜΡΙ oo g

(III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un método para reducir el riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺) que comprende administrar al sujeto que padece de, o es susceptible a desarrollar una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de NAD⁺ una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un método de mejoramiento de una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺) que comprende administrar al sujeto que padece de, o es susceptible a desarrollar una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de NAD⁺ una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un método de tratamiento de un trastorno asociado con disfunción mitocondrial que comprende administrar al sujeto que padece de, o es susceptible a desarrollar un trastorno metabólico una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En una modalidad, el trastorno asociado con disfunción mitocondrial es una enfermedad mitocondrial hereditaria, un trastorno metabólico común, una enfermedad neurodegenerativa, un trastorno relacionado con el envejecimiento, un trastorno renal o una enfermedad inflamatoria crónica. En una modalidad preferida, el trastorno asociado con disfunción mitocondrial es un trastorno metabólico común, como la obesidad o la diabetes tipo II.

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un método para prevenir un trastorno asociado con disfunción mitocondrial que comprende administrar al sujeto que padece de, o es susceptible a desarrollar un trastorno metabólico una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En una modalidad, el trastorno asociado con disfunción mitocondrial es una enfermedad mitocondrial hereditaria, un trastorno metabólico común, una enfermedad neurodegenerativa, un trastorno relacionado con el envejecimiento, un trastorno renal o una enfermedad inflamatoria crónica. En una modalidad preferida, el trastorno asociado con disfunción mitocondrial es un trastorno metabólico común, como la obesidad o la diabetes tipo IL

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un método para reducir el riesgo de un trastorno asociado con disfunción mitocondrial que comprende administrar al sujeto que padece de, o es susceptible a desarrollar un trastorno metabólico una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula

IMPI (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En una modalidad, el trastorno asociado con disfunción mitocondrial es una enfermedad mitocondrial hereditaria, un trastorno metabólico común, una enfermedad neurodegenerativa, un trastorno relacionado con el envejecimiento, un trastorno renal o una enfermedad inflamatoria crónica. En una modalidad preferida, el trastorno asociado con disfunción mitocondrial es un trastorno metabólico común, como la obesidad o la diabetes tipo II.

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un método de mejoramiento de un trastorno asociado con disfunción mitocondrial que comprende administrar al sujeto que padece de, o es susceptible a desarrollar un trastorno metabólico una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En una modalidad, el trastorno asociado con disfunción mitocondrial es una enfermedad mitocondrial hereditaria, un trastorno metabólico común, una enfermedad neurodegenerativa, un trastorno relacionado con el envejecimiento, un trastorno renal o una enfermedad inflamatoria crónica. En una modalidad preferida, el trastorno asociado con disfunción mitocondrial es un trastorno metabólico común, como la obesidad o la diabetes tipo II.

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un método de promover el metabolismo oxidativo que comprende administrar at sujeto que padece de, o es susceptible a desarrollar un trastorno metabólico una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que aumenta el dinucleótido de nicotinamida adenina intracelular (NAD⁺).

Todavía en otro aspecto, la presente descripción se refiere a un método para la manufactura de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad o condición mediada por ACMSD, en donde el medicamento comprende un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un método para la manufactura de un medicamento para prevenir una enfermedad o condición mediada por ACMSD, en donde el medicamento comprende un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un método para la manufactura de un medicamento para reducir el riesgo de una enfermedad o condición mediada por ACMSD, en donde el medicamento comprende un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Todavía en otro aspecto, la presente descripción se refiere a un método para la manufactura de un medicamento para mejorar una enfermedad o condición mediada por ACMSD, en

IMPI donde el medicamento comprende un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a una composición farmacéutica para uso en un método para el tratamiento de una enfermedad o condición mediada por ACMSD, en donde el medicamento comprende un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (ΙΠ), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a una composición farmacéutica para uso en un método para prevenir una enfermedad o condición mediada por ACMSD, en donde el * medicamento comprende un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a una composición farmacéutica para uso en un método para reducir el riesgo de una enfermedad o condición mediada por ACMSD, en donde el medicamento comprende un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a una composición farmacéutica para uso en un método para mejorar una enfermedad o condición mediada por ACMSD, en donde el medicamento comprende un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Todavía en otro aspecto, la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en un método para el tratamiento de una enfermedad o condición mediada por ACMSD, en donde el compuesto comprende un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en un método para prevenir una enfermedad o condición mediada por ACMSD, en donde el compuesto comprende un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en un método para reducir el riesgo de una enfermedad o condición mediada por ACMSD, en donde el compuesto comprende un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto para uso en un método para mejorar una enfermedad o condición mediada por ACMSD, en donde el compuesto comprende un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (Π), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Otro aspecto de la presente descripción se refiere al uso de un compuesto de

IMPI fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la fabricación de un medicamento para tratar, prevenir o reducir el riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de a-amino-p-carboximuconato-e-semialdehído decarboxilasa (ACMSD).

En otro aspecto, la presente descripción se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la elaboración de un medicamento para el tratamiento del riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de a-amino-p-carboximuconato-e-semialdehído decarboxilasa (ACMSD).

Otro aspecto de la presente descripción se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la elaboración de un medicamento para prevenir una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de a-amino-3-carboximuconato-e-semialdehído decarboxilasa (ACMSD).

En otro aspecto, la presente descripción se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la elaboración de un medicamento para reducirel riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de a-amino-p-carboximuconato-e-semialdehído decarboxilasa (ACMSD).

Otro aspecto de la presente descripción se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la elaboración de un medicamento para mejorar una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de o-amino-p-carboximuconato-c-semialdehído decarboxilasa (ACMSD). *

En otro aspecto, la presente descripción se refiere al uso de un compuesto de un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la fabricación de un medicamento para tratar, prevenir o reducir el riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺).

Otro aspecto de la presente descripción se refiere al uso de un compuesto de un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD’⁺).

En otro aspecto, la presente descripción se refiere al uso de un compuesto de un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal £

ΙΜΡΙ farmacéuticamente aceptable del mismo en la elaboración de un medicamento para prevenir una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de dinucleótido de nicotinamida adenina ♦

(NAD⁺).

Otro aspecto de la presente descripción se refiere al uso de un compuesto de un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la elaboración de un medicamento que reduce el riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺).

En otro aspecto, la presente descripción se refiere al uso de un compuesto de un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la elaboración de un medicamento para mejorar una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺).

Otro aspecto de la presente descripción se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la elaboración de un medicamento para el tratamiento, prevención o reducción del riesgo de un trastorno asociado con disfunción mitocondrial.

En otro aspecto, la presente descripción se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de un trastorno asociado con disfunción mitocondrial.

Otro aspecto de la presente descripción se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la elaboración de un medicamento para prevenir un trastorno asociado con disfunción mitocondrial.

En otro aspecto, la presente descripción se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la elaboración de un medicamento para reducir el riesgo de un trastorno asociado con disfunción mitocondrial.

Otro aspecto de la presente descripción se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la elaboración de un medicamento para mejorar un trastorno asociado con disfunción mitocondrial.

En otro aspecto, la presente descripción se refiere al uso de un compuesto de un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal

IMPI farmacéuticamente aceptable del mismo en la elaboración de un medicamento para promover metabolismo oxidativo.

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso en la elaboración de un medicamento para el tratamiento, prevención o reducción del riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de a-amino-p-carboximuconato-csemialdehído decarboxilasa (ACMSD).

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para usarse en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de a-amino-p-carboximuconato-c-semialdehído decarboxilasa (ACMSD).

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para usarse en la elaboración de un medicamento para prevenir una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de a-amino^-carboximuconato-e-semialdehído decarboxilasa (ACMSD).

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para usarse en la elaboración de un medicamento para reducir el riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de a-amino-p-carboximuconato-e-semialdehído decarboxilasa (ACMSD).

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para usarse en la elaboración de un medicamento para mejorar una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de a-amino-3-carbox¡muconato-e-semialdehído decarboxilasa (ACMSD).

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (ΠΙ), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso como un medicamento para el tratamiento, prevención o reducción del riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺).

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso como un medicamento para el tratamiento de una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺).

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I),

IMPI fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso como un medicamento para prevenir una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺).

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso como un medicamento para reducir el riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺).

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso como un medicamento para mejorar una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺).

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso como un medicamento para el tratamiento, prevención o reducción del riesgo de un trastorno asociado con disfunción mitocondrial.

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso como un medicamento para el tratamiento de un trastorno asociado con disfunción mitocondrial.

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso como un medicamento para prevenir un trastorno asociado con disfundón mitocondrial.

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso como un medicamento para reducir el riesgo de un trastorno asociado con disfunción mitocondrial.

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso como un medicamento para mejorar un trastorno asociado con disfunción mitocondrial.

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso como un medicamento para promover metabolismo oxidativo.

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I),

ΙΜΡΙ fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso en el tratamiento, prevención o reducción del riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺).

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso en el tratamiento de una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺).

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para usarse en la prevención de una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺).

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para usarse en la reducción del riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺).

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para usarse in ameliorating una enfermedad o trastorno asociado con niveles reducidos de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺).

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para usarse para el tratamiento, prevención o reducción del riesgo de un trastorno asociado con disfunción mitocondrial.

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para usarse para el tratamiento de un trastorno asociado con disfunción mitocondrial.

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para usarse para prevenir un trastorno asociado con disfunción mitocondrial.

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para usarse para reducir el riesgo de un trastorno asociado con disfunción mitocondrial.

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del * mismo para usarse para mejorar un trastorno asociado con disfunción mitocondrial.

IMPI σι

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para usarse en promover metabolismo oxidativo.

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a un método de tratamiento, prevención, mejoramiento o reducción del riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de a-amino-p-carboximuconato-£-semialdehído decarboxilasa (ACMSD), que comprende administrar a un sujeto que lo necesite una cantidad terapéuticamente eficaz de compuesto que tiene las siguientes fórmulas:

NC

NH

NH /XXx/CC^H

NC

NH

NC

NH

NH

NC^X

NH xX.^X/^c02^h

NC

NC

NH

NH /ΧχΧ/°0₂Η

Cl

CO₂H

NC

NH

NC

NH

Br

NH

ΒιχΧ

NH /X^X^xC0₂H /X^X^/CO₂H

IMPI

O

Cl

NH

<img file="MX389591B_D0018.tif" />

CO₂H

NH

NC

NC

NC

NH

NH

Cl

NC

NH

NH

CO₂H

N'N NH N

N'Q >=o

N H n^^xs^zW^c°^2H

NC

NC

NH

NH

NH

NC

CO₂H

OH

N

NH

<img file="MX389591B_D0019.tif" />

co₂h

NH

N

<img file="MX389591B_D0020.tif" />

NH O

N

<img file="MX389591B_D0021.tif" />

co₂h

O

NC

NC

NH O

N

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NH

N

<img file="MX389591B_D0023.tif" />

CO₂H

O

NH

N

<img file="MX389591B_D0024.tif" />

O

NC

NC

NH ^N H

<img file="MX389591B_D0025.tif" />

co₂h

NH ^N H

<img file="MX389591B_D0026.tif" />

co₂h

NH ^N H

<img file="MX389591B_D0027.tif" />

ΙΜΡΙ

NC

NC

NH

H

N

NC

NC

NH

NC

<img file="MX389591B_D0028.tif" />

N

NH O

N H

<img file="MX389591B_D0029.tif" />

CO₂H

NH

O

<img file="MX389591B_D0030.tif" />

CO₂H co₂h

<img file="MX389591B_D0031.tif" />

N

NH O

N H

<img file="MX389591B_D0032.tif" />

CO₂H

O

NC

NC

NC

NH

O

N

NH O

N H

<img file="MX389591B_D0033.tif" />

<img file="MX389591B_D0034.tif" />

NH

O

<img file="MX389591B_D0035.tif" />

CO₂H o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En un aspecto adicional, la presente descripción se refiere a un método de tratamiento, prevención, mejoramiento o reducción del riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de a-amino-p-carboximuconato-e-semialdehído decarboxilasa (ACMSD), que comprende administrar a un sujeto que lo necesite una cantidad terapéuticamente eficaz de compuesto que tiene las siguientes fórmulas:

NC

NH

NC

NH í^V^N

NC

Γ NH ^N^S^^V⁰⁰²”

Γ NH

NH

NC

NH ^x_Yx^s_yxCO₂H

NC

NC

NH

NH ίΤ^τ^Ν iAsAA

Cl co₂h

O

ΙΜΡΙ

NC

NH

NC

NH r^T^N

Br

NH í^Y^N

Cl

NH /V^

NH /x^/^/00₂H fr

Br

NH

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NC

NH co₂h

Cl r^V^N

NH

NH

N NH

N

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N°_x it /=0

N H /X/Z^/COjiH

NH

NC

NH rv^N

OH

CO₂H

H

N

IMPI o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Por tanto, la descripción se refiere también a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define aquí, para uso como un medicamento.

Otro aspecto de la presente descripción se refiere al uso de un compuesto que tiene uno de las siguientes fórmulas:

NC

NC

NH

NC

NH

NH

NC

NH

As-V^^C°^2H

NC

NH

NC

NH

NH

NH

Cl

CO₂H

NC

NH

NC

NH n^s/V^⁰⁰²^

NH

NH

Br

Br

IMPI

O

Cl

NH

<img file="MX389591B_D0036.tif" />

CO₂H

AAn

NH

NH

NC

Cl

AAn

NC

NC

NH

NH

NH

A NH N

Ar' AsAA

CO₂H

NH

NQ

Γ z=o

N H

NH

N

<img file="MX389591B_D0037.tif" />

CO₂H

NC

NC

NH

NH

N

<img file="MX389591B_D0038.tif" />

AAn

CO₂H

NH

OH

NC

NC

NH O

N

<img file="MX389591B_D0039.tif" />

NH

N

<img file="MX389591B_D0040.tif" />

CO₂H

NH O

N

<img file="MX389591B_D0041.tif" />

co₂h

O

NH

N

<img file="MX389591B_D0042.tif" />

ΙΜΡΙ g

NC

NC

NH

H

N co₂h

NH

NC

<img file="MX389591B_D0043.tif" />

<img file="MX389591B_D0044.tif" />

N

NH O

N H

<img file="MX389591B_D0045.tif" />

CO₂H

NC

NC

NC

NC

N

NH O

N H

<img file="MX389591B_D0046.tif" />

co₂h

N

NH O

N H

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NH

O

<img file="MX389591B_D0048.tif" />

co₂h

NH

O

NC

<img file="MX389591B_D0049.tif" />

co₂h

NH

O ,0

<img file="MX389591B_D0050.tif" />

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la elaboración de un medicamento para el tratamiento, prevención, mejoramiento o reducción del riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de o-amino-βcarboximuconato-E-semialdehído decarboxilasa (ACMSD).

Otro aspecto de la presente descripción se refiere al uso de un compuesto que tiene uno de las siguientes fórmulas:

NH

NC

NH

NC

NH

NH

NC

NC

NC

NH

NH

NC

NH

NH

O

Cl co₂h

IMPI

NC^X

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Br

NH

NC

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Br

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Cl

NH

NC

NH

NH

NH

NH

Cl /XX/^C02^H χχ/^Η

CO₂H

NH

N-N NH N

N'°_x

Jí, /=0

N H

NC

NH

NH s^/'V^z&lt;;V^co₂h

OH

NH

CO₂H o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la elaboración de un medicamento para el tratamiento, prevención, mejoramiento o reducción del riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de o-amino-β

IMPI carboximuconato-e-semialdehído decarboxilasa (ACMSD).

En otro aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto que tiene una de las siguientes fórmulas:

NC

NH

NC

NH ^Χ^Χ/θθ2Η

NC

NH

NC

NH /\/Χ/^θ2Η

NH

NC

NH ^^XX/^C02^H

NC

NC

NH

NH ^Χχχ^θ^ο2^Η

N^

NC

NH

NH

Cl

NC

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Br

CO₂H /χ/χχχ^θθζΗ ©

NH n^ s-v^^co *^H

Ζ\/χΛθ2Η

Cl

NH

NH n^s^/W^c°^2H r^V^N

X/X/^CO2^H

O

IMPI

O

H

NH

NH

NC

NH

Cl r^V^N

NC

NC

NC

NC

NH

<img file="MX389591B_D0051.tif" />

co₂h

N-N NH N n-Q.

7=o

N H

N

NH

<img file="MX389591B_D0052.tif" />

CO₂H

NH O

N

<img file="MX389591B_D0053.tif" />

NC

NC

NC

NH

NH

NC

NH

N

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NH

N

<img file="MX389591B_D0055.tif" />

O co₂h

NH

NC

NC

CO₂H

OH

NH O

N

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co₂h

O

NH

<img file="MX389591B_D0057.tif" />

O

NC

NH ^N H

NH

<img file="MX389591B_D0058.tif" />

CO₂H

NC

<img file="MX389591B_D0059.tif" />

CO₂H

NH ^N H

NH

<img file="MX389591B_D0060.tif" />

co₂h

NC

NH ^N

H

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<img file="MX389591B_D0062.tif" />

N

NH O

N H

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co₂h

IMPI

NC

NC

NH O

N H

NC

NC

NH

Ό

N

<img file="MX389591B_D0064.tif" />

CO₂H

N

NH O

N H

<img file="MX389591B_D0065.tif" />

NH

Ό

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co₂h

NC

NH

<img file="MX389591B_D0067.tif" />

CO₂H

N

<img file="MX389591B_D0068.tif" />

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para uso como un medicamento para el tratamiento, prevención, mejoramiento o reducción del riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de a-amino-βcarboximuconato-e-semialdehído decarboxilasa (ACMSD).

En otro aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto que tiene una de las siguientes fórmulas:

NC

NH

NC

NH r^V^N

NC

NH

NH

NC

NH

NC

NC

NC

NH ^_s-Y^r^c°^2H

NH

NH

Cl

CO₂H

O

IMPI σι

NC

NH

NC

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AAn

Br

NH

Br

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AAn /\_xx^_xCO₂H z\zX/CO₂H

Cl

NH

NH

AAn s

<img file="MX389591B_D0069.tif" />

co₂h

A/'n

NC

Cl

AAn

NH

NH

NH

NH co₂h

N-N NH N

NQ

1/ ΛΟ

N H

ΝθΥ

NH

NH sAAAo₂H

Ar n

OH

NH

CO₂H /O o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para uso como un medicamento para el tratamiento, prevención, mejoramiento o

O

ΙΜΡΙ reducción del riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de o-amino-βcarboximuconato-c-semialdehído decarboxilasa (ACMSD).

Otro aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto que tiene una de las siguientes fórmulas:

NC

NH

NH ζ\/&lt;χ/θθ₂Η

NC

NC

NH /x_x^^_xCO₂H

NH xX_rX^_Y/^co2H

NC

NC (Γ^Ί ^N^ΝΎ

NC

NH

NH

NH

NC /χ^^/θθ2Η

Cl

NH

NH

CO₂H

NC

NH

N^S'^Y^x^Y^C°^2Et

Br

NH

NH

YV^N^S'^Y^ co

Br

IMPI

O

Cl

O

NH

H

NH

S

O

O

S

N

N

N

H

S s

NH

NC

NH

N

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N

O

N

Cl

NH

N

S

NH s

N

CO₂H

N o

;N

NH N

NH

N

S^'^^^^COzH

S

N'°_x

1&lt; z=o

N H

NC

N

O

NH r^r'N o

NH s

CO₂H

NC

NC

NC

O

O

O

NC

S

N

S

H N

OH

NC

O

O

N

NH

<img file="MX389591B_D0070.tif" />

CO₂H

NH

N

<img file="MX389591B_D0071.tif" />

NH O

N

<img file="MX389591B_D0072.tif" />

co₂h

O

NC o

NC

NH O

N

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NH

N

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co₂h

NH

N

<img file="MX389591B_D0075.tif" />

o o

o

N

NH ^N H

<img file="MX389591B_D0076.tif" />

CO₂H

NC

NC

N

NH

Ή H

<img file="MX389591B_D0077.tif" />

CO₂H

N

NH ^N H

<img file="MX389591B_D0078.tif" />

IMPI

NC

NC

NH

H

N

NC

NC

NH

NC

NH

Ό

<img file="MX389591B_D0079.tif" />

CO₂H

<img file="MX389591B_D0080.tif" />

NH O ^N H

N

<img file="MX389591B_D0081.tif" />

co₂h

N

NH ^N H

<img file="MX389591B_D0082.tif" />

CO₂H

NC

NC

NC

NH

<img file="MX389591B_D0083.tif" />

co₂h

N nh o

N H

<img file="MX389591B_D0084.tif" />

N

<img file="MX389591B_D0085.tif" />

NH

N

<img file="MX389591B_D0086.tif" />

CO₂H o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para usarse en el tratamiento, prevención, mejoramiento o reducción del riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de a-amino-p-carboximuconato-e-semialdehído decarboxilasa (ACMSD).

En otro aspecto de la presente descripción se refiere a un compuesto que tiene una de las siguientes fórmulas:

NC

NH

NC

NH

YYn

NC

NH

ΝΥΛ

NH

NH

NH /\_r^-_v/CO₂H

NC

IMPI

O

NC

NH

NC

NH ΐΡγΝ

NC

Cl co₂h

NH

NC

NH /x^x N^S^V^V⁰⁰²^

Br

Cl &lt;\/X/^C02^H

NH

Br

NH

N^S^>^><^C02H

NH &lt;X^N

<img file="MX389591B_D0087.tif" />

co₂h

NC

NH

NH

NH

NH

CO₂H

NH

N'N NH

N n-Q >o

N H

NH

NH rf^r^N

CO₂H

IMPI

N

NC

N

Cl

NH

OH o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para usarse en el tratamiento, prevención, mejoramiento o reducción del riesgo de una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de a-amino-p-carboximuconato-e-semialdehído decarboxilasa (ACMSD).

Tal como se usa aquí, que trata” o tratar describe el manejo y cuidado de un paciente con el propósito de revertir, inhibir o combatir una enfermedad, condición o trastorno e incluye la administración de un compuesto de la presente descripción (es decir, un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III)), o una sal farmacéuticamente aceptable, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato del mismo, para revertir la enfermedad, condición o trastorno, eliminar la enfermedad, condición o trastorno, o inhibir el procedimiento de la enfermedad, condición o trastorno.

Un compuesto de la presente descripción (es decir, un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III)), o una sal farmacéuticamente aceptable, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato del mismo, también puede usarse para prevenir una enfermedad, condición o trastorno o uno o más síntomas de dicha enfermedad, condición o trastorno. Tal como se usa aquí, que previene o prevenir describe la reducción o eliminación del comienzo de los síntomas o complicaciones de la enfermedad, condición o trastorno.

Un compuesto de la presente descripción (es decir, un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III)), o una sal farmacéuticamente aceptable, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato del mismo, también puede usarse para aliviar uno o más síntomas de tal enfermedad, condición o trastorno. Como se usa aquí, el término aliviar pretende describir un procedimiento mediante el cual se reduce la gravedad de un signo o síntoma de un trastorno. Es importante destacar que un signo o síntoma puede ser aliviado sin ser eliminado. Preferiblemente, el tratamiento es curativo o mejorador.

Métodos para la preparación de compuestos de fórmulas (I), (la), (Ib), (II) v (III) Los compuestos de la presente descripción (por ejemplo, compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II) y fórmula (II)) se pueden preparar de varias maneras bien conocidas por aquellos con experiencia en la técnica de la síntesis orgánica. A modo de ejemplo, los compuestos de la presente descripción se pueden sintetizar utilizando los métodos descritos a

ΙΜΡΙ

Ü1 continuación, junto con métodos sintéticos conocidos en la técnica de la química orgánica sintética, o variaciones de los mismos según se aprecian por aquellos con experiencia en la técnica. Los métodos preferidos incluyen pero no se limitan a aquellos métodos descritos a continuación. Los productos finales de las reacciones descritas aquí pueden aislarse por técnicas convencionales, por ejemplo, por extracción, cristalización, destilación, cromatografía, etc.

Los compuestos de la presente descripción pueden sintetizarse siguiendo las etapas descritas en la Reacción Química General A a E que comprenden diferentes secuencias de los intermedios de montaje la-Ih e Ij-Io. Los materiales de partida están comercialmente disponibles o fabricados por procedimientos conocidos en la literatura publicada o como se ilustra. Los pasos útiles que se pueden usar en las etapas de preparación de los compuestos serán conocidos por una persona con experiencia. El método siguiente se da como un ejemplo pueden preparar los compuestos.

no limitante de cómo se

REACCION QUIMICA GENERAL A

R^c.

NH

Rc

NH

R^d

N H la

Ib

R¹

R^d

N (I)

R¹ en donde R¹, R^c, R^d, y L se definen como la fórmula (I).

La forma general de preparar compuestos de fórmula (I) usando los intermedios la, y Ib se describe en la Reacción Química General A. El acoplamiento de la con Ib usando una base, es decir, carbonato de potasio (K₂CO₃), en un solvente, es decir, acetonitrilo (CH₃CN), opcionaimente a temperatura elevada proporciona el producto deseado de fórmula (I). Las bases que se pueden usar incluyen, pero no se limitan a, carbonato de sodio (Na₂CO₃), carbonato de potasio (K₂CO₃), N,Ndiisopropiletilamina (DIPEA) y trietilamina. Los solventes utilizados en la reacción de acoplamiento pueden ser solventes polares o no polares. Por ejemplo, el solvente puede ser acetonitrilo (CH₃CN), acetona, o dimetilsulfóxido (DMSO).

IMPI

REACCION QUIMICA GENERAL B

Rí

R^c.

NH

R^d

R¹

R^d

R¹

Ic

Id (I) en donde X es un buen grupo saliente, es decir, Cl, Br, -SCH₃, o S(O)₂CH₃, y R_lz R₂, Rc, Rd y p se definen como en la fórmula (I).

Alternativamente, los compuestos de fórmula (I) se pueden preparar utilizando intermedios Ic e Id como se indica en la Reacción Química General B. La aminación del Intermedio Ic con le usando una base, es decir, hidróxido sódico (NaOH), hidróxido de potasio (KOH), etc., en un solvente, es decir metanol (MeOH), etanol (EtOH), agua (H₂O), etc., proporciona compuestos de fórmula (I).

REACCION QUIMICA GENERAL C

HO

R¹

R5

NH

R^d N H le

R^d

R¹

If (I) en donde X es un buen grupo saliente, es decir, Cl, Br, -SCH₃, o S(O)₂CH₃, y Ri, R₂, Rc, R_d y p se definen como en la fórmula (I).

Los compuestos de fórmula (I) también pueden prepararse usando los intermedios le y If, como se describe en la Reacción Química General C. La aminación del intermedio le con If si utiliza una base, es decir, hidróxido sódico (NaOH), hidróxido de potasio (KOH), etc., en un solvente, es decir, metanol (MeOH), etanol (EtOH), agua (H₂O), etc., proporciona compuestos de fórmula (I).

IMPI σι

R¹

O

REACCION QUIMICA GENERAL D _R1^^CN

IX

Ig

Ih

Ij

NH

R¹

HCI NH₂

Rc

NH

OEt

R^d N

R¹

R^d

Ik

Im en donde y R_lz Rc y Rj se definen como en la fórmula (I).

Alternativamente, los compuestos de fórmula (I) también se pueden preparar usando los intermedios Ig, Ih, Ij, Ik y Im como se describe en la Reacción Química General D. La olefinación de la Ig intermedia utilizando d¡etil(cianomet¡l)fosfonato en un opcionalmente a una temperatura una base, es decir, carbonato de potasio (K₂CO₃) y solvente, es decir, tetrahidrofurano (THF), agua (H₂O), elevada proporciona Intermedio Ih. La hidrogenación de Ih utilizando un catalizador metálico, es decir, paladio sobre carbono (Pd/C), dióxido de platino (PtO₂), etc., e hidrógeno (H₂) gas en un solvente, es decir etanol (EtOH) y/o tetrahidrofurano (THF), proporciona el intermedio Ij. El intermedio Ik se obtiene al tratar el intermedio Ij con un ácido, es decir, ácido clorhídrico (HCI) en un solvente, es decir, etanol (EtOH), diclorometano (CH₂CI₂), etc., y luego tratamiento posterior con una base, es decir, amoniaco (NH₃). La delación del intermedio Ik e Im usando una base, es decir, hidróxido de sodio (NaOH), hidróxido de potasio (KOH), etc., en un solvente, es decir, dimetilacetamida (DMA), opcionalmente a temperatura elevada proporciona compuestos de fórmula (I).

REACCION QUIMICA GENERAL E

R^c.

R^c.

R^d

NH₂

Cl

R¹

R^d f NH O

l.A.A

R¹

In lo

H (I) en donde y R_D Rc y Rd se definen como en la fórmula (I). Alternativamente, los compuestos de fórmula (I) se pueden preparar usando intermedios In e lo como se indica en la Reacción Química General D. La acilación de intermedio In con lo usando una base, es decir, hidróxido de sodio (NaOH), hidróxido de potasio (KOH), etc., en

IMPI un solvente, es decir, metanol (MeOH), etanol (EtOH), agua (H₂O), etc., proporciona compuestos de fórmula (I).

Una mezcla de enantiómeros, diastereómeros, isómeros cis/trans resultantes del procedimiento descrito anteriormente se puede separar en sus componentes individuales mediante una técnica de sal quiral, cromatografía usando fase normal, fase inversa o columna quiral, dependiendo de la naturaleza de la separación.

Debe entenderse que en la descripción y fórmula mostradas anteriormente, los varios grupos R¹, R², X, L, Y, R^a, R^b, R^c, R^d, R^e, R^f, R^x, R^y, R^z, m, n, p, q, r y otras variables son como se definen en el presente documento, excepto cuando se indique lo contrario. Además, para fines sintéticos, los compuestos de las reacciones químicas generales A-E son meramente representativos con radicales elegidos para ¡lustrar la metodología sintética general de los compuestos de fórmula (I) como se definen aquí.

Ensayos Biológicos v Estudios de Animales

Método de selección de la inhibición de ACMSD 1

La actividad de los compuestos como inhibidores de ACMSD1 se determina en un ensayo espectrofotométrico in vitro. La mezcla de pre-ensayo se incuba y un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y solución de ACMSD1 entonces se añaden. El efecto de la concentración de ACMS sobre la actividad de la enzima se investiga variando la concentración de ácido 3-hidroxiantranílico (3OHHA) en la mezcla de pre-ensayo. Los parámetros cinéticos se calculan a partir de los datos de velocidad iniciales usando una gráfica Lineweaver-Burk.

Métodos de ensayo celular

Las líneas celulares de hepatocitos de ratón se cultivan y se cubren. Las células se mantienen en cultivo a 37°C y una vez que las células están unidas, diferentes concentraciones de un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II) o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o DMSO se añaden. Los hepatocitos primarios se cosechan aproximadamente 24 horas más tarde.

Determinación de la modulación de ACMSD-1 en células ΗΕΚ293Τ

Se sembraron células HEK293T y se transfectaron para expresar transitoriamente

ACMSD. Las células se estimulan entonces con diferentes concentraciones de compuesto 1 y luego se lisan para medir la actividad de ACMSD en un ensayo espectrofotométrico in vitro. La cantidad de

ΙΜΡΙ todo el contenido de proteína en lisados celulares se detecta mediante análisis Bradford y se utiliza para obtener la actividad de especificidad de la enzima normalizada en todas las muestras.

Determinación del contenido de NAD⁺ en hepatocitos primarios humanos

Los hepatocitos primarios se tratan con diferentes concentraciones de un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, o MEHP (control) después de la siembra El compuesto se reemplaza cada 24 horas y, a continuación, las células se recogen directamente y se lisan para detectar el contenido de NAD⁺ a través de LC EM/EM (espectrometría de masas de cromatografía líquida/espectroscopía de masas).

Modulación de ¡a actividad SOD2 en células AML12 v hepatocitos primarios murinos

Los hepatocitos primarios o las células AML-12 se lisan y la concentración de proteína total se determina usando el ensayo de Bradford. La actividad SOD2 se determina a los tiempos indicados después del tratamiento con un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, usando un equipo de ensayo SOD. La absorbancia se determina y los resultados se expresan en U/ml/mg de proteína de acuerdo con la curva estándar y la concentración de proteína medida.

Determinación de! contenido de NAD⁺ en hepatocitos primarios de murino

El NAD⁺ se extrae utilizando un método de extracción ácida y las muestras se recogen y homogeneizan. Después de formar pellas las partes de proteína insolubles, las muestras se separan por cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC) y se analizan por espectrometría de masas. Las proteínas en la pella se cuantifican por ensayo de Bradford y se utilizan para la normalización.

Preparación de ARN v análisis de RT-gPCR de genes regulados con ACMSD y SIRT1 en células

Las células (AML-12, Hepa-1,6, HEK-293, hepatocitos humanos primarios y de murino) se tratan con diferentes concentraciones de un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (Π) o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y la expresión génica de ACMSD, Pgcla, Sodl y Sod2 (MnSOD) se determina usando RT-qPCR. El ARN total se extrae de las células y el ARN extraído se trata con DNasa y se utiliza para la transcripción inversa (RT).

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Modulación de la actividad Caspasa 3/7 en células MDCK

Las células MDCK se cultivan en medio de base hasta una concentración final del 10%. Las células se sembraron en placas en 96 pozos y 24 horas después del recubrimiento celular el medio se cambió con medio fresco suplementado con FBS al 1%. El cisplatino se utiliza entonces para inducir la lesión celular. Diferentes concentraciones de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una de sus sales farmacéuticamente aceptables (en DMSO) se añaden en combinación con cisplatino o antes de añadir cisplatino. La actividad de Caspase 3/7 (Promega) se determina de acuerdo con procedimientos estándar usando una lectura de señal luminiscente en un lector de placas. Cada experimento/condición se realiza por triplicado. La actividad de la caspasa se analiza como un efecto porcentual normalizado para el cisplatino solo y las células tratadas con vehículo.

Citotoxicidad v selección de hERG

Se sembraron las células HePG2 y AML-12 y se realizó una dosis-respuesta del compuesto a varias concentraciones. Las células se estimulan y el sobrenadante se utiliza para realizar la liberación de LDH como medida de necrosis mientras que las células se lisan para detectar niveles de ATP para determinar la viabilidad celular.

El kit de ensayo de hERG de Predictor se transfecta establemente con el canal de potasio de hERG y un ligando de canal de hERG fluorescente rojo de alta afinidad y se usa para la determinación de la unión de afinidad por canal hERG de compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Los compuestos que se unen a la proteína del canal hERG (competidores) se identifican por su capacidad para desplazar el trazador lo que da como resultado una polarización de fluorescencia más baja.

Experimentos C.elegans - Siienciamiento ACMSD1, ensayos de vida útil, evaluación de la movilidad y cuantifícación de GFP

Siienciamiento de ACMSD1: Los experimentos de ARNi de alimentación bacteriana R para determinar los efectos de la sub-regulación o siienciamiento de acmsd-1 sobre la expresión génica y la supervivencia se llevan a cabo en el nematodo Caenorhabditis elegans (C. elegans). Los clones utilizados para los experimentos de alimentación bacteriana son acmsd-1, SIR-2.1 y DAF-16. El ARN total se extrae de las células y el ARN extraído se trata con DNasa, y se utiliza para la transcripción inversa (RT).

Los gusanos se cultivan en placas de agar NGM que contienen adicionalmente Carbenicilina e IPTG y sembradas con cultivos bacterianos. Después del tratamiento con ARNi, los gusanos se transfieren a placas que contienen paraquat y se siembran con bacterias de ARNi. Los

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Ü1 animales de control se cultivan en bacterias de ARNi que contienen un vector vacío (control) y luego se transfieren a placas que contienen paraquat y se siembran con bacterias de ARNi. La cuantificación de la expresión génica de sod-3 a los niveles de ARNm y niveles de proteína utilizando RT-qPCR y análisis de supervivencia se realizan. El movimiento de los gusanos se registra en los días 1, 3 y 5 de la edad adulta.

Estudios de efectos antidiabéticos en ratones C57BL/6J y KK-Av

Los ratones se alimentan con alimento comercial regular o una dieta alta en grasa (HFD). Un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se dosifica y se recolectan sangre y tejidos para el aislamiento de ARN, mediciones e histología de lípido. Se mide el consumo de oxígeno y se realizan análisis histológicos y microscopía electrónica de transmisión. Una prueba oral de tolerancia a la glucosa y una prueba de tolerancia a la insulina intraperitoneal también se realizan para cuantificar la glucosa y medir las concentraciones de insulina en plasma.

Estudios antidiabéticos y anti-obesidad en ratones db/db con mutación LepR

Los animales son alimentados con una dieta rica en grasa (HFD). Para la intervención subcrónica, los animales se tratan una vez ai día con un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, durante 14 días. Se recogen muestras de sangre y se determinan las concentraciones de glucosa de cada muestra de sangre. Para la intervención aguda, se recogen muestras de sangre iniciales y luego se administran los compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Luego se restringe el acceso a la dieta, y se recoge una segunda muestra de sangre. Los ratones se someten a una prueba oral de tolerancia a la glucosa y se determinan las concentraciones de glucosa en sangre.

Para el ensayo de pinzas euglicémico-hiperinsulinémicas, los animales reciben una infusión de [3-3H]glucosa con cebado continuo y luego se recoge una muestra de sangre para determinar las concentraciones de insulina en plasma, glucosa y [3-3H] glucosa y para calcular las tasas de apariencia de glucosa endógena basal. Los ratones reciben entonces vehículo o un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, por sonda. Posteriormente, los animales reciben una infusión de [3-3H] glucosa que contiene insulina, causando un aumento neto moderado en las concentraciones de insulina en plasma. Las concentraciones de glucosa en sangre se miden y la glicemia objetivo se establece ajustando la tasa de infusión de glucosa. 2-deoxi-D-[l-14C]glucosa se administra por vía intravenosa y se recogen muestras de sangre. Los ratones entonces se sacrifican.

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Se recolecta el músculo gastrocnemio y tejido adiposo epididimario y se determina la [₃H] y [₁₄C]radioactividad de plasma en plasma desproteinizado.

Se evalúan los pesos corporales y se disecan y pesan el tejido adiposo marrón (BAT) y el tejido adiposo blanco gonadal (WAT). El volumen de oxígeno (VO₂) y la producción de dióxido de carbono en volumen (VCO₂) se miden y se reportan como VO₂ promedio por hora normalizado al peso corporal (ml/h/kg). Se miden simultáneamente los conteos de actividad por interrupciones del haz infrarrojo y la ingesta de alimentos.

Estudios de enfermedad hepática grasa no alcohólica (NAFLD) y esteatohepatitis no alcohólica (NASH) en ratones C57BL/6J machos

Los ratones son alimentados con una dieta HF-HSD occidental (dieta de alto contenido de grasa-alto en sacarosa) o dieta normal de alimento comercial (NCD) como control. Los animales se tratan a continuación con un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, durante 4, 12 o 20 semanas, y luego se sacrifican. El peso corporal y la ingesta de alimento se controlan semanalmente y se analiza la masa de grasa total. También se realiza una prueba de tolerancia a la glucosa intraperitoneal (IPGTT) y se miden los niveles de glucosa en la vena de la cola después de la administración de glucosa. La resistencia a la insulina se calcula utilizando el modelo Homeostasis de resistencia a la insulina. Los ratones se sacrifican después mediante muestreo de sangre mediante punción cardiaca. Se obtiene plasma y se recogen los tejidos junto con el plasma para análisis bioquímicos y moleculares adicionales o para análisis histológico.

Estudios de enfermedad hepática de grasa no alcohólica (NAFLD) / esteatohepatitis no alcohólica (NASH) en ratones deficientes de metionina y colina

Los ratones que pesan 25 g se alimentan con una dieta deficiente en metionina y colina (MCD para inducir la NASH) o dieta de alimento comercial (como control). Los experimentos con animales y la evaluación de NAFLD y NASH se llevan a cabo como se ha descrito anteriormente para ratones C57BL/6J alimentados con la dieta con alto contenido de grasa y alto en sacarosa.

Estudios de aterosderosis en ratones knockout LDL-R alimentados con alto colesterol Los ratones knockout de LDL-R (KO) se sacrifican aproximadamente 12 semanas después del inicio de la dieta aterogénica, después de lo cual el corazón y la aorta se perfunden con PBS y posteriormente se fijan. Los parámetros de aterosderosis y bioquímica se miden con los kits apropiados comercialmente disponibles. Para el estudio de lipopolisacárido in vivo (LPS), los ratones se inyectan intraperitonealmente con LPS, y se extrae sangre de la vena de la cola. Los niveles de

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TNFa se cuantifican con un ensayo ELISA de TNFo de ratón. Se determinan los conteos de células sanguíneas.

Estudios de enfermedades mitocondríales heredadas en ratones Seo?⁰⁷®

Los compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III) se disuelven en agua y se añaden a una dieta en polvo estándar a la concentración apropiada. El suministro de la dieta se cambia cada tres días y se administra ad libitum durante un mes. Los tejidos se recogen para el análisis histológico. Para las muestras de cuádriceps muscular, se mide la actividad espectrofotométrica de cl, di, cIII y cIV, así como CS. NAD⁺ se extrae de los tejidos utilizando métodos de extracción ácida y alcalina, respectivamente, y se analiza con espectrometría de masas.

Estudios de la enfermedad mitocondria! heredada en ratones Deietor

Los ratones machos Deietor y WT se administran ya sea con dieta de alimento comercial (CD) o un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II) o fórmula (III) mezclada con el CD. Los ratones son controlados regularmente por el peso, el consumo de alimentos, y la resistencia física y su capacidad de ejercido se mide. El consumo de oxígeno y la producción de dióxido de carbono, así como las actividades espontáneas de movimiento y alimentación se registran. Las secciones de tejido se recogen y se preparan a partir de cuádriceps, hígado y BAT. Las secciones congeladas de cuádriceps se ensayan para actividades de deshidrogenasa de succinato (SDH) y COX histoquímico in situ, el contenido de cristales tanto en BAT como en músculo se determina a partir de micrografías electrónicas y se analizan muestras de músculo esquelético para determinar la actividad citrato sintasa.

Estudios de enfermedades renales

Los ratones C57BL/6J WT se alimentan con una dieta comercial estándar y se dividen en cuatro grupos: control; cisplatino; un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y cisplatino; y un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, solo.

sacrifican los ratones y se recogen muestras de tejido y suero. Se miden los niveles de creatinina sérica y BUN y se cuantifican las citoquinas proinflamatorias TNF-α, IL-lb e IL-6 del suero u homogenados del tejido renal. Los riñones de ratón se recogen y se tiñen para análisis. El daño tubular es examinado y anotado en base al porcentaje de necrosis tubular cortical. La infiltración de neutrófilos se evalúa cuantitativamente en tejidos teñidos contando el número de neutrófilos por campo de alta potencia.

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Alternativamente, los ratones C57BL/6J WT se numeran y se mantienen en aclimatación durante un periodo y luego se asignan al azar a diferentes grupos de tratamiento basado en su peso corporal. Los diferentes grupos se mantienen en una dieta específica durante un período de tiempo. Se toman mediciones de peso corporal y se evalúa el consumo de alimentos. La sangre se recoge mediante punción retro-orbital bajo anestesia leve y se utiliza para el análisis de los niveles de nitrógeno de urea en sangre (BUN).

Los ratones se anestesian y se colocan en una plataforma quirúrgica. Ambos riñones se exponen a través de incisiones y los pedículos renales se ocluyen utilizando pinzas vasculares. La pinza entonces se retira y el sitio quirúrgico se sutura. El grupo operado simuladamente se somete a procedimientos quirúrgicos similares, excepto que no se aplica la pinza de oclusión. Los animales son monitoreados hasta la recuperación de la anestesia y devueltos a su jaula de origen. Los animales se observan todos los días para los signos y síntomas clínicos generales y la mortalidad.

Un día antes de la terminación, los animales se alojan individualmente en jaulas metabólicas y se recoge orina para la estimación de urea, creatinina, sodio y potasio. La sangre también se recoge mediante punción retro orbital bajo anestesia leve y plasma se utiliza para el análisis de los niveles de nitrógeno de urea en sangre (BUN) y la creatinina sérica. Los animales entonces se asesinan sin dolor y se recogen los órganos. Un riñón es fijo y el otro es congelado instantáneamente y se utiliza para la estimación de la peroxidación de lípido, niveles de GSH, MPO y SOD.

Estudios de lesiones renales agudas inducidas por isauemia/reperfusión

Los ratones CD-I (ICR) se tratan con un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, por sonda oral una vez por día. Los ratones CD-I se dividen en cuatro grupos: (1) ratones jóvenes con lesión simulada; (2) ratones jóvenes con lesión isquémica/reperfusión (I/R); (3) ratones adultos con lesión simulada; y (4) ratones adultos con lesión de I/R. Se seleccionan al azar 27 ratones adultos adicionales en dos grupos: ratones que reciben un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, y ratones que reciben el vehículo como un control. Se mide el nivel de creatinina sérica y se registran las mediciones de BUN. Luego se evalúa el tejido renal y se anota la lesión tubular.

Determinación de ios efectos sobre los niveles de fosforilación de FoxOl

Las células AML-12 se tratan con diferentes concentraciones de un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Las células se lisan a continuación, y se analizan mediante SDS-PAGE/western

IMPI blot. El bloqueo y las incubaciones de anticuerpos se realizan entonces y cada proteína presente se detecta con su anticuerpo específico.

Efecto inhibidor

La presente descripción también se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define aquí, en un método para inhibir la actividad de ACMSD. El método incluye poner en contacto una célula con un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En una modalidad relacionada, el método proporciona además que el compuesto esté presente en una cantidad efectiva para producir una concentración suficiente para inhibir selectivamente la ACMSD en la célula.

Por lo tanto, preferiblemente en un ensayo para la inhibición de ACMSD {es decir, un ensayo de ACMSD descrito aquí, por ejemplo, el ejemplo 29, o un ensayo de ACMSD conocido en la literatura), los compuestos preferidos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, son compuestos capaces de reducir o preferiblemente inhibir ACMSD y aumentar los niveles de NAD⁺ y/o activación de SIRT y los objetivos corrientes abajo de SIRT, tales como PGC-lo, FoxOl y/o SOD. Preferiblemente, dicha inhibición se determina como IC₅₀ de dicho compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III) con respecto a dicho ensayo de inhibición de ACMSD. Los compuestos preferidos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, tienen una IC₅₀ igual o inferior a 1 pM, más preferiblemente menor que 300 nM, por ejemplo menor que 100 nM, tal como menor que 50 nM con respecto a la inhibición de ACMSD.

Sales farmacéuticamente aceptables

El compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III) puede proporcionarse en cualquier forma adecuada para la administración prevista, en particular que incluyen sales, solvatos y profármacos farmacéuticamente aceptables del compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III).

Las sales farmacéuticamente aceptables se refieren a sales de los compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III) que se consideran aceptables para uso clínico y/o veterinario. Las sales farmacéuticamente aceptables típicas incluyen aquellas sales preparadas por reacción de los compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III) y un ácido mineral u orgánico o una base orgánica o inorgánica. Dichas sales se conocen como sales de adición ácida y sales de adición básica, respectivamente. Se reconocerá que

IMPI el contraión particular que forma una parte de cualquier sal no es de naturaleza crítica, siempre y cuando la sal en su conjunto sea farmacéuticamente aceptable y mientras el contraión no aporte cualidades no deseadas a la sal como un todo.

Estas sales pueden prepararse por métodos conocidos por la persona con experiencia en la materia. Las sales farmacéuticamente aceptables son, por ejemplo, las descritas y discutidas en Remington's Pharmaceutical Sciences, 17. Ed. Alfonso R. Gennaro (Ed.), Mack Publishing Company, Easton, PA, E.U.A., 1985 y ediciones más recientes y en Encyclopedia of Pharmaceutical Technology.

Los ejemplos de sales de adición farmacéuticamente aceptables incluyen sales de adición ácida formadas con ácidos inorgánicos, por ejemplo, ácido clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, nítrico, iodhídrico, metafosfórico o fosfórico; y ácidos orgánicos, por ejemplo, ácido succínico, maleico, acético, fumárico, cítrico, tartárico, benzoico, trifluoroacético, málico, láctico, fórmico, propiónico, glicólico, glucónico, canforsulfúrico, isotónico, mucico, gentisico, isonicotínico, sacárico, glucurónico, furoico, glutámico, ascórbico, antranílico, salicílico, fenilacético, mandélico, embónico (pamoico), etanosulfónico, pantoténico, esteárico, sulfinílico, alginico y galacturónico; y arilsulfónico, por ejemplo ácido bencenosulfónico, p-toluenosulfónico, metanosulfónico o naftalenosulfónico; y sales de adición básica formadas con metales alcalinos y metales alcalinotérreos y bases orgánicas tales como Ν,Ν-dibenciletilendiamina, cloroprocaína, colina, dietanolamina, etilendiamina, meglumina (N-metilglucamina), lisina y procaína; y sales formadas internamente. Debe entenderse que todas las referencias a sales farmacéuticamente aceptables incluyen formas de adición de solvente (solvatos) o formas cristalinas (polimorfos) como se definen aquí, de la misma sal.

El compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede proporcionarse en formas disolubles o indisocibles junto con un solvente farmacéuticamente aceptable tal como agua, etanol, y similares. Las formas disueltas también pueden incluir formas hidratadas tales como monohidrato, dihidrato, hemihidrato, trihidrato, tetrahidrato y similares.

El compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede proporcionarse como un profármaco. El término profármaco utilizado en el presente documento pretende significar un compuesto que tras la exposición a ciertas condiciones fisiológicas - liberará el compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II) o fórmula III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que entonces será capaz de exhibir la acción biológica deseada. Un ejemplo típico es un carbamato lábil de una amina.

Dado que se conoce que los profármacos incrementan numerosas cualidades deseables de farmacéuticos (por ejemplo, solubilidad, biodisponibilidad, fabricación, etc.), los compuestos de la presente descripción pueden administrarse en forma de profármaco. Por lo tanto,

IMPI la presente descripción está destinada a cubrir los profármacos de los compuestos actualmente reivindicados, métodos para suministrarlos y composiciones que los contienen. Profármacos se destina a incluir cualquiera de los portadores unidos covalentemente que libere un fármaco de origen activo de la presente descripción in vivo cuando dicho profármaco se administra a un sujeto. Los profármacos en la presente descripción se preparan al modificar los grupos funcionales presentes en el compuesto de tal manera que las modificaciones se escinden, ya sea en manipulación de rutina o in vivo, en el compuesto original. Los profármacos incluyen compuestos de la presente descripción en donde un grupo hidroxi, amino, sulfhidrilo, carboxi o carbonilo está unido a cualquier grupo que puede escindirse in vivo para formar un grupo hidroxilo libre, amino libre, sulfhidrilo libre, carboxi libre o carbonilo libre, respectivamente.

Los ejemplos de profármacos incluyen, pero no se limitan a, ésteres (por ejemplo acetato, dialquilaminoacetatos, formiatos, fosfatos, sulfates y derivados de benzoato) y carbamatos (por ejemplo, Ν,Ν-dimetilaminocarbonilo) de grupos funcionales hidroxi, ésteres (por ejemplo, ésteres de alquilo Ci-₆, por ejemplo, ésteres de metilo, ésteres de etilo, ésteres de 2-propilo, ésteres de fenilo, ésteres de 2-aminoetilo, ésteres de morfolinoetanol, etc.) de grupos funcionales carboxilo, derivados N-acilo (por ejemplo, N-acetil) bases de N-mannich, bases de Schiff y enaminonas de grupos funcionales amino, oximas, acétales, cetales y enol ésteres de grupos funcionales de cetona y aldehido en compuestos de la descripción, y lo similar. Ver Bundegaard, H., Design ofProdrugs, pl92, Elesevier, New York-Oxford (1985).

Los compuestos, o sus sales, ésteres o profármacos farmacéuticamente aceptables, se administran oralmente, nasalmente, transdérmicamente, pulmonarmente, inhalatoriamente, bucalmente, sublingualmente, intraperitonealmente, subcutáneamente, i ntram uscu la rmente, intravenosamente, rectalmente, intra pleural mente, intratecalmente y parenteralmente. En una modalidad, el compuesto se administra oralmente. Un experto en la técnica reconocerá las ventajas de ciertas vías de administración.

El régimen de dosificación que utiliza los compuestos se selecciona de acuerdo con una variedad de factores que incluyen tipo, especie, edad, peso, sexo y condición médica del paciente; la gravedad de la afección a tratar; la vía de administración; la función renal y hepática del paciente; y el compuesto particular o sal de la misma empleado. Un médico o veterinario ordinariamente experto puede determinar y prescribir fácilmente la cantidad eficaz del fármaco requerida para prevenir, contrarrestar o detener el progreso de la condición.

Las técnicas para la formulación y administración de los compuestos descritos de la descripción se pueden encontrar en Remington: the Science y Practice of Pharmacy, 19^a edition, Mack Publishing Co., Easton, PA (1995). En una modalidad, los compuestos descritos en la presente descripción, y sus sales farmacéuticamente aceptables, se usan en preparaciones farmacéuticas en £

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IMPI

INSTITUTO MEXICANO DE LA PROPIEDAD INDUSTRIAL combinación con un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable. Los vehículos farmacéuticamente aceptables adecuados incluyen cargas o diluyentes sólidos inertes y soluciones acuosas u orgánicas estériles. Los compuestos estarán presentes en tales composiciones farmacéuticas en cantidades suficientes para proporcionar la cantidad de dosificación deseada en el intervalo aquí descrito.

En un aspecto de esta descripción, se proporciona una composición farmacéutica que comprende, como ingrediente activo, al menos un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define aquí, y opcionalmente uno o más excipientes, diluyentes y/o vehículos farmacéuticamente aceptables. Los compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, se pueden administrar solos o en combinación con vehículos, diluyentes o excipientes, en dosis únicas o múltiples. Los portadores, diluyentes y excipientes farmacéuticamente aceptables adecuados incluyen diluyentes sólidos inertes o rellenos, soluciones acuosas estériles y varios solventes orgánicos.

Una composición farmacéutica es una formulación que contiene los compuestos de la presente descripción en una forma adecuada para la administración a un sujeto. Las composiciones farmacéuticas pueden formularse con portadores o diluyentes farmacéuticamente aceptables así como cualesquiera otros adyuvantes y excipientes conocidos de acuerdo con técnicas convencionales tales como las descritas en Remington: The Science y Practice of Pharmacy, 21a Edición, 2000, Lippincott Williams &amp; Wilkins.

Como se usa aquí, la frase farmacéuticamente aceptable se refiere a aquellos compuestos, materiales, composiciones, portadores y/o formas de dosificación que son, dentro del alcance de un juicio médico acertado, adecuados para su uso en contacto con tejidos de seres humanos y animales sin toxicidad excesiva, irritación, respuesta alérgica u otro problema o complicación, en consonancia con una razonable relación beneficio/riesgo.

Excipiente farmacéuticamente aceptable significa un excipiente que es útil en la preparación de una composición farmacéutica que es generalmente segura, no tóxica y ni biológicamente ni de otro modo indeseable, e incluye excipiente que es aceptable para uso veterinario así como uso farmacéutico humano. Un excipiente farmacéuticamente aceptable tal como se utiliza en la descripción descriptiva y en las reivindicaciones incluye tanto uno como más de uno de tales excipientes.

Las composiciones farmacéuticas formadas por combinación de un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define aquí, con portadores, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables se pueden administrar fácilmente en una variedad de formas de

ΙΜΡΙ g

dosificación tales como tabletas, polvos, pastillas, jarabes, supositorios, soluciones inyectables y similares. En los polvos, el portador es un sólido finamente dividido tal como talco o almidón que está en una mezcla con el componente activo finamente dividido. En tabletas, el componente activo se mezcla con el portador que tiene las propiedades de unión necesarias en proporciones adecuadas y se compacta en la forma y tamaño deseados.

Las composiciones farmacéuticas pueden prepararse específicamente para la administración por cualquier vía adecuada tal como la ruta oral y parenteral (incluyendo subcutánea, intramuscular, intratecal, intravenosa e intradérmica). Se apreciará que la ruta preferida dependerá de la condición general y de la edad del sujeto a tratarse, de la naturaleza de la condición a tratarse y del ingrediente activo elegido.

Las composiciones farmacéuticas para administración oral incluyen formas de dosificación sólidas tales como cápsulas, tabletas, grageas, píldoras, pastillas, polvos y gránulos. Cuando sea apropiado, se pueden preparar con recubrimientos tales como recubrimientos entéricos o pueden prepararse de manera que proporcionen una liberación controlada del ingrediente activo tal como liberación sostenida o prolongada de acuerdo con métodos bien conocidos en la técnica.

Para la administración oral en forma de una tableta o cápsula, un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, tal como se define aquí, puede ser combinado adecuadamente con un portador farmacéuticamente aceptable, oral, tal como etanol, glicerol, agua o lo similar. Además, se pueden añadir a la mezcla aglutinantes, lubricantes, agentes desintegrantes, agentes aromatizantes y colorantes adecuados, según sea apropiado. Los aglutinantes adecuados incluyen, por ejemplo, lactosa, glucosa, almidón, gelatina, goma de acacia, goma de tragacanto, alginato de sodio, carboximetilcelulosa, polietilenglicol, ceras o lo similar. Los lubricantes incluyen, por ejemplo, oleato de sodio, estearato de sodio, estearato de magnesio, benzoato de sodio, acetato de sodio, cloruro de sodio o lo similar. Los agentes desintegrantes incluyen, por ejemplo, almidón, metilcelulosa, agar, bentonita, goma de xantano, glicolato de almidón sódico, crospovidona, croscarmelosa sódica, o lo similar. Los excipientes adicionales para cápsulas incluyen macrogeles o lípidos.

Para la preparación de composiciones sólidas tales como tabletas, el compuesto activo de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se mezcla con uno o más excipientes, tales como los descritos anteriormente, y otros diluyentes farmacéuticos tales como agua para preparar una composición de pre-formulación sólida que contiene una mezcla homogénea de un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. El término homogéneo se entiende que significa que el compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente w

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aceptable del mismo, se dispersa uniformemente a lo largo de la composición de manera que la composición se puede subdividir fácilmente en formas de dosificación unitaria igualmente efectivas tales como tabletas o cápsulas.

Las composiciones líquidas para la administración oral o parenteral del compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente

I aceptable del mismo, incluyen, por ejemplo, soluciones acuosas, jarabes, elixires, suspensiones acuosas u oleosas y emulsiones con aceites comestibles tales como aceite de semilla de algodón, aceite de sésamo, aceite de coco o aceite de cacahuete. Los agentes de dispersión o suspensión adecuados para suspensiones acuosas incluyen gomas sintéticas o naturales tales como tragacanto, alginato, acacia, dextrano, carboximetilcelulosa de sodio, gelatina, metilcelulosa o polivinilpirrolidona.

Las composiciones farmacéuticas para administración parenteral incluyen soluciones inyectables no acuosas y acuosas estériles, dispersiones, suspensiones o emulsiones, así como polvos estériles que se reconstituyen en soluciones o dispersiones inyectables estériles antes del uso.

Para la administración intravenosa, los portadores adecuados incluyen solución salina fisiológica, agua bacteriostática, Cremophor EL™ (BASF, Parsippany, NJ.) o solución salina amortiguada con fosfato (PBS). En todos los casos, la composición debe ser estéril y debe ser fluida en la medida en que exista una fácil jeringabilidad. Debe ser estable bajo las condiciones de fabricación y almacenamiento y debe estar preservado contra la acción contaminante de microorganismos tales como bacterias y hongos. El vehículo puede ser un solvente o medio de dispersión que contiene, por ejemplo, agua, etanol, poliol (por ejemplo, glicerol, propilenglicol y polietilenglicol líquido y similares), y mezclas adecuadas de los mismos. La fluidez apropiada puede mantenerse, por ejemplo, usando un recubrimiento tal como lecitina, manteniendo el tamaño de la partícula requerido en el caso de dispersión, y usando agentes tensoactivos. La prevención de la acción de los microorganismos puede conseguirse por medio de diversos agentes a nti bacteria nos y antifúngicos, por ejemplo, parabenos, clorobutanol, fenol, ácido ascórbico, timerosal, y similares. En muchos casos, será preferible incluir agentes ¡sotónicos, por ejemplo, azúcares, polialcoholes tales como manitol, sorbitol, y cloruro sódico en la composición. La absorción prolongada de las composiciones inyectables puede llevarse a cabo incluyendo en la composición un agente que retrasa la absorción, por ejemplo, monoestearato de aluminio y gelatina.

La preparación de todas estas soluciones bajo condiciones estériles se realiza fácilmente mediante técnicas farmacéuticas estándar bien conocidas por aquellos con experiencia en la técnica.

Por ejemplo, se pueden preparar soluciones inyectables estériles al incorporar el compuesto activo en la cantidad requerida en un solvente apropiado con una o una combinación de ingredientes enumerados anteriormente, según se requiera, seguido de esterilización por filtración.

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Generalmente, las dispersiones se preparan al incorporar el compuesto activo en un vehículo estéril que contiene un medio de dispersión básico y los otros ingredientes requeridos de los enumerados anteriormente. En el caso de polvos estériles para la preparación de soluciones inyectables estériles, los métodos de preparación son secado al vacío y secado por congelación que produce un polvo del ingrediente activo más cualquier ingrediente adicional deseado a partir de una solución filtrada previamente estéril del mismo. También se contemplan composiciones inyectables de depósito que están dentro del alcance de la presente descripción.

Para la administración parenteral, las soluciones que contienen un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en aceite de sésamo o de cacahuete, propilenglicol acuoso, o en solución acuosa estéril se puede emplear. Dichas soluciones acuosas se deben regular de pH adecuadamente si es necesario y el diluyante líquido se hace primero isotónico con suficiente salina o glucosa. Estas soluciones acuosas particulares son especialmente adecuadas para la administración intravenosa, intramuscular, subcutánea e intraperitoneal. Las soluciones oleosas son adecuadas para fines de inyección intra-articular, intramuscular y subcutánea.

Además de los ingredientes mencionados anteriormente, las composiciones de un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, pueden incluir uno o más más ingredientes adicionales tales como diluyentes, reguladores de pH, agentes aromatizantes, colorantes, agentes de superficie activa, espesantes, conservantes, por ejemplo, hidroxibenzoato de metilo (incluyendo antioxidantes), agentes emulsionantes y lo similar.

El término cantidad terapéuticamente efectiva, tal como se utiliza aquí, se refiere a una cantidad de un agente farmacéutico para tratar, mejorar o prevenir una enfermedad, trastorno o condición identificados, o para exhibir un efecto terapéutico o inhibidor detectable. El efecto se puede detectar mediante cualquier procedimiento de ensayo conocido en la técnica. La cantidad eficaz precisa para un sujeto dependerá del sujeto peso corporal, el tamaño y la salud; la naturaleza y extensión de la condición; y la terapéutica o combinación de terapéutica seleccionada para la administración. Cantidades terapéuticamente eficaces para una situación dada puede determinarse mediante experimentación de rutina que está dentro de la habilidad y juicio del médico. En un aspecto preferido, la enfermedad o trastorno a ser tratado es una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de a-amino-3-carboximuconato-e-semialdehído desearboxilasa (ACMSD).

Para cualquier compuesto, la cantidad terapéuticamente efectiva puede estimarse inicialmente en ensayos de cultivo celular, por ejemplo, en células, o en modelos animales, usualmente ratas, ratones, conejos, perros o cerdos. El modelo animal también se puede usar para determinar el intervalo de concentración apropiado y vía de administración. Tal información puede

IMPI usarse entonces para determinar las dosis útiles y vías de administración en seres humanos. La eficacia terapéutica/profiláctica y la toxicidad se pueden determinar mediante procedimientos farmacéuticos estándar en cultivos celulares o animales experimentales, por ejemplo, ED₅₀ (la dosis terapéuticamente efectiva en el 50% de la población) y LD₅₀ (la dosis letal para el 50% de la población). La relación de dosis entre los efectos tóxicos y terapéuticos es el índice terapéutico, y puede expresarse como la relación LD_5O/ED₅o. Composiciones farmacéuticas que exhiben grandes índices terapéuticos son preferibles. La dosificación puede variar dentro de esta gama dependiendo de la forma de dosificación empleada, la sensibilidad del paciente y la vía de administración.

La dosificación y administración se ajustan para proporcionar niveles suficientes del o los agentes activos o para mantener el efecto deseado. Los factores que pueden tenerse en cuenta incluyen la gravedad del estado de enfermedad, la salud general del sujeto, la edad, el peso y el género del sujeto, la dieta, el tiempo y la frecuencia de administración, la combinación de fármacos, la sensibilidad a la reacción y la tolerancia/respuesta a la terapia. Las composiciones farmacéuticas de acción prolongada se pueden administrar cada 3 a 4 días, cada semana o una vez cada dos semanas, dependiendo de la vida media y la velocidad de eliminación de la formulación particular.

Una dosificación adecuada del compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, dependerá de la edad y condición del paciente, la gravedad de la enfermedad a tratarse y otros factores bien conocidos por el médico practicante. El compuesto puede administrarse por ejemplo oralmente, parenteralmente o tópicamente de acuerdo con diferentes programas de dosificación, por ejemplo, diariamente o con intervalos, tales como intervalos semanales. En general, una dosis única estará en el intervalo de 0.01 a 500 mg/kg de peso corporal, preferiblemente de aproximadamente 0.05 a 100 mg/kg de peso corporal, más preferiblemente de 0.1 a 50 mg/kg de peso corporal, y más preferiblemente de entre 0.1 a 25 mg/kg de peso corporal. El compuesto se puede administrar como un bolo (es decir, se administra la dosis diaria entera de una vez) o en dosis divididas dos o más veces al día. Las variaciones basadas en los intervalos de dosificación antes mencionados pueden ser hechas por un médico de experiencia ordinaria teniendo en cuenta consideraciones conocidas tales como el peso, la edad y la condición de la persona a tratarse, la gravedad de la afección, y la ruta particular de administración.

Tal como se utiliza aquí, un sujeto o sujeto que lo necesite es un sujeto que tiene una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de o-amino-p-carboximuconato-c-semialdehído descarboxilasa (ACMSD). Un sujeto incluye un mamífero. El mamífero puede ser, por ejemplo, cualquier mamífero, por ejemplo, un ser humano, primate, pájaro, ratón, rata, ave, perro, gato, vaca, caballo, cabra, camello, oveja o cerdo. Preferiblemente, el mamífero es un ser humano.

Los compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula

IMPI (III), o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, también se pueden preparar en una composición farmacéutica que comprende una o más sustancias activas adicionales solas, o en combinación con portadores, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables en dosis únicas o múltiples. Los portadores, diluyentes y excipientes farmacéuticamente aceptables adecuados son como se han descrito aquí anteriormente, y una o más sustancias activas adicionales pueden ser cualesquiera sustancias activas, o preferiblemente una sustancia activa como se describe en la sección tratamiento de combinación aquí a continuación.

Condiciones clínicas v otros usos de los compuestos

Los compuestos de acuerdo con la fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una forma farmacéuticamente aceptable de los mismos, composiciones, medicamentos y compuestos para uso, como se define aquí, son útiles para el tratamiento de una enfermedad o trastorno en el que la modulación de α-amino-β-carboximuconato-ε-semialdehído descarboxilasa (ACMSD) juega una función. Los compuestos pueden usarse en humanos o en medicina veterinaria y el paciente puede ser cualquier mamífero, pero especialmente un ser humano. El tratamiento puede incluir la administración a cualquier mamífero, pero especialmente a un ser humano, que sufre de una enfermedad o trastorno en el que la modulación o-amino-βcarboximuconato-e-semialdehído descarboxilasa (ACMSD) juega una función, una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de acuerdo con la fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define aquí.

La presente descripción también se refiere a un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define aquí, para uso en una enfermedad o trastorno asociado con disfunción de o-aminoβ-carbox¡muconato-ε-semialdehído descarboxilasa (ACMSD), tal como obesidad, diabetes de tipo II y sus complicaciones (por ejemplo, retinopatía y nefropatía diabética), enfermedad hepática de grasa no alcohólica (NAFLD), esteatohepatitis no alcohólica (NASH), o enfermedad renal crónica.

Por el término enfermedad o trastorno asociado con la disfunción de a-amino-βcarboximuconato-c-semialdehído descarboxilasa (ACMSD) se entiende cualquier enfermedad caracterizada por una expresión y/o actividad reducida de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD⁺) en al menos algunos casos de la enfermedad, o una enfermedad que se mejora mediante la elevación de los niveles de NAD⁺.

Los métodos, medicamentos y compuestos para el uso de la presente descripción son útiles para tratar, aliviar los síntomas o retrasar el inicio de un trastorno asociado con la función mitocondrial aberrante. Los trastornos asociados con la función mitocondrial aberrante incluyen, por £

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INSTITUTO MEXICANO DE LA PROPIEDAD INDUSTRIAL ejemplo, trastornos metabólicos, trastornos neurodegenerativos, trastornos relacionados con la edad, y trastornos inflamatorios crónicos. Los trastornos mitocondriales también incluyen enfermedades con disfundón mitocondrial heredada y/o adquirida (es decir, enfermedad de CharcotMarie-Tooth, tipo 2A2, acidosis láctica de encefalopatía mitocondrial y apoplejía (MELAS), síndrome de Leigh, síndrome de Barth y neuropatía óptica de Leber), trastornos de oxidación de ácido graso, formas heredadas de sordera y ceguera, y anomalías metabólicas inducidas por la exposición a productos químicos tóxicos y/o fármacos (por ejemplo, sordera inducida por cisplatino).

Los trastornos metabólicos incluyen, por ejemplo, diabetes tipo II, obesidad, hiperglicemia, intolerancia a la glucosa, resistencia a la insulina (hiperinsulinemia, síndrome metabólico, síndrome X), hipercolesterolemia, hipertensión, hiperlipoproteinemia, hiperlipidemia (por ejemplo, dislipidemia), hipertrigliceridemia, enfermedad cardiovascular, aterosclerosis, enfermedad vascular periférica, enfermedad renal, cetoacidosis, trastornos trombóticos, nefropatía, neuropatía diabética, retinopatía diabética, disfundón sexual, dermatopatía, dispepsia, hipoglucemia, cáncer y edema.

Los trastornos neurodegenerativos incluyen enfermedades tales como degeneración de fotorreceptores (es decir, retinitis pigmentosa), demencia, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson y enfermedad de Huntington.

Las enfermedades inflamatorias crónicas incluyen enfermedades tales como enfermedad celíaca, vasculitis, lupus, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD), enfermedad del intestino irritable, aterosclerosis, artritis y psoriasis.

Los trastornos relacionados con el envejecimiento incluyen enfermedades tales como cáncer, demencia, enfermedad cardiovascular (es decir, arteriesclerosis), hipertensión, diabetes mellitus (tipo I o tipo II), artritis, cataratas, enfermedad de Alzheimer, degeneración macular, y osteoporosis.

El sujeto puede padecer o ser susceptible de desarrollar un trastorno metabólico. Los sujetos que padecen o están en riesgo de desarrollar un trastorno metabólico se identifican por métodos conocidos en la técnica. Por ejemplo, la diabetes se puede diagnosticar midiendo los niveles de glucosa en sangre en ayunas o la insulina o mediante la prueba de tolerancia a la glucosa. Los niveles normales de glucosa en adultos están entre aproximadamente 60-126 mg/dl. Los niveles normales de insulina son de aproximadamente 7 mU/ml + 3mU. La hipertensión se puede diagnosticar mediante una lectura de la presión arterial consistentemente en o por encima de 140/90. La enfermedad cardiovascular se puede diagnosticar midiendo los niveles de colesterol. Por ejemplo, el colesterol LDL por encima de aproximadamente 137 o el colesterol total por encima de aproximadamente 200 es indicativo de enfermedad cardiovascular. La hiperglicemia puede ser diagnosticada con un nivel de glucosa en sangre superior a aproximadamente 10 mmol/l (180

IMPI mg/dl). La intolerancia a la glucosa puede ser diagnosticada por niveles de glucosa de 140 a 199 mg por di (7.8 a 11.0 mmol) después de realizar una prueba oral de tolerancia a la glucosa de dos horas con 75 g. La resistencia a la insulina se puede diagnosticar con un nivel de insulina suero en ayunas de más de aproximadamente 60 pmol/l. La hipoglicemia se puede diagnosticar con un nivel de glucosa en sangre inferior a aproximadamente 2.8 a 3.0 mmol/l (50 a 54 mg/dl). La obesidad puede ser diagnosticada, por ejemplo, por el índice de masa corporal. El índice de masa corporal (IMC) se mide en kg/m² (o lb/in² X 704.5). Alternativamente, la circunferencia de la cintura (estimación de la distribución de grasa), la relación cintura-cadera (estimación de distribución de grasa), el grosor del pliegue cutáneo (si se mide en varios sitios, estimación de distribución de grasa) o la bioimpedancia (basado en el principio de que la masa magra conduce la corriente mejor que la masa de grasa (es decir, la masa de grasa que impide la corriente), las estimaciones de % de grasa) se pueden medir. Los parámetros para los individuos normales, con sobrepeso u obesos son los siguientes: Peso bajo: BMI < 18.5; Normal: BMI aproximadamente 18.5 a aproximadamente 24.9; sobrepeso: BMI = aproximadamente 25 a proximadamente 29.9. Los individuos con sobrepeso se caracterizan por tener una circunferencia de cintura de > 94 cm para los hombres o > 80 cm para las mujeres y las relaciones de cintura a la cadera de > 0.95 en hombres y > 0.80 en mujeres. Los individuos obesos se caracterizan por tener un BMI de 30 a 34.9, siendo superior al 20% por encima del peso normal para la estatura, con un porcentaje de grasa corporal para hombres, y que tiene una circunferencia de cintura

30% para mujeres y 25%

102 cm (40 pulgadas) para hombres u 88 cm (35 pulgadas) para mujeres. Los individuos con obesidad severa o mórbida se caracterizan por tener un BMI > 35.

Los métodos descritos aquí pueden conducir a una reducción en la gravedad o el alivio de uno o más síntomas de un trastorno metabólico. Por ejemplo, los síntomas de diabetes incluyen niveles elevados de glucosa en sangre en ayunas, presión sanguínea igual o superior a 140/90 mm/Hg; niveles de grasa sanguínea anormales, tales como lipoproteínas de alta densidad (HDL) menores o ¡guales a 35 mg/dl o triglicéridos mayores o iguales a 250 mg/dl (mg/dl = miligramos de glucosa por decilitro de sangre). La eficacia del tratamiento se determina en asociación con cualquier método conocido para diagnosticar el trastorno metabólico. El alivio de uno o más síntomas del trastorno metabólico indica que el compuesto confiere un beneficio clínico.

Los métodos de la presente descripción son útiles para tratar, aliviar los síntomas o retrasar la aparición de un trastorno renal. Los trastornos renales incluyen lesión renal aguda (AKI) y enfermedad renal crónica (CKD).

El sujeto puede sufrir o ser susceptible a desarrollar una lesión renal aguda (AKI). La lesión renal aguda puede caracterizarse por uno o más criterios o condiciones clínicas (es decir, una disminución abrupta en la capacidad de los riñones para excretar productos de desecho nitrogenados £

ΙΜΡΙ de la sangre, resultando en azotemia). Los sujetos que sufren o están en riesgo de desarrollar una lesión renal aguda (AKI) se identifican por métodos conocidos en la técnica. Por ejemplo, la lesión renal aguda puede caracterizarse por un aumento de la creatinina sérica de al menos un 50% sobre la línea de base, un aumento absoluto de la creatinina sérica de al menos 0.3 mg/dl sobre la línea de base, una reducción en la tasa de filtración glomerular de al menos 25% en comparación con la línea de base, una disminución en la producción de orina a 0.5 mi por kilogramo de peso corporal o menos por hora que persiste durante al menos 6 horas, o cualquier combinación de los mismos. Una lesión renal aguda puede ser causada por Isquemia, fármacos o agentes tóxicos (es decir, medios de radiocontraste, un fármaco antiinflamatorio no esteroideo (NSAID), alcohol o un agente quimioterapéutico), virus y obstrucción.

El sujeto puede padecer o ser susceptible de desarrollar enfermedad renal crónica (CKD). La enfermedad renal crónica (CKD) se define como: (1) que tiene daño renal como se define por anomalías estructurales o funcionales del riñón durante 3 meses o más con o sin una tasa de filtración glomerular disminuida (GFR) o (2) que tiene un GFR de menos de 60 ml/min/1.73 m²durante 3 meses o más con o sin daño renal. Los sujetos que padecen o están en riesgo de desarrollar una enfermedad renal crónica (CKD) se identifican por métodos conocidos en la técnica. Las anomalías estructurales o funcionales se manifiestan por síntomas como anomalías patológicas o marcadores de daño renal, incluyendo anomalías identificadas en estudios de imagen o la composición de sangre u orina.

Por ejemplo, la CKD se puede diagnosticar mediante la prueba de marcador específico. Por ejemplo, los marcadores de daño renal incluyen una concentración de creatinina en plasma por encima de aproximadamente 1.6 mg/dl y una concentración de nitrógeno de urea en sangre (BUN) por encima de aproximadamente 20 mg/dl. Típicamente, ambos marcadores están elevados en individuos con CKD. Los marcadores adicionales de daño renal pueden incluir hematuria (es decir, cualquier cantidad detectable de sangre en la orina), proteinuria (es decir, concentraciones de proteína en orina por encima de aproximadamente 100 mg/dl), albuminuria (es decir, concentraciones de albúmina en orina por encima de 100 mg/dl), una concentración de hormona paratiroidea (PTH) intacta en la sangre por encima de aproximadamente 150 pg/ml, o niveles de fosfato sanguíneo por encima de aproximadamente 4.5 mg/dl. Un marcador específico de enfermedad renal es una tasa de GFR por encima de la normal (es decir, una GFR por encima de aproximadamente 90 ml/min/1.73 m²), sin embargo, una GFR normal por debajo también indica CKD.

Los métodos de la presente descripción son útiles para tratar, aliviar los síntomas o retrasar la aparición de enfermedad hepática de grasa no alcohólica (NAFLD) y/o esteatohepatitis no alcohólica (NASH). El sujeto puede padecer o ser susceptible a desarrollar enfermedad hepática de

ΙΜΡΙ grasa no alcohólica (NAFLD) y/o esteatohepatitis no alcohólica (NASH). Los sujetos que padecen o están en riesgo de desarrollar una enfermedad hepática de grasa no alcohólica (NAFLD) y/o esteatohepatitis no alcohólica (NASH) se identifican por métodos conocidos en la técnica. Por ejemplo, NAFLD y/o NASH pueden ser diagnosticados por biopsia hepática.

La enfermedad hepática de grasa no alcohólica (NAFLD), como se define aquí, es una enfermedad con deposición de grasa en el hígado, que ocurre en pacientes cuya historia de ingestión de alcohol no es lo suficientemente larga para causar lesión hepática. La enfermedad hepática de grasa no alcohólica (NAFLD) se puede clasificar además en hígado graso simple, esteatohepatitis y cirrosis. La esteatohepatitis no alcohólica (NASH) se refiere a una patología asociada con inflamación, necrosis de células hepáticas, globos y fibrosis. La aparición de hígado graso no alcohólico simple se induce por deposición de grasa en las células hepáticas, y esta acumulación de grasa se define por el equilibrio entre factores crecientes (afluencia y síntesis de grasas en las células hepáticas) y factores decrecientes (catabolismo de las grasas y su liberación de células hepáticas). Una vez que el daño de las células hepáticas se produce, además de esta deposición de grasa, el hígado graso simple no alcohólico progresará a esteatohepatitis no alcohólica. La esteatohepatitis no alcohólica es progresiva y puede progresar finalmente hada la cirrosis y el carcinoma hepatocelular.

Tratamiento de combinación

También se pueden utilizar ventajosamente un compuesto, composiciones, medicamentos y compuestos para el uso de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en combinación con uno o más agentes terapéuticos. Tales agentes terapéuticos incluyen, pero no se limitan a otros inhibidores de ACMSD; agentes antidiabéticos tales como agonistas PPARy, agonistas duales PPARa/γ, agonistas de PPARó, biguanidas, proteína tirosina fosfatasa-ΙΒ (PTP-1B), inhibidores de dipeptidil peptidasa IV (DPP-IV), suIfonilureas, meglitinidas, inhibidores de alfa glucosida hidrolasa, inhibidores de alfaamilasa, secreatagogues de insulina, antagonistas de A2, insulina o miméticos de insulina, inhibidores de glucógeno fosforilasa, agonistas de GLP-1, no-tiazolidinadionas, glicoquinasa, e inhibidor de 11 β HSD-1; agentes anti-obesidad tal como activadores de la proteín de desacoplamiento (UCP-1, UCP-2, y UCP-3), receptor adrenérgico β3 (β3), agonistas de la hormona tiroides β, inhibidores de ácido grasa sintasa (PAS), inhibidores de fosfodiesterasa (PDE), inhibidores de lipasa, inhibidores de recaptación de serotonina, inhibidores de recaptación de monoamina, agonistas de Mc4r, agonistas de 5HT2c, agonistas de secretagogos de la hormona del crecimiento (GHS), derivados de CNTF, factores neurotróficos ciliares (CNTh), agonistas de colecistoquinina-A (CCK-A), antagonistas de opioides, antagonistas de oxerina, acil-estrógenos, leptina, antagonistas de £

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NPY 5, antagonistas de neuropéptido Y5 (NPY5), agonistas de neuropéptido Y2 (NPY2), antagonistas del receptor de la hormona de concentración de melanina (MCHLR) y receptor de la hormona de concentración de melanina 2 (MCH2R), antagonistas de MCH1R, neuropéptido Yl, antagonistas de grelina, receptor 1 de canabinoides (CB-1), inhibidores del transporte de serotonina (5HT), agonistas de CCK-A y antagonista de histamina 3 (H3)/agonistas inversos; agentes de disminución de colesterol tal como inhibidores de 3-hidroxi-3-metilglutaril-coenzima A (HMG CoA) reductasa, inhibidores de la HMG-CoA sintasa, inhibidores de escualeno epoxidasa, ácidos fibrónicos, resinas de unión a ácidos biliares probucol y niacina (ácido nicotínico) ; compuestos que refuerzan los niveles de NAD⁺ tal como precursores de NAD⁺ (es decir, nicotinamida ribosa (NA), nicotinamida mononucleótido (NMN), ácido nicotínico (NA) y nicotinamida); y compuestos que inhiben el consumo de NAD⁺ tal como inhibidores de PARP e inhibidores de CD38.

Los agonistas de PPARy útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, glitazonas (por ejemplo, balaglitazona, ciglitazona, darglitazona, englitazona, isaglitazona (MCC555), pioglitazona, rosiglitazona, troglitazona, CLX-0921, 5-BTZD y lo similar); GW-0207, LG-100641, LY-300512, LY-519818, R483 (Roche), T131 (Tularik), y compuestos descritos en W097/27857, 97/28115, 97/28137 y 97/27847; y sus sales o ésteres farmacéuticamente aceptables. Agonistas duales PPARa/γ útiles en la presente descripción, incluyen, pero no se limitan a„ CLX-0940, GW1536, GW1929, GW-2433, KRP-297, L-796449, LR-90, MK-0767, SB 219994, y muraglitazar, y sus sales o ésteres farmacéuticamente aceptables. KRP-297 es 5-[(2,4-Dioxo-5-tiazolidinil)metil]-220 metoxi-N-[[4-(trifluorometil)fenil]metil]benzamida, y sus sales o ésteres farmacéuticamente aceptables, agonistas PPARó útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, GW 501516, GW 590735, y compuestos descritos en JP 10237049 y WO 02/14291; y sus sales o ésteres farmacéuticamente aceptables.

Las biguanidas útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, buformina, metformina y fenformina, y sus sales o ésteres farmacéuticamente aceptables.

La metformina (Glucophage®) está indicada para pacientes con diabetes mellitus no insulinodependiente, particularmente aquellos con obesidad refractaria. Physician's Desk Reference® páginas 1080-1086, (56^a edición, 2002).

Los inhibidores de la proteína tirosina fosfatasa-ΙΒ (PTP-1B) útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, A-401,674, KR 61639, OC-060062, OC-83839, OC-297962, MC52445, MC52453 y los compuestos descritos en WO 02/26707, WO 02/26743, JP 2002114768, y sus sales o ésteres farmacéuticamente aceptables.

Los inhibidores de la dipeptidil peptidasa IV (DPP-IV), tales como isoleucina tiazolidida; NVP-DPP728; P32/98; y LAP 237, P 3298, TSL 225, pirroliduro de valina, TMC-2A/2B/2C, inhibidores de CD-26, FE 999011, P9310/K364, VIP 0177, DPP4, SDZ 274A444; y los compuestos

IMPI descritos en WO 03/00449; WO 03/004496; EP 1 258 476; WO 02/083128; WO 021062764; WO 03/000250; WO 03/002530; WO 03/002531; WO 03/002553; WO 03/002593; WO 03/000180; y WO 03/000181.

Las sulfonilureas útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, acetohexamida, clorpropamida, diabinese, glibenclamida, glipizida, gliburida, glimepirida, gliclazida, glipentida, gliquidona, glisolamida, tolazamida y tolbutamida, sales o ésteres farmacéuticamente aceptables de los mismos. Las meglitinidas útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, repaglinida y nateglinida, y sus sales o ésteres farmacéuticamente aceptables.

Los inhibidores de alfa glucosida hidrolasa (o inhibidores de glucósido) útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, acarbosa, adiposina, camiglibosa, emiglitato, miglitol, voglibosa, pradimicina-Q, salbostatina, CKD-711, MDL-25,637, MDL-73,945 y MOR 14, y sus sales o ésteres farmacéuticamente aceptables, y los compuestos descritos en la patente de E.U.A. Nos. 4,062,950, 4,174,439, 4,254,256, 4,701,559, 4,639,436, 5,192,772, 4,634,765, 5,157,116, 5,504,078, 5,091,418, 5,217,877 y 5,091,524. Los inhibidores de alfa-amilasa útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, tendamistat, trestatin y Al-3688, y sales y ésteres farmacéuticamente aceptables de los mismos, y los compuestos descritos en la patente de E.U.A. Nos. 4,451,455, 4,623,714, y 4,273,765.

Los secreatagogues de la insulina útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, linogliride y A-4166, y sus sales y ésteres farmacéuticamente aceptables.

Los inhibidores de oxidación de ácidos grasos útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, clomoxir y etomoxir, y sus sales y ésteres farmacéuticamente aceptables. Los antagonistas A2 útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, midaglizol, isaglidol, deriglidol, idazoxan, earoxan, fluparoxano, y sales y ésteres farmacéuticamente aceptables de los mismos. La insulina o los miméticos de insulina útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, biota, LP-100, novarapid, insulina detemir, insulina lispro, insulina glargina, suspensión de zinc de insulina (lente y ultrájente), insulina Lys-Pro, GLP-1 (73-7) (insulintropina) y GLP-1 (7-36)-NH2), y sus sales o ésteres farmacéuticamente aceptables, h

Los inhibidores de fosforilasa de glicógeno útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, CP-368, 296, CP-316,819, BAYR3401 y los compuestos descritos en WO 01/94300 y WO 02/20530, y sus sales o ésteres farmacéuticamente aceptables. Los agonistas de GLP-1 útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, exendina-3 y exendina-4 y compuestos descritos en US 2003087821 y NZ 504256, y sus sales o ésteres farmacéuticamente aceptables.

Las no tiazolidindionas útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, JT-501, y farglitazar (GW-2570/GI-262579), y sus sales o ésteres farmacéuticamente aceptables.

ΙΜΡΙ

Los activadores de glicoquinasa útiles en esta descripción incluyen, pero no se limitan a, compuestos heteroaromáticos condensados tales como los descritos en US 2002103199, y compuestos de propionamida sustituidos con isoindolin-l-uno, tales como los descritos en WO 02/48106.

Los inhibidores del transporte de serotonina (5HT) útiles en esta descripción incluyen, pero no se limitan a, paroxetina, fluoxetina, fenfluramina, fluvoxamina, sertralina e imipramina. Los inhibidores del transporte de norepinefrina (NE) útiles en esta descripción incluyen, pero no se limitan a, GW 320659, despiramina, talsupram y nomifensina. Los antagonistas/agonistas inversos del receptor 1 de canabinoides (CB-1) útiles en la presente descripción incluyen: Patente de E.U.A. Nos. 5,532,237, 4,973,587, 5,013,837, 5,081,122, 5,112,820, 5,292,736, 5,624,941 y Patente de E,U,A, No. 6,028,084, y Solicitud de PCT Nos. WO 99/33159, WO 98/33765, W098/43636, W098/43635, WO 01/09120, WO 98/31227, WO 98/41519, WO 98/37061, WO 00/10967, WO 00/29079, WO 99/02499, WO 01/58869, WO 02/076949, WO 01/64632, WO 01/64633, WO 01/64634 y WO 03/007887, y Solicitud EPO No. EP-658546. Los antagonistas/agonistas inversos CB1 específicos útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, rimonabant (Sanofi Synthelabo), SR-147778 (Sanofi Synthelabo), BAY 65-2520 (Bayer) y SLY 319 (Solvay). Los agonistas de CCK-A útiles en la presente descripción incluyen GI 181771, y SR 146,131. Los antagonistas de grelina útiles en la presente descripción, incluyen: Solicitudes de PCT Nos. WO 01/87335 y WO 02/08250. Los antagonistas/agonistas inversos de la histamina 3 (H3) útiles en la presente descripción incluyen: Solicitud de PCI No. WO 02/15905 y O-[3-(lH-imidazol-4il)propanol]carbamatos (Kiec-Kononowicz, K. et al., Pharmazie, 55: 349-55 (2000)), antagonistas del receptor H3 de histamina que contienen piperidina (Lazewska, D. et al., Pharmazie, 56: 927-32 (2001), derivados de benzofenona y compuestos relacionados (Sasse, A. et al. Arch. Pharm. (Weinheim) 334: 45-52 (2001)), carbamatos de N-fenilo substituidos (Reidemeister, S. et al., Pharmazie, 55: 83-6 (2000)) y derivados de proxifano (Sasse, A. et al., J. Med. Chem. 43: 3335-43 (2000)). Los antagonistas/agonistas inversos específicos H3 útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, tioperamida, 3-(lH-imÍdazol-4-il)propil N-4-pentenil)carbamato, clobenpropit, iodofenpropit, imoproxifan, GT2394 (Gliatech) y A331440.

Los antagonistas del receptor de la hormona concentradora de melanina (MCHLR) y los agonistas/antagonistas del receptor de la hormona 2 que concentra melanina (MCH2R) útiles en la presente descripción incluyen las solicitudes de patente de PCT Nos. WO 01/82925, WO 01/87834, WO 02/06245, WO 02/04433, y WO 02/51809, y la Solicitud de Patente Japonesa No. JP 13226269. Los antagonistas de MCH1R específicos útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, T-226296 (Takeda), SB 568849 y SNAP 7941. Los antagonistas del neuropéptido Y1 (NPY1) útiles en la presente descripción, incluyen: Patente de E.U.A. No. 6,001,836 y solicitud de PCT Nos. WO 96/14307, WO 01/23387, WO 99/51600, WO 01/85690, WO 01/85098, WO 01/85173 y WO

IMPI

01/89528. Los ejemplos específicos de antagonistas de NPY1 útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, BIBP3226, J-115814, BIBO 3304, LY-357897, CP-671906 y GI264879A. Los agonistas del neuropéptido Y2 (NPY2) útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, péptido YY (PYY) y PYY3_36, análogos de péptido YY, agonistas PYY y los compuestos descritos en WO 03/026591, WO 03/057235, y WO 03/027637. Los antagonistas del neuropéptido Y5 (NPY5) útiles en la presente descripción, incluyen, pero no se limitan a, los compuestos descritos en: Patente de E.U.A. Nos. 6,140,354, 6,191,160, 6,258,837, 6,313,298, 6,337,332, 6,329,395 y 6,340,683, Patente de E.U.A. Nos. 6,326,375, 6,329,395, 6,337,332, 6,335,345, Patente Europea Nos. EP-01010691 y EP 01044970, y Publicación de Patente Internacional de PCT Nos. WO 97/19682, WO 97/20820, WO 97/20821, WO 97/20822, WO

97/20823, WO 98/27063, WO 00/107409, WO 00/185714, WO 00/185730, WO 00/64880,WO

00/68197, WO 00/69849, WO 01/09120, WO 01/85714, WO 01/85730, WO 01/07409,WO

01/02379, WO 01/02379, WO 01/23388, WO 01/23389, WO 01/44201, WO 01/62737,WO

01/62738, WO 01/09120, WO 02/20488, WO 02/22592, WO 02/48152, WO 02/49648 y WO 01/14376. Los antagonistas de NPY5 específicos útiles en las combinaciones de la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, GW-569180A, GW-594884A, GW-587081X, GW-548118X, FR 235,208, FR226928, FR 240662, FR252384, 1229U91, GI-264879A , CGP71683A, LY-377897, LY366377, PD-160170, SR-120562A, SR-120819A, JCF-104 y H409/22. Los antagonistas de NPY5 específicos útiles en las combinaciones de la presente descripción, incluyen, pero no se limitan a los compuestos descritos en Norman et al., J. Med. Chem. 43:42884312 (2000). Leptina incluye, pero no se limita a, leptina humana recombinante (PEG-OB, Hoffman La Roche) y leptina humana de metionilo recombinante (Amgen). Los derivados de leptina (por ejemplo, formas truncadas de ofleptina) útiles en la presente descripción incluyen: Patente Nos. 5,552,524, 5,552,523, 5,552,522, 5,521,283 y Publicación Internacional de PCT Nos. WO 96/23513, WO 96/23514, WO 96/23515, WO 96/23516, WO 96/23517, WO 96/23518, WO 96/23519, y WO 96/23520.

Los antagonistas opioides útiles en la presente descripción incluyen: Solicitud de PCT No. WO 00/21509. Los antagonistas de opioides específicos útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, nalmefeno (Revex®), 3-metoxinaltrexona, naloxona y naltrexona. Los antagonistas de orexina útiles en la presente descripción incluyen: Solicitud de patente de PCT Nos. WO 01/96302, WO 01/68609, WO 02/51232, WO 02/51838 y WO 03/023561. Los antagonistas de orexina específicos útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, SB-334867-A. Los acil-estrógenos útiles en la presente descripción incluyen oleoil-estrona (del Mar-Grasa, M. et al., Obesity Research, 9: 202-9 (2001)). Los agonistas de colecistoquinina-A (CCK-A) útiles en la presente descripción incluyen la Patente de E.U.A.No. 5,739,106. No. 5,739,106. Los agonistas específicos de CCK-A incluyen, pero no se limitan a, AR-R 15849, GI181771, JMv-180, A-71378, A35

ΙΜΡΙ

71623 y SR146131. Los factores neurotróficos ciliares específicos (CNTh) útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, GI-181771 (Glaxo-SmithKIine), SR146131 (Sanofi Synthelabo), butabindida, PD170,292, PD 149164 (Pfizer). Los derivados de CNTF útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, axoquina (Regeneran), y solicitud de PCI Nos. WO 94/09134, WO 98/22128 y WO 99/43813. Los agonistas de secretagogos de hormonas de crecimiento (GHS) útiles en la presente descripción incluyen: Patente de E.U.A. No. 6,358,951 y solicitud de patente de E.U.A. No. 2002/049196 y 2002/022637 y solicitud de PCT No. WO 01/56592 y WO 02/32888. Los agonistas de GHS específicos incluyen, pero no se limitan a, NN703, hexarelina, MK-0677, SM-130686, CP424 391, L-692,429 y L-163,255.

Los agonistas de 5HT2c útiles en la presente descripción incluyen: Patente de E.U.A. No. 3,914,250 y solicitud de PCT Nos. WO 02/36596, WO 02/48124, WO 02/10169, WO 01/66548, WO 02/44152, WO 02/51844, WO 02/40456 y WO 02/40457. Los agonistas de 5HT2c específicos . útiles en esta descripción incluyen, pero no se limitan a, BVT933, DPCA37215, 1K264, PNU 22394, WAY161503, R-1065 e YM 348.

Los agonistas Mc4r útiles en la presente descripción incluyen: Solicitud de PCT Nos. WO 99/64002, WO 00/74679, WO 01/991752, WO 01/74844, WO 01/70708, WO 01/70337, WO 01/91752, WO 02/059095, WO 02/059107, WO 02/059108, WO 02/056117, WO 02/12166, WO 02111715, WO 02/12178, WO 02/15909, WO 02/068387, WO 02/068388, WO 02/067869, WO 03/007949 y WO 03/009847. Los agonistas Mc4r específicos útiles en la presente descripción incluyen CIR86036 (Chiron), ME-10142, y ME-10145 (Melacure).

Los inhibidores de la recaptación de monoamina útiles en la presente descripción incluyen: Solicitudes de PCT Nos. WO 01/27068 y WO 01/62341. Los inhibidores de la recaptación de monoamina específicos útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, sibutramina (Meridia O/Reductil®) descrita en la Patente de E.U.A. Nos. 4,746,680, 4,806,570 y 5,436,272, y Publicación de Patente de E.U.A. No. 2002/0006964.

Los inhibidores de la recaptación de serotonina, y liberadores, útiles en la presente descripción incluyen: dexfenfluramina, fluoxetina y otros inhibidores de la recaptación de serotonina, incluyendo, pero sin limitarse a los de la Patente de E.U.A. No. 6,365,633, y solicitud de patente de PCT Nos. WO 01/27060 y WO 01/162341.

Inhibidor de 11 β HSD-1 útil en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, BVT 3498, BVT 2733, y aquellos compuestos descritos en WO 01/90091, WO 01/90090, WO 01/90092. Los activadores de la proteína de desacoplamiento (UCP-1, UCP-2, y UCP-3) útiles en la presente descripción incluyen: Solicitud de Patente de PCT No. WO 99/00123. Los activadores de la proteína de desacoplamiento específicos (UCP-1, UCP-2, y UCP-3) útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, ácido fitanico ácido 4-[(E)-2-(5,6,7,8-tetrahidro-5,5_/8,8-tetrametil-235 w

&lt;o σι &lt;o

IMPI

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naftalenil)-l-propenil]benzoico (TTNPB), y ácido retinoico.

Receptor adrenérgico β3 (β3) agonistas útiles en la presente descripción incluyen: La Patente de E.U.A. No. 5,705,515 y Patente de E.U.A. No. 5,451,677 y la Solicitud de Patente PCT Nos. WO 01/74782, y WO 02/32897. Agonistas específicos β útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, AD9677/TAK677 (Dainippon/Takeda), CL-316,243, SB 418790, BRL37344, L-796568, BMS-196085, BRL- 35135A, CGP12177A, BTA-243, GW 427353, Trecadrine, Zeneca D7114, y SR 59119A.

Los agonistas de la hormona tiroidea β útiles en la presente descripción incluyen: Solicitud PCT No. WO 02/15845 y Solicitud de Patente Japonesa No. JP 2000256190. Agonistas específicos de la hormona tiroidea β útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, KB-2611 (KaroBioBMS). Los inhibidores específicos de ácidos grasos sintetasas (PAS) útiles en la presente descripción, incluyen, pero no se limitan a, Cerulenina y C75. Los inhibidores específicos de la fosfodiesilasa (PDE) útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, teofilina, pentoxifilina, zaprinast, sildenafilo, arnrinona, milrinona, cilostamida, rolipram y cilomilast.

Los inhibidores de la lipasa útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, los descritos en la Solicitud PCT No. WO 01/77094, y en la Patente de E.U.A. Nos. 4,598,089, 4,452,813, 5,512,565, 5,391,571, 5,602,151, 4,405,644, 4,189,438, y 4,242,453. Los inhibidores de lipasa específicos útiles en la presente descripción incluyen, pero no se limitan a, tetrahidrolipstatina (orlistat/Xenical®), Tritón WR1339, RHC80267, lipstatina, teasaponina y fosfato de dietilumbeliferilo, FL-386, WAY-121898, Bay-N-3176, valilactona, esteracina, ebelactona A, ebelactona B, y RHC 80267.

Ejemplos de inhibidores de la HMG-CoA reductasa incluyen, pero no se limitan a, lovastatina, simvastatina, pravastatina y fluvastatina. Ejemplos de inhibidores de HMG-CoA sintasa son los derivados de beta-lactona descritos en las Patentes de Estados Unidos 4,806,564, 4,816,477, 4,847,271, y 4,751,237; los derivados de beta-lactama descritos en los documentos U.S. 4,983,597 y U.S.S.N. 07/540,992 presentada el 20 de junio de 1990; y los análogos de oxaciclopropano sustituidos descritos en la publicación de patente europea EP 0 411 703. Ejemplos de inhibidores de escualeno epoxidasa se describen en la publicación de patente europea EP 0 318 860 y en la publicación de patente japonesa J02 169-571A. Ejemplos de moléculas inductoras de genes de receptor de LDL se describen en la patente de E.U.A. 5,182,298 presentada el 18 de marzo de 1991. Otros agentes reductores del colesterol que pueden administrarse incluyen niacina, probucol, ácidos fibricos (es decir, clofibrato y gemfibrozilo), e inductores del gen del receptor de LDL.

Ejemplos de inhibidores de PARP incluyen, pero no se limitan a, yodonitocumarina,

5-yodo-6-nitrocoumarina,

3,4-dih¡dro-5-met¡l-¡soqu¡nolinona,

4-amino-l,8-naftalimida,

3metoxibenzamida,

8-hidroxl·2’metil·3-h¡droquinazol¡n-4-ona_/

2-{3-[4-(4-fluorofenil)-3,6-dihidroIMPI l(2h)-pirid¡nil]propil}-8-met¡l-4(3h)-qu¡nazolinona, 5-fluoro-l-[4- (4-fenH-3_z6-dihidropiridin-l(butil] quinazolina-2,4(lh,

3h)-diona,

3-(4-clorofen ilo)q ui noxal i na -5-ca rboxa m ida,

2-(3'metoxifenil)bencirnidazol-4-carboxam, benzamida, 3-aminobenzamida, 3-aminoftal-hidrazida y 1,5dihidroxi-isoquinolina.

Los compuestos anteriormente mencionados, que se pueden usar en combinación con un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, pueden prepararse y administrarse como se describe en la técnica tal como en los documentos citados anteriormente.

Los compuestos anteriores son sólo ilustrativos de los inhibidores de ACMSD, agentes antidiabéticos, agentes antiobesidad, agente de colesteroi inferior, compuestos que aumentan los niveles de NAD⁺, compuestos que inhiben el consumo de NAD⁺ que se pueden usar en las composiciones de la presente descripción. Dado que este listado de compuestos no pretende ser exhaustivo, los métodos de la presente descripción pueden emplear cualquier agente antiobesidad y cualquier agente antidiabético, y no están limitados a ninguna clase estructural particular de compuestos.

Tal como se usa en el presente documento, terapia de combinación incluye la administración de un compuesto de la presente descripción, o una sal farmacéuticamente aceptable, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato del mismo y al menos un segundo agente como parte de un régimen de tratamiento específico destinado a proporcionar el efecto beneficioso de la coacción de estos agentes terapéuticos. El efecto beneficioso de la combinación incluye, pero no se limita a, un efecto cooperativo, por ejemplo, sinérgico, y/o una co-acción farmacocinética o farmacodinámica, o cualquier combinación de los mismos, resultante de la combinación de agentes terapéuticos. La administración de estos agentes terapéuticos en combinación típicamente se lleva a cabo durante un periodo de tiempo definido (usualmente minutos, horas, días o semanas dependiendo de la combinación seleccionada). La terapia de combinación puede ser, pero generalmente no está, destinada a abarcar la administración de dos o más de estos agentes terapéuticos como parte de regímenes de monoterapia separados que incidentalmente y arbitrariamente dan como resultado las combinaciones de la presente solicitud.

La terapia de combinación pretende abarcar la administración de estos agentes terapéuticos de una manera secuencial, en la que cada agente terapéutico se administra en un tiempo diferente y en cualquier orden, o en alternancia y en cualquier orden, así como la administración de estos agentes terapéuticos, o al menos dos de los agentes terapéuticos, de manera sustancialmente simultánea. La administración sustancialmente simultánea se puede llevar a cabo, por ejemplo, administrando al sujeto una cápsula única que tiene una relación fija de cada agente terapéutico o en múltiples cápsulas individuales para cada uno de los agentes terapéuticos.

IMPI σι

100

La administración secuencial o sustancialmente simultánea de cada agente terapéutico puede efectuarse por cualquier vía apropiada incluyendo, pero sin limitarse a, vías orales, vías intravenosas, vías intramusculares y absorción directa a través de tejidos de membrana mucosa. Los agentes terapéuticos se pueden administrar por la misma ruta o por vías diferentes. Por ejemplo, un primer agente terapéutico de la combinación seleccionada puede administrarse por inyección intravenosa mientras que los otros agentes terapéuticos de la combinación pueden administrarse por vía oral. Alternativamente, por ejemplo, todos los agentes terapéuticos pueden administrarse por vía oral o todos los agentes terapéuticos pueden administrarse por inyección intravenosa. La secuencia en la que se administran los agentes terapéuticos no es estrechamente crítica.

Todos los porcentajes y las relaciones que se utilizan en la presente, a menos que se indique de otro modo, están en peso. Otras características y ventajas de la presente descripción resultarán evidentes a partir de los diferentes ejemplos. Los ejemplos proporcionados ilustran diferentes componentes y metodología útiles en la práctica de la presente solicitud. En términos generales, la descripción se extiende a cualquier característica novedosa o cualquier combinación novedosa de las características descritas en esta especificación (incluyendo las reivindicaciones y dibujos anexos). Los ejemplos no limitan la descripción reclamada. De esta manera, los rasgos, números enteros, características, compuestos o radicales químicos descritos en conjunto con un aspecto, modalidad o ejemplo particular de la descripción deben entenderse como que se aplican a cualquier otro aspecto, modalidad o ejemplo descrito aquí a menos que sean incompatibles con los mismos. Basándose en la presente descripción, el experto en la técnica puede identificar y emplear otros componentes y metodología útiles para practicar la presente descripción. Por otra parte, a menos que se indique de otra manera, cualquier característica descrita en este documento puede ser sustituida por una característica alternativa que sirva para el mismo propósito o uno similar.

La descripción se describirá ahora a modo de ejemplo solamente con referencia a los ejemplos siguientes:

EJEMPLOS

I.

Preparación del compuesto

Métodos y materiales generales

Todos los productos químicos se adquirieron de Sigma-Aldrich, Alfa Aesar. Los espectros de^xH RMN se registraron en 200 y 400 MHz y los espectros ¹³C RMN se registraron en 100.6 y 50.3 MHz usando solventes deuterados indicados abajo. La TLC se realizó sobre placas de sílice con respaldo de aluminio (gel de sílice 60 F254). Todas las reacciones se realizaron en

ΙΜΡΙ

101 atmósfera de nitrógeno usando solventes destilados. Se encontró que todos los compuestos ensayados tenían una pureza > 95% determinada por análisis de HPLC. Se obtuvo agua de grado HPLC a partir de un aparato Milli-Ro/Milli-Q en tándem. Las mediciones HPLC analíticas se realizaron en una Shimadzu LC-20AProminence equipada con un módulo de bus de comunicación CBM-20A, dos bombas de pistón doble LC-20AD, un detector de matriz de fotodiodos SPD-M20A y un inyector Rheodyne 7725i con un bucle de acero inoxidable de 20 μΙ.

REACCION QUIMICA 1

Preparación del intermedio 1.4

NC

NC

CO₂Et

K₂CO₃, EtOH,

NH

1.1 h₂n

NH₂

1.2

1.3

Reflujo

1.4

EJEMPLO 1

Preparación del intermedio 1.4

A una solución agitada del compuesto 1.1 (0.52 mi, 4.9 mmol), 1.2 (372 mg, 4.9 mmol) y 1.3 (0.5 mL, 0.83 mL, 4.9 mmol) en etanol (25 mL) se añadió K₂CO₃ (812 mg, 5.88 mmol). La agitación se continuó durante la noche a reflujo. El sólido de color amarillo pálido se recogió después de enfriar, se recogió con agua hirviendo y se filtró de nuevo. La fase acuosa se acidificó a pH 5 con AcOH (15 gotas), el precipitado se filtró y se secó al vacío. El compuesto del título 1.4 se obtuvo como un sólido amarillo pálido (500 g, 2.18 mmol). Rendimiento 44%.

REACCION QUIMICA 2

Preparación del intermedio 2.2

NC

NC

CO₂Et +

H₂N nh₂

K₂CO₃, EtOH,

NH

Reflujo

1.1

1.2

2.1

2.2

H

IMPI

102

EJEMPLO 2

Preparación del intermedio 2.2

A una solución agitada del compuesto 1.1 (0.96 g, 8.8 mmol), 1.2 (672 mg, 8.8 mmol) y 2.1 (Ig, 0.83 mi) en etanol (55 mL) se añadió K₂CO₃ (1.57 g, 11.44 mmol). La agitación se continuó durante la noche a reflujo. El sólido amarillento se recogió después de enfriar, se recogió con agua caliente y se filtró de nuevo. La fase acuosa se acidificó a pH 1, el precipitado se filtró y se secó al vacío. El compuesto del título 2.2 se obtuvo como un sólido amarillento (1 g, 4.25 mmol). Rendimiento 49%?H RMN (200 MHz, DMSO) δ 7.22 (m, 1H), 7.68 (m, 1H), 7.85 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 8.05 (s, 1H).

REACCION QUIMICA 3

Preparación del intermedio 3.2

NC

CO₂Et + h₂n

NH₂

<img file="MX389591B_D0090.tif" />

Η

3.1

K₂CO_3t EtOH,

Reflujo

1.1

1.2

NC

NH

3.2

EJEMPLO 3

Preparación del intermedio 3.2

A una solución agitada del compuesto 1.1 (0.96 mL, 8.8 mmol), 1.2 (672 mg, 8.8 mmol) y 3.1 (Ig, 1.29 mi) en etanol (55 mL) se añadió K₂CO₃ (1.57 g, 11.44 mmol). La agitación se continuó durante la noche a reflujo. El sólido amarillento se recogió después de enfriar, se recogió con agua caliente y se filtró de nuevo. La fase acuosa se acidificó a pH 1, el precipitado se filtró y se secó al vacío. El compuesto del título 3.2 se obtuvo como un sólido amarillento (1 g, 4.25 mmol). Rendimiento 49%.

IMPI

103

REACCION QUIMICA 4

Preparación del intermedio 4.2

NC

NH

NC

CO₂Et +

Piperidina, EtOH

H₂N nh₂

Reflujo

1.1

1.2

4.1

4.2

EJEMPLO 4

Preparación del intermedio 4.2

A una solución agitada del compuesto 1.1 (1.42 mL, 13.37 mmol), 1.2 (1.01 g, 13.3 mmol) y 4.1 (1.62 mL, 13.3 mi) en etanol (50 mL) se añadió piperidina (2.64 mL, 26.7 mmol). La agitación se continuó durante la noche a reflujo. El sólido se recogió después de enfriar, se recogió con agua caliente y se filtró de nuevo. La fase acuosa se acidificó a pH 1 y se extrajo con EtOAc (3 x 25 mi). La fase orgánica se lavó con salmuera y se secó sobre Na₂SO₄. La parte cruda de reacción se purificó por cromatografía instantánea (CHCI₃/MeOH como gradiente, de 0 a 2% de producto), para producir el compuesto del título 4.2 (930 mg, 3.95 mmol) como un sólido blanco. Rendimiento 30%.

REACCION QUIMICA 5

Preparación del intermedio 5.2

NC

NH

NC

CO₂Et ⁺

H₂N nh₂

N^

K₂CO₃₁ EtOH

Reflujo

1.1

1.2

5.1

5.2

EJEMPLO 5

Preparación del intermedio 5.2

A una solución agitada del compuesto 1.1 (0.49 mL, 4.67 mmol), 1.2 (355 mg, 4.67 mmol) y 5.1 (0.44 mi, 4.67 mmol) en etanol (25 mL) se añadió K₂CO₃ (773 mg, 5.6 mmol). La agitación se continuó durante la noche a reflujo. El sólido blanco se recogió después de enfriar, se w

&lt;0 σι

IMPI

104

<img file="MX389591B_D0091.tif" />

secó al vacío y se usó para la siguiente etapa sin purificación adicional. El compuesto del título 5.2 se obtuvo como un sólido blanco (300 mg, 1.3 mmol). Rendimiento 29%?H RMN (400 MHz, DMSO) δ 7.64 (d, J = 4.7 Hz, 2H), 8.78 (d, J= 4.7 Hz, 2H), 12.98 (s, 1H).

REACCION QUIMICA 6

Preparación del intermedio 6.2

NC

CO₂Et

OEt

H₂N nh₂

6.1

1.2

EtO‘Na⁺, EtOH

Reflujo

NC

NH

6.2

EJEMPLO 6

Preparación del intermedio 6.2

A una solución agitada NaOEt (1.02 mL, 2.73 mmol) en EtOH abs (20 mi) se añadió el compuesto 6.1 (500 mg, 2.73 mmol) y 1.2 (207 mg, 2.73 mmol).

agitación se continuó a reflujo durante 4 horas. Los volátiles se eliminaron bajo vacío. El crudo de reacción se recogió con agua y se acidificó con AcOH. Se recogió el precipitado disuelto en agua, se lavó con una mezcla de CHCI3 y MeOH. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (3 X 20 mi). La fase orgánica recolectada se lavó con salmuera, se secó sobre Na₂SO4. El compuesto del título 6.2 se obtuvo como un sólido blanco (250 mg, 1.49 mmol). Rendimiento 55%.

REACCIÓN QUÍMICA 7

Preparación del intermedio 7.3

OK⁺

NC

CO₂Et ⁺

EtOH, piperidina

NC

OEt

K₂CO₃, EtOH,

NC

H₂N nh₂

Reflujo

SK⁺

1.1

7.1

7.2

1.2

EJEMPLO 7A

Preparación del intermedio 7.2

A una solución agitada del compuesto 1.1 (0.14 mL, 1.3 mmol) y 7.1 (150 mg, 1.3 mmol) en EtOH (5 mL) se añadió piperidina (1 gota). La agitación se continuó durante la noche a

IMPI

105 temperatura ambiente. El solvente se eliminó bajo vacío. La parte cruda de la reacción se purificó por cromatografía instantánea para producir el compuesto del título 7.2 (160 mg, 0.77 mmol) como un sólido amarillento. Rendimiento 58%.

EJEMPLO 7B

Preparación del intermedio 7.3

A una suspensión agitada del compuesto 7.2 (150 mg, 0.72 mmol) y el compuesto 1.2 (55 mg, 0.72 mmol) en EtOH (5 mL) se añadió K₂CO₃ (99 mg, 0.72 mmol). La agitación se continuó durante la noche a reflujo. El precipitado blanco se recolectó y se utilizó para el paso siguiente sin purificación adicional. El compuesto del título 7.3 (150 mg, 0.48 mmol) se obtuvo como un sólido amarillento como sal de ¿//-potasio. Rendimiento 67%.

REACCION QUIMICA 8

Preparación del intermedio 8.5

8.1

NaOH

NaHCO₃. NH₂OH*HCI

H₂O, EtOH. 80 °C;

Ν'θ ¿ /=0

N H

NBS, AIBN,

Br

8.4

CCI4 reflujo;

NH

N' H

8.2

NH

OH

8.5

CIOCOOEt, Me₂CO

NaOH, H₂O

N'Q

L )=o

8.3

OEt

EJEMPLO 8A

Preparación del intermedio 8.2

A una solución agitada de NH₂OH*HCI y NaHCO₃ en agua (7 mL) se añadió gradualmente una solución de m-tolunitrilo (8.1) (2 mL, 17.0 mmol) en EtOH (13.3 mL). La agitación se continuó a 80°C durante 4 horas. Los volátiles se eliminaron bajo vacío. El crudo de reacción se recogió con agua, se extrajo con EtOAc (3 x 25 mi). La fase orgánica se recolectó, se lavó con salmuera y se secó sobre Na₂SO₄ para producir el compuesto del título 8.2 (1.5 g, 9 mmol) como un sólido blanco. Rendimiento 59%.

IMPI

106

EJEMPLO 8B

Preparación del intermedio 8.3

A una solución del compuesto 8.2 (Ig, 6 mmol) en acetona seca (5 mL), se añadió a gotas a 0 °C EtOCOCI (0.63 mL, 6.6 mmol). Se continuó la agitación a esta temperatura durante 1 h. A continuación, se añadió a la mezcla una solución de NaOH al 5%. La agitación se continuó durante 1 h adicional. El solvente se retiró al vacío. El crudo de reacción se vertió en agua, se extrajo con EtOAc (3 x 50 mi). La fase orgánica recolectada se lavó con salmuera, se secó sobre Na₂SO₄. El compuesto del título 8.3 (600 mg, 2.7 mmol) se obtuvo como un sólido blanco. Rendimiento 45%.

EJEMPLO 8C

Preparación del intermedio 8.4

A una solución del compuesto 8.3 (300 mg, 1.35 mmol) en EtOH abs (5 mL) se añadió sodio (50 mg) en porciones. La agitación se continuó a temperatura ambiente durante 4 h adicionales. La reacción se inactivó mediante la adición de MeOH. El solvente se eliminó a presión reducida y el producto bruto se purificó por cromatografía Instantánea. El compuesto del título 8.4 (150 mg, 0.85 mmol) se obtuvo como un sólido blanco. Rendimiento 63%.

EJEMPLO 8D

Preparación dei intermedio 8.5

A una suspensión del compuesto 8.4 (326 mg, 1.85 mmol) en CCI₄ (10 mL) se añadió AIBN (60.7 mg, 0.37 mmol) y NBS (493 mg, 2.77 mmol). La agitación se continuó durante la noche a reflujo. El solvente fue removido bajo presión reducida. La reacción se recogió con agua, se extrajo con EtOAc (3 x 20 mi) se lavó con salmuera y se secó sobre Na₂SO₄. El crudo se purificó por cromatografía instantánea, eluyendo con éter de petróleo (éter de petróleo)/EtOAc (30% para el producto) para producir el compuesto del título 8.5 (280 mg, 1.09 mmol) se obtuvo como un sólido blanco. Rendimiento 59%.

IMPI

107

REACCION QUIMICA 9

Preparación del intermedio 9.2

NBS, AIBN

CCI4 reflujo;

9.1

9.2

EJEMPLO 9

Preparación del intermedio 9.2

A una suspensión del compuesto 9.1 (750 mg, 5 mmol) en CCI₄ (15 mL) se añadió AIBN (41 mg, 0.25 mmol) y NBS (933.7 mg, 5.24 mmol). La agitación se continuó durante la nochea reflujo. El solvente fue removido bajo presión reducida. La reacción se recogió con agua, se extrajo con EtOAc (3 x 20 mi) se lavó con salmuera y se secó sobre Na₂SO₄. El crudo se purificó por cromatografía instantánea, eluyendo con CH^I^MeOH (3% para el producto) para producir el compuesto del título 9.2 (800 mg, 3.49 mmol) como un sólido blanco. Rendimiento 70%.

REACCION QUIMICA 10

Preparación del intermedio 10

Et₃NH⁺CI-, NaN₃

N n

N H

NBS, AIBN,

Br

10.1 tolueno, 110°C

CH₃CN, reflujo;

10.2

10.3

EJEMPLO 1OA

Preparación del intermedio 10.2

Una mezcla del compuesto 10.1 (1.02 mL, 8.54 mmol), NaN₃ (832 mg, 12.8 mmol) y

Et₃N*HCI (1.76 g, 12.8 mmol) se calentó a reflujo durante 4 h. El solvente se eliminó a vacío. El producto crudo se vertió en agua, se acidificó a pH 1 con HCI 3N y se extrajo con EtOAc (3 x 20 mi). La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na₂SO₄ y se concentró a presión reducida. El compuesto del título 10.2 (1.22 g, 7.6 mmol) se obtuvo como un sólido blanco. Rendimiento 89%.

£

IMPI

108

EJEMPLO 10B

Preparación del intermedio 10.3

A una suspensión del compuesto 10.2 (300 mg, 1.87 mmol) en CH₃CN (15 mi) se añadió AIBN (31 mg, 0.18 mmol) y NBS (333 mg, 1.87 mmol). La agitación se continuó durante la noche a reflujo. El solvente fue removido bajo presión reducida. La reacción se recogió con agua, se extrajo con EtOAc (3 x 20 mL) se lavó con salmuera y se secó sobre Na₂SO₄. El crudo se purificó por cromatografía instantánea, eluyendo con CH^I^MeOH (7% para el producto) para producir el compuesto del título 10.3 (150 mg, 0.62 mmol) como un sólido amarillo ligero. Rendimiento 34%.

REACCION QUIMICA 11

Preparación del intermedio 11.3

OH

OH

11.1 nh₂

Cl

Br

CH₂CI₂, Et₃N i

Br

11.2

11.3

EJEMPLO 11

Preparación del intermedio 11.3

A una solución del compuesto 11.1 (2.5 g, 23 mmol) en CH₂CI₂ (25 mi) se añadió piridina (1.63 mi, 20.3 mmol) y el compuesto 11.2 (1.68 mL, 20.3 mmol). La agitación se continuó durante la noche a temperatura ambiente. El solvente fue removido bajo presión reducida. La reacción se toma con agua, se extrae con CH₂CI₂ (3 x 30 mL) se lavó con salmuera y se secó sobre Na₂SO₄. El producto crudo se purificó por cromatografía instantánea, eluyendo con éter de petróleo/EtOAc (25% para el producto) para producir el compuesto del título 11.3 (735 mg, 3.19 mmol) como un sólido pardusco. Rendimiento 14%.

w &lt;0 en

CD

ΙΜΡΙ

109

REACCION QUIMICA 12

Preparación del intermedio 12.2

OEt

EtO‘Na⁺, EtOH

NH

12.1 h₂n nh₂

Reflujo

1.2

12.2

EJEMPLO 12

Preparación del intermedio 12.2

A una solución del compuesto 12.1 (2 g, 10.41 mmol) en EtOH (15 mL) se añadió EtONa (7 mL, 18.7 mmol) y el compuesto 1.2 (1.18 g, 15.61 mmol). La agitación se continuó durante la noche a reflujo. El solvente fue removido bajo presión reducida. La reacción se toma con agua, se acidificó a pH 3, se extrajo con EtOAc (3 x 20 mL) se lavó con salmuera y se secó sobre Na₂SO₄. El crudo se purificó por cromatografía instantánea, eluyendo con CH^I^MeOH (2.5% para el producto) para producir el compuesto del título 12.2 (500 mg, 2.44 mmol) como un sólido blanco. Rendimiento 24%.

REACCION QUIMICA 13

Preparación del intermedio 13.2 o

<img file="MX389591B_D0092.tif" />

13.1

Cl o

LDA, THF, EtOAc

-78 °C o

<img file="MX389591B_D0093.tif" />

13.2

OEt

EtO‘Na⁺, EtOH

H₂N nh₂

Reflujo

NH

S

1.2

13.3

EJEMPLO 13A

Preparación del intermedio 13.2

A una solución agitada de DIPA (7.6 mL, 54 mmol) en THF (53 mL) se añadió n-BuLi (21.6 mL) a 0 °C. Se continuó la agitación a esta temperatura 10 minutos. La mezcla se enfrió a continuación a -78°C y se añadió gota a gota EtOAc (2.4 mi, 27 mmol). Se continuó la agitación a esta temperatura durante 30 minutos. Después de eso, una solución del compuesto 13.1 (3 mL, 27 mmol) en THF (20 mL) se añadió en gotas. La reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. El crudo de reacción se vertió en agua y se extrajo con EtOAc (3 x 30 mi).

IMPI

110

La fase orgánica recogida se lavó con salmuera, se secó sobre Na₂SO₄ y se concentró al vacío. El compuesto del título 13.2 se obtuvo como un aceite pardusco (4.8 g, 24.3 mmol). Rendimiento 90%.

EJEMPLO 13B

Preparación del intermedio 13.3

A una solución del intermedio 13.2 (2 g, 10 mmol) en EtOH (15 mL) se añadió EtONa (21% p/p en EtOH) (7.5 mL, 20 mmol) y el compuesto 1.2 (1.15 g, 15.1 mmol). La agitación se continuó durante la noche a reflujo. El solvente fue removido bajo presión reducida. La reacción se tomó con agua. A pH 10 se recuperó el material de partida sin reaccionar. A continuación, la mezcla se acidificó a pH 5, se extrajo con EtOAc (3 x 20 mi) se lavó con salmuera y se secó sobre Na₂SO₄. La parte cruda se purificó por cromatografía instantánea, eluyendo con CH^I^MeOH (7% para el producto) para producir el compuesto del título 13.3 (435 mg, 2.06 mmol) como un sólido amarillento. Rendimiento 21%.

REACCION QUIMICA 14

Preparación del Compuesto 1

NC

NH

X^X^N

Cl

K₂CO₃ch₃cn

Reflujo

NC

NH

X^X^N

1.4 ácido 3-(Clorometil)benzoico

EJEMPLO 14

Preparación del Compuesto 1

A una suspensión agitada del intermedio 1.4 (1.6 g, 6.98 mmol) y K₂CO₃ (2.88 g, 20.9 mmol) en CH₃CN (80 mL) se añadió ácido 3-(clorometil)benzo¡co (1.19 g, 6.98 mmol). La agitación se continuó durante la noche a reflujo. Los volátiles se eliminaron bajo vacío. El crudo se recogió con agua, se acidificó a pH 5 y se lavó con EtOAc para eliminar las impurezas. A continuación, el pH se ajustó a 3/4 y la mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 50 mi). La titulación con acetona caliente proporcionó el compuesto 1 (936 mg, 2.78 mmol) como un sólido amarillento. Rendimiento 40%. ^rH RMN (400 MHz, DMSO) δ 4.58 (s, 2H), 7.44 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 7.54-7.61 (m, 3H), 7.67 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.91 (d, 7 = 7.27 Hz, 2H), 8.04 (s, 1H), 13

IMPI

111 (s, 1H); ¹³C RMN (100 MHz, DMSO) δ 33.5, 93.2, 115.6, 128.2, 128.4, 128.4, 128.5, 128.5, 128.6, 129.7, 130.8, 131.5, 133.3, 135.1, 137.4, 165.4, 166.8, 167.3. HPLC: 96.3%

REACCION QUIMICA 15

Preparación del Compuesto 4

NC

NH

Cl

K₂CO₃ch₃cn

Reflujo

NC

NH s

<img file="MX389591B_D0094.tif" />

CO₂H

2.2 ácido 3-Clorometilbenzoico

EJEMPLO 15

Preparación del Compuesto 4

A una suspensión agitada del intermedio 2.2 (250 mg, 1.06 mmol) y K₂CO₃ (440 mg, 3.18 mmol) en CH₃CN (15 mL) se añadió ácido 3-(clorometil)benzoico (180 mg, 1.06 mmol). La agitación se continuó durante la noche a reflujo. Los volátiles se eliminaron bajo vacío. La parte cruda se recogió con agua, se lavó con EtOAc, se acidificó a pH 1 y se extrajo con EtOAc (3 x 50 mi). La titulación con acetona caliente proporcionó el compuesto 4 (45 mg, 0.12 mmol) como un sólido amarillento. Rendimiento 12%. ^XH RMN (400 MHz, DMSO) δ 4.62 (s, 2H), 7.33 (t, J = 4.3 Hz, 1H), 7.44 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.72 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 8.05 (m, 2H), 8.26 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 12.99 (s, 1H); ¹³C RMN (100 MHz, DMSO) δ 33.9, 88.7, 116.5, 128.8, 129.3, 129.9, 130.2, 131.5, 132.1, 133.7, 135.4, 137.9, 139.7, 159.0, 161.2, 165.3, 167.4. HPLC: 97.2%

REACCION QUIMICA 16

Preparación del Compuesto 3

NC

NH

Cl

K₂CO₃ch₃cn reflujo

NC

NH /V/YxzCOpH

3.2 ácido 3-(Clorometil)benzoico

ΙΜΡΙ

112

EJEMPLO 16

Preparación del Compuesto 3

A una suspensión agitada del intermedio 3.2 (250 mg, 1.06 mmol) y K₂CO₃ (440 mg, 3.18 mmol) en CH₃CN (15 mL) se añadió ácido 3-(clorometil)benzoico (180 mg, 1.06 mmol). La agitación se continuó durante la noche a reflujo. Los volátiles se eliminaron bajo vacío. La parte P cruda se recogió con agua, se lavó con EtOAc, se acidificó a pH 1 y se extrajo con EtOAc (3 x 50 mi). La titulación con una mezcla de Et₂O/acetona produjo el compuesto 3 (260 mg, 0.7 mmol) como un sólido amarillento. Rendimiento 70%. ^JH RMN (400 MHz, DMSO) δ 4.63 (s, 2H), 7.44 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.69 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.74 (dd, J = 5 Hz, J = 2.9 Hz, 1H), 7.84 (m, 2H), 8.05 (s, 1H), 8.58 (m, 1H), 13.0 (s, 1H); ¹³C RMN (100 MHz, DMSO) δ 35.3, 90.1, 118.0, 130.2, 130.7, 131.3, 131.6, 132.9, 133.5, 135.1, 136.8, 139.3, 141.1, 160.4, 162.7, 166.7, 168.8. HPLC: 95.0%

REACCION QUIMICA 17

Preparación del Compuesto 6

NH

Cl /\z^/CO₂H

K₂CO₃CH₃CN reflujo

NH

4.2 ácido 3-(Clorometil)benzoico

EJEMPLO 17

Preparación del Compuesto 6

A una suspensión agitada del intermedio 4.2 (250 mg, 1.18 mmol) y K₂CO₃ (495 mg, 3.56 mmol) en CH₃CN (15 mL) se añadió ácido 3-(clorometil)benzoico (202 mg, 1.18 mmol). La agitación se continuó durante la noche a reflujo. Los volátiles se eliminaron bajo vacío. La parte cruda se tomó con agua, se lavó con EtOAc, se acidificó a pH 1 y se extrajo con EtOAc (3 x 50 mi). La titulación con Et₂O produjo el compuesto 6 (90 mg, 0.24 mmol) como un sólido blanco. Rendimiento 21%. ^TH RMN (400 MHz, DMSO) δ 1.24 (m, 3H), 1.60 (m, 7H), 2.74 (m, 1H), 4.52 (s, 2H), 7.45 (t, J= 7.18 Hz, 1H), 7.67 (d, J= 6.83 Hz, 1H), 7.82 (d, J= 7.17 Hz, 1H), 8.04 (s, 1H), 13.0 (s, 1H).¹³C RMN (100 MHz, DMSO) δ 25.4, 25.7, 25.7, 30.3, 30.3, 33.8, 44.9, 94.1, 115.3, 128.6, 129.2, 130.1, 131.3, 133.6, 138.5, 161.1, 166.2, 167.4, 177.9. HPLC: 98.1%

ΙΜΡΙ

113

REACCION QUIMICA 18

Preparación del Compuesto 7

NC

NH

Cl

DIPEA DMSO

NC

NH

5.2 ácido 3-(Clorometil)benzoico

EJEMPLO 18

Preparación del Compuesto 7

A una suspensión agitada del intermedio 5.2 (220 mg, 0.95 mmol) and DIPEA (0.18 mi, 1.05 mmol) en DMSO (5 mi) se añadió ácido 3-(clorometil)benzoico (178 mg, 1.05 mmol). La agitación se continuó durante la noche a temperatura ambiente. El sólido amarillo claro se recogió, se lavó con hielo triturado y agua, y se secó al vacío. La trituración con EtOAc caliente proporcionó el compuesto 7 (180 mg, 0.49 mmol) como un sólido amarillo ligero. Rendimiento 53%. ^XH RMN (400 MHz, DMSO) δ 4.55 (s, 2H), 7.44 (m, 1H), 7.66 (d, J = 6 Hz, 1H), 7.81 (m, 3H), 8.02 (s, 1H), 8.80 (s, 2H), 13.1 (s, 1H);

¹³C RMN (100 MHz, DMSO) δ 34.1, 94.8, 115.8, 122.8, 122.8, 128.7, 129.2,

130.4, 131.3, 133.9, 138.1, 143.1, 150.5, 150.5, 161.8, 165.7, 167.4, 167.4. HPLC: 95.1%

REACCION QUIMICA 19

Preparación del Compuesto 11

NH

S

Cl

K₂CO₃

CO₂H CH₃CN

NH

Br₂, PbO₂AcOH

Br

NH

12.2 reflujo íí ácido 3-Clorometilbenzoico

EJEMPLO 19A

Preparación del Compuesto 14

A una suspensión agitada del intermedio 12.2 (100 mg, 0.43 mmol) y K₂CO₃ (178 mg, 1.29 mmol) en CH₃CN (15 mL) se añadió ácido 3(clorometil)benzoico (74 mg, 0.43 mmol). La agitación se continuó durante la noche a reflujo. Los volátiles se eliminaron bajo vacío. La parte

IMPI σι

114 cruda se tomó con agua, se lavó con EtOAc, se acidificó a pH 3 y se extrajo con EtOAc (3 x 50 mi). La titulación con una mezcla de Et₂O/Acetona produjo el compuesto 14 (30 mg, 0.088 mmol) como un sólido blanco. Rendimiento 21%. ^XH RMN (400 MHz, DMSO) δ 4.59 (s, 2H), 6.69 (s, 1H), 7.41 (m, 1H), 7.46 (m, 3H), 7.71 (d, 7 = 7.5 Hz, 1H), 7.81 (d, 7= 7.74 Hz, 1H), 8.06 (m, 3H), 12.85 (s, 2H). ¹³C RMN (100 MHz, DMSO) δ 33.8, 127.3, 127.3, 128.5, 129.1, 129.2, 130.1, 131.0, 131.3, 131.5, 133.6, 136.3, 138.8, 167.5.

EJEMPLO 19B

Preparación del compuesto 11

A una solución agitada del compuesto 14 (100 mg, 0.29 mmol) en ácido acético (5 mi) se añadió dióxido de plomo (77.2 mg, 0.32 mmol) y bromo (0.02 mL, 0.32 mmol). La agitación continuó durante 6 horas a temperatura ambiente. La mezcla se vertió en una solución de Na₂S₂O₅ y se extrajo con EtOAc (3 x 20 mL). Las fases orgánicas recogidas se lavaron con agua y salmuera y después se secaron sobre Na₂SO₄. La titulación con una mezcla de Et₂O/Acetona produjo el compuesto 11 (40 mg, 0.09 mmol) como un sólido blanco. Rendimiento 33%.^XH RMN (400 MHz, DMSO) δ 4.44 (s, 2H), 7.42 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.48 (m, 3H), 7.61-7.65 (m, 3H), 7.82 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 8.0 (s, 1H), 13.1 (m, 2H). ¹³C RMN (100 MHz, DMSO) δ 33.9, 128.4, 128.6, 129.14, 129.3, 129.3, 129.3, 130.1, 130.2, 131.3, 133.9, 138.1, 138.4, 167.5. HPLC: 94.2%

REACCION QUIMICA 20

Preparación del compuesto 12

13.3

NH

Y ci

K₂CO₃

CH₃CN

NH

Br₂, PbO₂AcOH

Br reflujo ácido 3-Clorometilbenzoico

NH

Y

EJEMPLO 20A

Preparación del compuesto 15

A una suspensión agitada del intermedio 13.3 (235 mg, 1.11 mmol) y K₂CO₃ (460 mg, 3.33 mmol) en CH₃CN (15 mL) se añadió ácido 3-(clorometil)benzoico (190 mg, 1.11 mmol). La agitación se continuó durante la noche a reflujo. Los volátiles se eliminaron bajo vacío. La parte cruda se tomó con agua, se lavó con EtOAc, se acidificó a pH 3 y se extrajo con EtOAc (3 x 50 mi).

IMPI

115

La titulación con una mezcla de Et₂O/Acetona produjo el compuesto 15 (150 mg, 0.44 mmol) como un sólido blanco. Rendimiento 39%. ^XH RMN (400 MHz, DMSO) δ 4.55 (s, 2H), 6.64 (s, 1H), 7.19 (dd, J= 4.9 Hz, J= 3.8 Hz, 1H), 7.43 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 7.74 (d, 7= 7.6 Hz, 1H), 7.77 (d, J= 4.9 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 8.08 (s, 1H), 12.80 (s, 2H). ¹³C RMN (100 MHz, DMSO) δ 33.5, 101.6, 128.1, 128.6, 129.1, 129.1, 130.1, 131.1, 131.4, 133.7, 138.9, 141.7, 167.4.

EJEMPLO 20B

Preparación del compuesto 12

A una solución agitada del compuesto 15 (134 mg, 0.39 mmol) en ácido acético (5 mi) se añadió dióxido de plomo (102 mg, 0.42 mmol) y bromo (0.022 mL, 0.42 mmol). La agitación continuó durante 6 horas a temperatura ambiente. La mezcla se vertió en una solución de Na₂S₂O₅ y se extrajo con EtOAc (3 x 20 mL). Las fases orgánicas recogidas se lavaron con agua y salmuera y después se secaron sobre Na₂SO₄. La parte cruda de la reacción se sometió a purificación por cromatografía instantánea eluyendo con CH^I^MeOH (10% para el producto). El compuesto 12 (45 mg, 0.11 mmol) se obtuvo como un sólido blanco. Rendimiento 27%. ^XH RMN (400 MHz, DMSO) δ 4.56 (s, 2H), 7.27 (t, J= 3.5 Hz, 1H), 7.44 (t, 7 = 7.6 Hz, 1H), 7.72 (d, 7= 7.5 Hz, 1H), 7.82 (d, 7 = 7.7 Hz, 1H), 7.92 (d, 7= 4.5 Hz), 8.07 (s, 1H), 8.33 (d, 7= 2.9 Hz, 1H), 13.1 (m, 2H). ¹³C RMN (100 MHz, DMSO) δ 33.8, 128.6, 128.7, 128.7, 129.2, 130.1, 131.4, 132.3, 132.8, 133.6, 138.3, 141.1, 152.1, 158.5, 159.6, 167.4. HPLC: 95.2%

REACCION QUIMICA 21

Preparación del compuesto 13

NCS

NH

Cl

AcOH

NH

AAn

AAn o₂h

EJEMPLO 21

Preparación del compuesto 13

A una solución agitada del compuesto 14 (100 mg, 0.29 mmol) en ácido acético (5 mL) se añadió dióxido de plomo (55.8 mg, 0.35 mmol) y /V-clorosuccinimida (47 mg, 0.35 mmol). La

IMPI

116 agitación continuó durante 6 horas a temperatura ambiente. La mezcla se vació en agua y se extrajo con EtOAc (3 x 20 mi). Las fases orgánicas recogidas se lavaron con agua y salmuera y después se secaron sobre Na₂SO₄. La titulación con una mezcla de Et₂O/acetona produjo el compuesto 13 (40 mg, 0.1 mmol) como un sólido blanco. Rendimiento 37%.^ RMN (400 MHz, DMSO) δ 4.47 (s, 2H), 7.43 (t, 7 = 7.7 Hz, 1H), 7.49 (m, 3H), 7.64 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 7.71 (m, 2H), 7.83 (d, 7= 7.5 Hz, 1H), 8.02 (s, 1H), 13.1 (s, 1H), 13.25 (s, 1H); ¹³C RMN (100 MHz, DMSO) δ 33.9, 128.4, 128.4, 128.6, 129.1, 129.4, 130.2, 131.3, 131.3, 133.8, 136.5, 138.3, 167.5. HPLC: 95.3%

REACCION QUIMICA 22

Preparación del compuesto 22 ci

NC

NH

POCI₃, 70 ’C

NC rf^r'N

EJEMPLO 22

Preparación del compuesto 22

Una suspensión agitada del compuesto 1 (160 mg, 0.44 mmol) y POCI₃ (3 mi) se calentó a 70°C durante 6 h. La suspensión blanca se volvió roja. El exceso de POCI₃ fue cuidadosamente destruido con hielo triturado y luego agua. La mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 20 mi). La fase orgánica recogida se lavó con salmuera, se secó sobre Na₂SO₄y se evaporó. Purificación por cromatografía instantánea (gradiente CH^I^MeOH) produjo el compuesto del título 22 (60 mg, 0.16 mmol) como un sólido blanco. Rendimiento 36%. *H RMN (400 MHz, DMSO) δ 4.58 (s, 2H), 7.44 (t, 7.7 Hz, 1H), 7.58-7.62 (m, 2H), 7.66 (d, 7= 7.17 Hz, 1H), 7.70 (d, 7= 7.7 Hz, 1H), 7.82 (d, 7= 7.7 Hz, 1H), 7.94 (d, 7= 7.1 Hz, 2H), 8.08 (s, 1H), 12.98 (s, 1H); ¹³C RMN (100 MHz, DMSO) δ 34.9, 102.5, 115.2, 128.7, 129.2, 129.2, 129.6, 129.6, 130.4, 131.4, 132.7, 133.9, 134.7, 138.0, 162.9, 167.5, 169.0, 174.3. HPLC: 98.8%

IMPI

117

REACCION QUIMICA 23

Preparación del compuesto 10

NH

Cl

K₂CO₃ch₃cn reflujo

NC

NH

6.2

Ácido

3-(Clorometil)benzoico

EJEMPLO 23

Preparación del compuesto 10

A una suspensión agitada del intermedio 6.2 (145 mg, 0.86 mmol) y K₂CO₃ (599 mg, 4.33 mmol) en CH₃CN (15 mL) se añadió ácido 3-(clorometil)benzoico (148 mg, 0.86 mmol). La agitación se continuó durante la noche a reflujo. Los volátiles se eliminaron bajo vacío. La parte cruda se tomó con agua, se lavó con EtOAc, se acidificó a pH 3 y se extrajo con EtOAc (3 x 50 mi). La parte cruda de la reacción se purificó por cromatografía instantánea, eluyendo con (CH₂Cl2/ MeOH + ACOH 3%) para producir el compuesto del título 10 (60 mg, 0.2 mmol) como un sólido blanco. Rendimiento 23%. ^XH RMN (400 MHz, DMSO) δ 2.44 (s, 3H), 4.49 (s, 2H), 7.45 (t, J = 7.6 Hz, IH), 7.68 (d, J = 7.4 Hz, IH), 7.82 (d, J= 7.6 Hz, IH), 8.05 (m, IH), 13.1 (s, IH); ¹³C RMN (100 MHz, DMSO) δ 23.3, 33.9, 95.3, 115.6, 128.7, 129.1, 130.6, 131.2, 134.1, 138.0, 161.1, 165.7, 167.4, 170.9. HPLC 96.5%

REACCION QUIMICA 24

Preparación del compuesto 5

OK⁺

NC

SK⁺

Cl x^z\^&lt;5_5;vx'CO2H

K₂CO₃CH₃CN reflujo

NC

NH

7.3 ácido 3-(Clorometil)benzoico

EJEMPLO 24

Preparación del compuesto 5

A una suspensión agitada del intermedio 7,3 (414 mg, 1.27 mmol) y K₂CO₃ (526 mg,

3.81 mmol) en CH₃CN (20 mL) se añadió ácido 3-(clorometil)benzoico (217 mg, 1.27 mmol). La

IMPI

118 agitación se continuó durante la noche a reflujo. Los volátiles se eliminaron bajo vacío. La parte cruda se tomó con agua, se lavó con EtOAc, se acidificó a pH 3 y se extrajo con EtOAc (3 x 50 mi). El compuesto del título 5 se obtuvo (260 mg, 0.7 mmol) como un sólido amarillo claro después de la titulación con una mezcla deEt₂O/Acetona. Rendimiento 55%. *H RMN (400 MHz, DMSO) δ 4.62 (s, 2H), 7.45 (m, 1H), 7.74 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 7.82 (d, J= 6.1 Hz, 1H), 8.08 (s, 1H), 8.21 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 12.9 (s, 1H); ¹³C RMN (100 MHz, DMSO) δ 34.0, 90.5, 114.9, 127.7, 128.8, 129.3, 130.1, 131.4, 133.7, 138.1, 146.2, 156.7, 161.9, 163.8, 166.5, 167.4. HPLC 96.5%

REACCION QUIMICA 25

Preparación del compuesto 19

NC

NH

Br o ΗΝ-Λ ^N

DMSO, Di PEA

NC

NH

HN ,o N

2.2

8.5

EJEMPLO 25

Preparación del compuesto 19

A una suspensión agitada del intermedio 2.2 (100 mg, 0.42 mmol) and DIPEA (0.07 mi, 0.47 mmol) en DMSO (5 mi) se añadió el intermedio 8.5 (120 mg, 0.47 mmol). La agitación se continuó durante la noche a temperatura ambiente. La parte cruda se vertió en agua, se lavó con EtOAc y después se acidificó a pH 3 y se extrajo con EtOAc (3 x 50 mi). El compuesto del título 19 se obtuvo (65 mg, 0.15 mmol) como un sólido naranja puro después de la purificación por cromatografía instantánea eluyendo con CH^I^MeOH (10% para el producto). Rendimiento 38%. ^XH RMN (400 MHz, DMSO) δ 4.37 (s, 2H), 7.20 (t, J = 4 Hz, 1H), 7.45 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.63 (t, J =

7.2 Hz, 2H), 7.75 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 8.07 (d, J

Hz, 1H); ¹³C RMN (100 MHz,

DMSO) δ 33.7, 85.7, 120.4, 124.9, 125.4, 126.7, 128.7, 128.8, 129.5, 131.1, 132.3, 140.6, 142.2, 159.1, 159.9, 163.3, 170.4, 171.3. HPLC 94.1%.

£

IMPI oo g

119

REACCION QUIMICA 26

Preparación del compuesto 18

NC

NH

DMSO

NC

NH

Br

DIPEA

S'^XfXX^CO₂H

2.2

9.2

EJEMPLO 26

Preparación del compuesto 18

A una suspensión agitada del intermedio 2.2 (500 mg, 0. mmol) y DIPEA (0.4 mi, 2.12 mmol) en DMSO (5 mi) se añadió el intermedio 9.2 (487 mg, 2.12 mmol). La agitación se continuó durante la noche a temperatura ambiente. La parte cruda se vertió en agua, se lavó con EtOAc y después se acidificó a pH 3 y se extrajo con EtOAc (3 x 50 mi). El compuesto del título 18 se obtuvo (200 mg, 0.52 mmol) como un sólido amarillento puro después de purificación por cromatografía instantánea eluyendo con CHzCl^MeOH (10% para el producto) y titulación con una mezcla de Et₂O/Acetona. Rendimiento 25%. ^JH RMN (400 MHz, DMSO) δ 3.49 (s, 2H), 4.53 (s, 2H), 7.16 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 7.26 (t, J= 7.2 Hz, 1H), 7.36 (m, 3H), 8.05 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 12.13 (s, 1H); ¹³C RMN (100 MHz, DMSO) δ 34.3, 40.9, 88.5, 116.8, 127.6, 128.9, 129.1, 129.8, 130.4, 131.9, 135.2, 135.8, 137.0, 139.9, 159.1, 161.6, 165.7, 172.9. HPLC 95.8%.

REACCION QUIMICA 27

Preparación del compuesto 17

NC

NH

Br

N n

N H

K₂CO₃ch₃cn reflujo

NH

N 'N

N H

2.2

10.3

EJEMPLO 27

Preparación del compuesto 17

A una suspensión agitada del intermedio 2.2 (160 mg, 0.66 mmol) y DIPEA (0.09 mL, 0.55 mmol) en DMSO (3 mi) se añadió el intermedio 10.3 (171 mg, 0.55 mmol). La agitación se

IMPI

120 continuó durante la noche a temperatura ambiente. La parte cruda se vertió en agua, se lavó con EtOAc y después se acidificó a pH 3 y se extrajo con EtOAc (3 x 50 mi). El compuesto del título 17 se obtuvo (90 mg, 0.22 mmol) como un sólido naranja puro después de la purificación por cromatografía instantánea eluyendo con CH₂CÍ2/MeOH (5% para el producto) y titulación previa con una mezcla de Et₂O/Acetona. Rendimiento 23%. ^XH RMN (400 MHz, DMSO) δ 4.59 (s, 2H), 7.29 (t, J = 4.6 Hz, 1H), 7.54 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.68 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.91 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.96 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 8.16 (s, 1H), 8.22 (d, J = 3.8 Hz, 1H);

C RMN (100 MHz, DMSO) δ 33.9, 88.9,

117.6, 125.0, 126.2, 127.9, 129.6, 129.9, 131.2, 131.9, 134.4, 139.3, 167.0. HPLC 96.2%.

140.4, 155.8, 159.1, 163.8,

REACCION QUIMICA 28

Preparación del compuesto 23

NC

OH

NH

K₂co₃, Acetona

NC

NH

OH

2.2

11.2

EJEMPLO 28

Preparación del compuesto 23

A una suspensión agitada del intermedio 2.2 (150 mg, 0.63 mmol) y K₂CO₃ (96.6 mg, 0.70 mmol) en acetona (10 mi) se añadió el intermedio 11.2 (173 mg, 0.72 mmol). La agitación se continuó durante la noche a temperatura ambiente. Los volátiles se eliminaron bajo vacío. La parte cruda se tomó con agua, se acidificó a pH 3 y se extrajo con EtOAc (3 x 50 mi). El compuesto del título 23 se obtuvo (150 mg, 0.39 mmol) como sólido naranja puro después de la purificación por cromatografía instantánea eluyendo con CH^I^MeOH (5% para el producto) y titulación previa con EtOAc. Rendimiento 62%. ^XH RMN (400 MHz, DMSO) δ 3.92 (s, 2H), 6.72 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.88 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.20 (t, J = 4.26 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 4.7 Hz, 1H); 7.92 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 8.0 (d, J= 3.5 Hz, 1H); 9.59 (s, 1H), 9.80 (s, 1H); ¹³C RMN (100 MHz, DMSO) δ 35.12, 86.2, 115.5, 119.2, 120.1, 121.0, 124.4, 127.0, 128.7, 129.2, 131.4, 141.8, 147.3, 159.2, 167.9, 169.1, 170.5. HPLC 97.7%.

£

IMPI

121

II.

Actividad biológica

EJEMPLO 29 Determinación de la inhibición de ACMSD1

La actividad de los compuestos 1-19 y 21-23 como inhibidores de ACMSD 1 se determinó midiendo la conversión de 3OH-Ácido antranílico en producto (es decir, ACMS) en un ensayo espectrofotométrico in vitro.

La mezcla previa al ensayo consistente en ácido 3-hidroxiantranílico (3OH-HA), ácido 3-hidroxiantranílico, 3,4-dioxigenasa (HAO) y un extracto crudo dializado de células BL21 (DE3) de E. cotí que expresan la enzima recombinante, se incubó a 25°C con monitoreo del aumento de la absorbencia a 360 nm debido a la formación de ACMS a partir de 3OH-HA. Después de que la reacción se completó en minutos, se añadió una alícuota de solución de ACMSD1 (preparada y purificada de Pichia Pastorís que sobreexpresaba la enzima recombinante) y se siguió la disminución de absorbancia a 360 nm a intervalos de 15 segundos. El efecto de la concentración de ACMS sobre la actividad de la enzima se investigó variando la concentración de 3OH-HA de 2 a 20 μΜ. Los parámetros cinéticos se calcularon a partir de los datos de velocidad inicial utilizando el gráfico Lineweaver-Burk.

La velocidad de la disminución de la absorbancia causada por ACMSD1 se calculó restando la de la mezcla de reacción de control sin ACMSD a la descrita anteriormente. Se indicó una unidad de actividad de ACMSD como la cantidad de enzima que convierte 1 mmol de ACMS por minuto a 25°C. La ausencia o una reducción de la actividad de ACMSD1 (por ejemplo, utilizando inhibidores de ACMSD) da como resultado una degradación espontánea lenta de ACMS (es decir, delación para formar ácido quinólico).

La actividad enzimática se determinó a una concentración de HAA de 10 μΜ en presencia de los compuestos del cuadro 1 siguiente. Los compuestos se ensayaron a la concentración de aproximadamente 5 μΜ y 10 μΜ y se calculó la IC₅₀ para compuestos que mostraban actividad inhibidora superior al 50%. Los resultados se muestran en el cuadro 1.

ΙΜΡΙ

122

CUADRO 1

No. de Compuesto

Estructura

NC

NH o

NC

NH

O

N

O

NC

N

S

O

N

NC s

N

N

O

N

NC

NC

Cl s

S /\x^xC0₂H

NH

NH

S /\_rx^_Y/CO₂H

NH

O

N

O

N

NH s

NH ^_s/vz%/^C02H

O

NC

NH í^V^N^S^^

CO₂H

Actividad hACMSD IC

0.050

0.066

0.031

0.012

0.049

0.077

0.082

0.082

IMPI

123

O

NC

NH /YA N^&lt;ÁsS^/W^C°^2Et

0.96

O

NC

NH

N

O

Br

NH r^Y^N

S ^\Υ^χΟΟ₂Η

0.071

O

Br

NH s

N

S z\/^/CO₂H

0.088

O

Cl

NH ζγΑ n^s^^V^^⁰⁰^

0.136

H o

NH o

H

NH s

0.74

S

N

S /Ύγ^ο°2Η

0.76

O

NC

NH

0.11

N

S o

N

NH

N

S :N NH

N

0.005

CO₂H

ΙΜΡΙ

124

O

NH

0.010 s^Y^Y^co₂h

Cl

NH

NH co₂h

NH

0.025

1.99

OH

1.1

4.9

EJEMPLO 30 Determinación de la modulación de ACMSD-1 en células HEK293T

Se sembraron células HEK293T (ATCC) en placas de seis pozos y se transfectaron usando Fugene HD para expresar transitoriamente ACMSD. 24 horas después de la transfección, las células se estimularon durante 48 horas a 72 horas con diferentes concentraciones de compuesto 1 y luego se lisaron para medir la actividad de ACMSD, midiendo la conversión de 3OH-ácido antranílico en producto (es decir, a-amino-beta-carboximuconato-c-semialdehído, ACMS) en un ensayo espectrofotométrico in vitro. La cantidad de todo el contenido de proteína en Usados celulares se detectó mediante análisis de Bradford. Este valor se utilizó para obtener la actividad de especificidad de la enzima normalizada en todas las muestras (mU/ml o ΔΕ /At/mg de proteína total).

Se sabe que la enzima ACMSD-1 se expresa en el hígado, riñón y cerebro; las líneas celulares disponibles para estos tipos de células se ensayaron para determinar los niveles de £

ΙΜΡΙ

125 expresión de ACMSD. Se determinó que ACMSD-1 no se expresa en líneas celulares transformadas de hígado y riñón, tales como HepG2, HEK293T, Hep3B, etc. La transfección de ACMSD se realizó para expresar la enzima en diferentes fondos celulares tales como COS-7, HEK293T y HepG2. El fondo celular HEK293T demostró ser el mejor sistema, con la mayor producción de proteínas permitiendo la medición de la actividad enzimática de ACMSD1. Esto se debe probablemente a la mejor eficacia de transfección observada en HEK293T.

Después de haber determinado el tiempo óptimo de estimulación y las células del protocolo de transfección se estimularon con diferentes concentraciones de compuesto 1 (aproximadamente 50 nM a aproximadamente 5 uM). El compuesto 1 inhibió la actividad de ACMSD1, de una manera dependiente de la dosis, en este ensayo basado en células de sobreexpresión.

EJEMPLO 31 Determinación de contenido de ΝΑΟ* en hepatocitos primarios humanos tratados con el compuesto 4

La concentración o contenido de NAD⁺ se determinó en hepatocitos primarios humanos tratados con el compuesto 4. Se utilizó vehículo (NT) como control.

Al menos tres experimentos se realizaron tratando hepatocitos primarios con diferentes concentraciones de compuesto 4 (0.5 μΜ y 5 μΜ) después de 48 horas de siembra. El compuesto 4 se reemplazó cada 24 horas, y luego las células se cosecharon directamente y se lisaron con ACN/H₂O (relación 5:1). Se usó LCEM/EM para detectar y medir la concentración/contenido de NAD⁺. Los datos de tamizado mostraron que el compuesto 4 inhibe la enzima ACMSD-1 a concentraciones tan bajas como 0.5 μΜ y 5 μΜ. (Figura 1)

EJEMPLO 32 Determinación de contenido de NAD* en hepatocitos primarios humanos tratados con ei compuesto 1

La concentración o contenido de NAD⁺ se determinó en hepatocitos primarios humanos tratados con el compuesto 1 y MEHP, un inhibidor conocido de ACMSD. Se usó MEHP como un control.

Al menos tres experimentos se realizaron tratando hepatocitos primarios con diferentes concentraciones de compuesto 1 (0.5 μΜ, 5 μΜ, y 50 μΜ) después de 48 horas de siembra. El compuesto 1 se reemplazó cada 24 horas, y luego las células se cosecharon directamente y se lisaron con ACN/H₂O (relación 5:1). Se usó LCEM/EM para detectar y medir la

IMPI σι

126 concentración/contenido de NAD⁺. Los datos de cribado mostraron que 500 μΜ de MEHP inhibe el 70% de la enzima ACMSD-1 purificada y que 0.5 μΜ del compuesto 1 tiene una actividad de inhibición similar a 250 μΜ de MEHP. (La figura 3)

EJEMPLO 33

Modulación de la actividad SOD2 en células AML-12 v hepatocitos primarios murinos

Se midió la modulación de la actividad de SOD-2 en células AML-12 y hepatocitos primarios murinos tratados con el compuesto 1 o 17.

La línea celular de hepatocitos de ratón AML-12 (hígado de ratón alfa 12) se obtuvo de ATCC y se cultivó a 37°C en una atmósfera humidificada de 5% de CO2/95% de aire en mezcla de medio de Eagle modificado de Dulbecco/nutrientes F-12 (DMEM/F-12) suplementario con 0.005 mg/ml de insulina, 0.005 mg/ml de transferrina, 5 ng/ml de selenio, 40 ng/ml de dexametasona y 1% de gentamicina. El inhibidor de ACMSD se diluyó inicialmente de polvo en DMSO a una concentración de reserva de 1 mM. Esta solución madre se diluyó adicionalmente con agua hasta una concentración de 100 μΜ que se usó para los tratamientos celulares.

Se prepararon hepatocitos primarios a partir de ratones C57BL/6J de 8-12 semanas de edad mediante el método de perfusión de colagenasa. Los hígados de ratón se perfundieron con solución de sal equilibrada de Hank (HBSS, KCI, 5.4 mM; KH₂PO₄, 0.45 mM; NaCI, 138 mM; NaHCO₃, 4.2 mM; Na₂HPO₄, 0.34 mM; glucosa, 5.5 mM; HEPES, 1 M; EGTA, 50 mM; CaCI₂, 50 mM; pH 7.4). Después se lavaron los hígados a una velocidad de 5 ml/min a través de la vena porta. Después del lavado, los hígados se perfundieron con solución de colagenasa (0.025%). La viabilidad celular se evaluó mediante el método del azul de tripano. Los hepatocitos primarios aislados se sembraron con medio DMEM (Gibco) incluyendo FCS al 10%, 10 unidades por mi de penicilina y HEPES para el amortiguamiento. Las células se mantuvieron en cultivo a 37°C en una atmósfera humidificada de 5% de CO2/ 95% de aire. Después de 6-8 horas de unión, este medio se reemplazó por medio que contenía diferentes concentraciones de un inhibidor de ACMSD (es decir, compuesto 1 o compuesto 17) o con la concentración correspondiente de DMSO (como control). Los hepatocitos primarios se cosecharon aproximadamente 24 horas más tarde si no se indicaban de manera diferente.

Los hepatocitos primarios o las células AML-12 se Usaron a continuación en un regulador de pH HEPES 20 mM (Gibco), pH 7.2, que contenía 1 mM de EGTA (Sigma), 210 mM de manitol (Sigma) y 70 mM de sacarosa (AMRESCO). La concentración de proteína total se determinó usando el ensayo de Bradford (BioRari). La actividad de SOD-2 se determinó en los momentos indicados después del tratamiento con inhibidor de ACMSD mediante el kit de ensayo SOD (Cayman Chemical) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Con el fin de detectar específicamente la £

IMPI

127 actividad de SOD2 2 mM cianuro de potasio se añadió al ensayo, que inhibe Cu/Zn-SOD y SOD extracelular, resultando en la detección de sólo la actividad de Mn-SOD (SOD-2). La absorbencia se determinó con un lector de placas multi-etíqueta Víctor X4 (Perkin-Elmer) a 450 nm. Los resultados se expresan en U/ml/ mg de proteína de acuerdo con la curva estándar y la concentración de proteína medida.

La vía de resistencia al estrés oxidativo, que parecía inducida por la inhibición de la ACSMD, se exploró midiendo la actividad de SOD2. Los resultados mostraron que SOD2 se indujo de una manera dependiente de la dosis en AML-12 y en hepatocitos murinos primarios, tanto por el compuesto 17 como por el compuesto 1. En hepatocitos primarios, que expresan ACMSD a niveles significativamente superiores a AML-12, se observaron efectos a una dosis de aproximadamente 5 nM y alcanzaron un máximo a una dosis de aproximadamente 50 nM. Tanto el compuesto 17 como el compuesto 1 fueron capaces de inducir la actividad de SOD2 de una manera dependiente de la dosis. (Figura 5A y Figura 5B).

EJEMPLO 34 Determinación de contenido de NAD⁺ en hepatocitos primarios de murino

Los niveles de NAD⁺ se determinaron en hepatocitos primarios humanos tratados con el compuesto 17.

NAD⁺ se extrajo utilizando un método de extracción ácida. Las muestras se recogieron y se homogeneizaron en ácido perclórico enfriado con hielo al 70% (HCIO₄). Después de que las partes de proteína insolubles se sedimentaron añadiendo carbonato de potasio (K₂CO₃), las muestras se separaron por cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC) y se analizaron por espectrometría de masas. Las proteínas en el granulo se cuantifícaron mediante ensayo de Bradford y se usaron para normalización.

La exposición de hepatocitos primarios a 5 nM, 10 nM y 50 nM del compuesto 17 de inhibidor de ACMSD durante 24 horas indujo un aumento significativo y dependiente de la dosis en los niveles de NAD⁺ intracelular. Se observó un efecto significativo sobre los niveles de NAD⁺ en concentraciones tan bajas como la concentración de 5 nM. (Figura 2).

EJEMPLO 35 I

Análisis RT-gPCR de genes regulados por SIRT1 en células AML-12, células Heoa-1,6 y hepatocitos murinos primarios tratados con el compuesto 1 ó 17

Se analizó la expresión génica de ACMSD y los genes que se sabe que están

IMPI

128 regulados por SIRT1 (una enzima que es estrictamente dependiente de NAD⁺) tales como Pgcla, Sodl, Sod2 (MnSOD), en células AML-12, Hepa-1.6 y hepatocitos murinos primarios tratados con el compuesto 1 ó 17.

Se trataron células (AML-12, Hepa-1.6, HEK-293, hepatocitos humanos y murinos primarios) con diferentes concentraciones de compuesto 1 o compuesto 17. Se extrajo ARN total de células utilizando TRIzol (Invitrogen) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. El ARN se trató con DNasa, y se utilizaron 2 pg de ARN para la transcripción inversa (RT). Se usó ADNc diluido 50X para reacciones PCR cuantitativas-RT (RT-qPCR). Las reacciones RT-qPCR se realizaron usando el sistema Light-Cycler (Roche Applied Science) y un qPCR Supermix (QIAGEN) con los cebadores indicados. Se utilizó el promedio de al menos tres repeticiones técnicas para cada punto de datos biológicos.

Se observó un aumento dependiente de la dosis en los niveles de expresión de ARNm de genes que se sabe que están regulados por SIRT1 (una enzima estrictamente dependiente de NAD⁺) como Pgcla, Sod2 (MnSOD), pero no Sodl (Cu-Zn SOD) en hepatocitos de ratón primarios tratados durante 24 horas con el compuesto 17 (intervalo de 5 nM-500 nM). El aumento observado en la expresión génica fue dependiente de la dosis, lo que está en línea con el aumento dependiente de la dosis en la actividad enzimática de SOD2 observada en el ejemplo 32 (figuras 5A a 5C). Los niveles de ARNm de Sod2 también se incrementaron de una manera dependiente de la dosis en las células de AML-12 y en las líneas celulares hepáticas Hepa-1.6 después de 24 horas de tratamiento con el compuesto 1. Estos cambios en la expresión de ARNm son compatibles con la activación de SIRT1, posterior a la inducción en niveles de NAD⁺ mediante la inhibición de la actividad de ACMSD1 por el compuesto 17. (Figuras 4A a 5C).

EJEMPLO 36

Modulación de la actividad Caspasa 3/7 en células MDCK

Se realizó un estudio in vitro para determinar los efectos de los compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, sobre lesiones agudas de riñón en células MDCK.

Las células MDCK (MDCK (NBL-2) ATCC® CCL-34™) se cultivaron en medio base de Eagle formulado con base de medio de ATCC, No. de catálogo 30-2003 con suero fetal bovino (FBS) hasta una concentración final de 10%. Se sembraron 10,000 células en 96 pozos y 24 horas después del recubrimiento celular el medio se cambió con medio fresco suplementario con FBS al 1%. El cisplatino (50 μΜ durante 16 horas) se utilizó entonces para inducir la lesión celular. Se añadieron diferentes concentraciones del compuesto 18 (en DMSO al 1%) en combinación con cisplatino (figura

IMPI

129

1) o 1 hora antes de añadir cisplatino (figura 2).

La actividad de Caspasa 3/7 (Promega) se determinó de acuerdo con procedimientos estándar usando una lectura de señal luminiscente en un lector de placas Víctor V (PerkinElmer). Cada experimento/condición se realizó por triplicado.

La actividad de caspasa se analizó como un porcentaje de efecto normalizado a las células tratadas con cisplatino solamente (100%) y vehículo como 0% de actividad de caspasa. Los datos fueron analizados por el software GraphPad. Para el análisis estadístico se utilizó el análisis de varianza unidireccional (prueba de comparación múltiple de Dunnett).

Como se muestra en la figura 1, se trataron células MDCK con diferentes concentraciones del compuesto 18 (0.01 pM a 100 μΜ) en combinación con cisplatino (cisp). El valor de EC₅q se calculó como igual a 70pM. Las células tratadas con el compuesto 18 disminuyeron la actividad de la caspasa de manera significativa a una concentración de ΙΟΟμΜ en comparación con las células tratadas con cisplatino solamente (p&lt;0.001).

Las células MDCK también se trataron con diferentes concentraciones (1 μΜ a 125 pM) del compuesto 18 una hora antes de la adición de cisplatino (cisp). Como se muestra en la figura 2, las células tratadas con el compuesto 18 disminuyeron la actividad de la caspasa de manera significativa a una concentración de aproximadamente 30 pM a aproximadamente 125 pM en comparación con las células tratadas con cisplatino solamente (p &lt;0.001). El valor de EC₅₀ se calculó como igual a 30 pM.

Los datos muestran que el compuesto 18 disminuye de manera significativa la actividad de la caspasa 3/7 inducida por el cisplatino (figura 1), el efecto protector es particularmente notable si se añade el compuesto 18 antes del insulto con el agente de lesión (cisplatino) como se muestra en la figura 2.

EJEMPLO 37

Citotoxicidad v selección de hERG

Citotoxicidad: Se sembraron 20000 células HePG2 y AML-12 en placas de 96 pozos (Viewplate PerkinElmer). La respuesta a la dosis del compuesto del cuadro 2 se realizó utilizando un dispensador digital HP D300, que oscilaba entre 10 nM y 300 pM con DMSO 1% constante en medio. Las células se estimularon durante 4 horas a 37°C; el sobrenadante se utilizó para realizar la liberación de LDH (Cytotox-one, Promega) como una medida de necrosis mientras que las células se lisaron para detectar el nivel de ATP para determinar la viabilidad celular (Celltiter-glo, Promega) de acuerdo con las instrucciones del fabricante.

Se utilizó el kit de ensayo de hERG de Predictor (Invitrogen), que contenía

IMPI

130 preparaciones de membrana de células de ovario de hámster chino transfectadas de forma estable con canal de potasio hERG y un ligando de canal de hERG fluorescente rojo (trazador) de alta afinidad, para determinar la unión de afinidad de canal hERG de los compuestos de prueba en el cuadro 2. Los compuestos que se unen a la proteína del canal hERG (competidores) se identificaron por su capacidad para desplazar el trazador, dando como resultado una menor polarización de fluorescencia. La concentración final de DMSO en cada pozo se mantuvo al 1%. Los ensayos se realizaron de acuerdo con el protocolo del fabricante (Invitrogen).

Los resultados se muestran en el cuadro 2.

CUADRO2

Compuesto

Estructura del compuesto

Citotoxicidad

AML12 hERG

NC

Cl

NH

NH

NC

NH

NH

NH

Hep-G2 n-n NH N co₂h n-R £ z=o

N H

No tóxico

No tóxico

No tóxico

No tóxico

No tóxico

No tóxico

No tóxico

No tóxico

No tóxico

No tóxico

Sin actividad

Sin actividad

Sin actividad

Sin actividad

Sin actividad

S

IMPI

131

O

NC.X

NH

No tóxico

No tóxico

Sin actividad

Βι·χ><

NH

No tóxico

No tóxico

Sin actividad

EJEMPLO38

Experimentos de Ceiegans - Silenciamiento de ACMSD1, ensayos de duración, evaluación de la movilidad y cuantificación de fluorescencia GFP_cepas C. elegans (Caenorhabditís elegans) fueron proporcionados por el Caenorhabditís Genetics Center (Universidad de Minnesota). Los gusanos se mantuvieron en placas de agar de medio de crecimiento de nematodos (NGM) sembradas con bacterias OP50 de E. coH a 20°C, a menos que se indique lo contrario. Las cepas utilizadas para los experimentos fueron las siguientes: Bristol N2, NL2099 (rrf-3(pkl426) II), KN259 (huls33 [sod-3 :: GFP + pRF4 (rol-6 (SU1006))]).

Los experimentos de RNAi de alimentación bacteriana se llevaron a cabo como sigue: los gusanos se hicieron crecer en placas de agar NGM que contenían Carbenicilina e IPTG a concentraciones finales de 25 pg/ml y 1 mM respectivamente y sembradas con cultivos bacterianos tomados de la biblioteca de Ahringer. Los clones utilizados fueron acmsd-1 (Y71D11A.3), sir-2.1 (R11A8.4), y daf-16 (R13H8.1). Los clones se adquirieron de GeneService y su identidad se confirmó por secuenciación. Para los experimentos con ARNi doble se mezclaron cultivos bacterianos antes de siembra en placas NGM. El ARNi de control en este tipo de experimentos fue diluido al 50% con bacterias ARNi de vector vacío de control.

El nematodo Caenorhabditís eíegans fue utilizado como un sistema modelo para confirmar la activación de la defensa contra el estrés oxidativo que hemos observado en las células a nivel de un organismo intacto. Los efectos de acmsd-1 ARNi fueron evaluados en C. elegans por RTqPCR. El ARN total se extrajo de células utilizando TRIzol (Invitrogen) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. El ARN se trató con DNasa y se utilizaron 2 yg de ARN para la transcripción inversa (RT). Se usó ADNc diluido 50X para reacciones PCR cuantitativas-RT (RTqPCR). Las reacciones RT-qPCR se realizaron usando el sistema Light-Cycler (Roche Applied Science) y un qPCR Supermix (QIAGEN) con los cebadores indicados. Se utilizó el promedio de al menos tres

ΙΜΡΙ

132 repeticiones técnicas para cada punto de datos biológicos.

Los ensayos de vida de C. elegans se llevaron a 20°C como sigue. Los animales se expusieron a NAC (N-acetil cisteína) a una concentración final de 5 mM de una solución madre acuosa 0.5 M desde la etapa de adulto joven. Se añadió piruvato de sodio a una concentración final de 2.5 mM a placas de NGM que contenían carbenicilina (100 Ig ml)l) y se sembraron con OP50 eliminado con UV. Después de 5 días de tratamiento con ARNi, los gusanos se transfirieron a placas que contenían paraquat y se sembraron con bacterias ARNi acmsd-1. Los animales de control se cultivaron durante los primeros 5 días de edad adulta en bacterias ARNi que contenían el vector vacío y luego se transfirieron a placas que contenían paraquat y se sembraron con bacterias ARNi acmsd-1. Los análisis de supervivencia se realizaron utilizando el método de Kaplan-Meier, y la significación de las diferencias entre las curvas de supervivencia se calculó mediante la prueba log rank. El software estadístico utilizado fue XLSTAT 2007 (XLSTAT, Brooklyn, NY, USA), y todos los valores de P &lt;0.05 se consideraron significativos. Se utilizaron 100 gusanos por condición y se anotaron cada 2 días. Las razones para la censura fueron el fenotipo «vulva explotada» o los gusanos que se arrastraban del plato. Cuando se indicó, se añadió paraquat en la parte superior de las placas de agar a la concentración indicada. Una vez que la solución de paraquat se secó completamente, los gusanos L4 se transfirieron a estas placas de agar y se monitorearon durante 56 días todos los días. Al día 6 todas las pruebas de paraquat fueron detenidas porque un pequeño porcentaje en la población de gusanos podría comenzar a morir naturalmente y en lugar de morir debido a los efectos del paraquat.

El movimiento de los gusanos se registró durante 45 segundos a los días 1, 3 y 5 de la edad adulta utilizando una cámara Nikon DS-L2/DS-FÍ1 y la configuración del controlador, conectado a un ordenador y un microscopio de campo brillante estándar. Para cada condición se utilizaron cinco placas de gusanos, con 10 gusanos por placa. El movimiento de gusanos durante el envejecimiento se calculó tomando una integral del valor de velocidad que se evaluó siguiendo los centroides de gusano con una versión modificada de la libremente disponible para el Parallel Worm Tracker para MATLAB.

La intensidad de fluorescencia en cepas de gusano que expresan proteínas reportero-GFP se cuantificó utilizando lector de placas Víctor X4 (Perkin Elmer). Los animales se prepararon de la siguiente manera: se recogieron ochenta gusanos por condición (a las edades correspondientes) (20 gusanos por pozo de una placa de 96 pozos de paredes negras) y se colocaron en el medio M9. Cada experimento se repitió al menos dos veces.

El nivel de expresión de acmsd-1 ARNm se redujo significativamente confirmando la eficacia de ARNi mediada por gen knock-down (figura 7A). El ortólogo de gusano de MnSOD, SOD-3, fue inducido en su nivel de ARNm con sub-regulación concomitante del gen acmsd-1 con ARNi.

IMPI

133

También se observó un aumento significativo en el nivel proteico de SOD-3 al día 3 de la edad adulta. (La figura 7B), la sub-regulación de ACMSD mejora la duración del gusano y esta mejora fue dependiente de SIR-2.1- y DAF-16. (Figura 7C)

Por otra parte, los gusanos expuestos a acmsd-1 ARNi vivió más tiempo y mostró un mejor rendimiento en los ensayos de movilidad cuando se trata con paraquat, un inductor de ROS bien conocido que se utiliza ampliamente para imitar el estrés oxidativo en C. elegans. (Figuras 7D y 7E)

La supervivencia mejor en condiciones de paraquat fue independiente en la etapa de desarrollo en la que los gusanos fueron expuestos a acmsd-1 ARNi. (Figura 7F)

Este aumento de la vida en condiciones de estrés oxidativo ya no se observó cuando DAF-16, el ortólogo de gusano de FoxOl, fue sub-regulado, lo que significa que una mejor resistencia al estrés oxidativo era dependiente de DAF-16. (Figura 7G)

EJEMPLO 39

Estudio de los efectos antidiabéticos de compuestos de fórmula (I), fórmula (la fórmula (IbL fórmula (II), o fórmula (lili en ratones C57BL/6J v KK-Av

Se realiza una prueba de tolerancia a la glucosa en ratones C57BL/6J y KK-Ay machos para determinar los efectos de compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II) o fórmula (III) sobre glucosa y los niveles de insulina.

Se obtienen ratones C57BL/6J machos y KK-Ay de 6-7 semanas de edad, por ejemplo, de Charles River Laboratories France y CLEA Japan, respectivamente. Los ratones se alimentaron a partir de la edad de 8 semanas en adelante con chow regular (CD-Harlan 2018), una dieta alta en grasas (HFD-Harlan 06414). Un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se mezcla con el HFD a 180 mg kg¹ de alimento. Sobre la base de su ingesta diaria de alimentos, esto da lugar a una dosis diaria de aproximadamente 15 mg kg¹ de peso corporal. Los ratones se ayunan durante 4 horas antes de que la sangre y los tejidos se cosechen para el aislamiento de ARN, las mediciones de lípidos y la histología. El consumo de oxígeno se mide con el aparato Oxymax (Columbus Instruments). Se realizan análisis histológico y microscopía electrónica de transmisión.

Se lleva a cabo una prueba oral de tolerancia a la glucosa en los animales que se mantienen en ayunas durante la noche. La glucosa se administra por sonda a una dosis de 2 g/kg. Se realiza una prueba de tolerancia a la insulina intraperitoneal en animales en ayunas durante 4 horas. Se inyecta insulina a una dosis de 0.75 U/kg de peso corporal. La glucosa se cuantifica con el Glucómetro 4Max¡ Kit (Bayer Diagnostic) o Glucosa RTU (bioMerieux Inc.) y las concentraciones w

&lt;o σι

IMPI

134 plasmáticas de insulina se miden mediante ELISA (Cristal Chem Inc.). Las diferencias estadísticas se determinan mediante ANOVA o prueba t de Student.

EJEMPLO 40

Estudio de los efectos antidiabéticos v de obesidad de compuestos de fórmula (I), fórmula (laL fórmula (IbL fórmula (II), o fórmula flili en ratones db/db con mutación

Un estudio de los efectos antidiabéticos de los compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, se lleva a cabo en ratones genéticamente obesos Leprdb/l (db/db).

Los animales son criados y alojados en un entorno controlado por temperatura y humedad, de acuerdo con los protocolos FELASA. A partir de una edad de tres semanas, los ratones son alimentados con una dieta rica en grasas (HFD) (Harían 06414). La mayoría de los estudios farmacológicos se inician en diabéticos de ocho semanas de edad db/db y referenciasde tipo salvaje (wt).

Intervención subcrónica

Los ratones db/db se tratan una vez al día con un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, durante 14 días entre 5-6 PM antes del inicio de la fase oscura (6 PM). Las muestras de sangre se recogieron después de 4 horas de ayuno de los ratones antes de la primera dosis y a las 18 ± 2 horas después de la última dosis. Se determinan las concentraciones de glucosa de cada muestra de sangre.

Intervención aguda de glucosa

Las muestras de sangre iniciales se recogen en ratones db/db alimentados al azar entre 6-8 AM después del inicio de fase luminosa (6 AM), luego los compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se administra, el acceso a la dieta se restringe y la segunda muestra de sangre se recoge 4 horas después del tratamiento. A continuación, los ratones se someten a una prueba oral de tolerancia a la glucosa (OGTT1: 1 g de glucosa/kg de masa corporal) y las concentraciones de glucosa en sangre se determinan a 0.5, 1, 2, 3 y 4 horas después de cada desafío de glucosa.

£

IMPI g

135

Ensayo de abrazaderas eughemico-hiperínsulinémico

Los ratones db/db reciben un catéter de vena yugular permanente bajo anestesia de ketamina/xilazina. Durante seis a siete días, más tarde (después de las 6 AM) el acceso a los alimentos está restringido. Los ratones conscientes se colocan en sujetadores de ratas de gran tamaño y se calientan calentando las almohadillas. Los extremos del catéter se conectan entonces a jeringas en bombas CMA402 (Axel Semrau, Sprockhoevel, Alemania). Después de 110 minutos de infusión de glucosa [3-³H] continua-cebada (1.85 kBq/min), se recoge una muestra de sangre para determinar las concentraciones plasmáticas de insulina, glucosa y [3-³H]glucosa y calcular las tasas de aparición de glucosa endógena basal. Los ratones que recibieron entonces vehículo o un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, mediante sonda.

Posteriormente, se inician las pinzas de glucosa-1 con una infusión de [3-³H]glucosa (3.7 kBq / min) que contiene insulina (36 pmol/kg*min HumulinR, Lilly, USA) provocando un aumento neto moderado en las concentraciones de insulina plasmática. Las concentraciones de glucosa en sangre se miden cada 10 minutos y la glucemia objetivo se establece ajustando la tasa de infusión de glucosa al 20% (GIR). En el minuto 120, se administra intravenosamente 2-desoxi-D[l-¹⁴C]glucosa (370 kBq). Las muestras de sangre se recogen a los minutos 30, 60, 90, 100, 110, 120, 122, 125, 130 y 140. Los ratones se sacrificaron entonces (es decir, a través de una sobredosis de ketamina/xilazina intravenosa). Se recoge el músculo gastrocnemio y el tejido adiposo epididimario, inmediatamente se congela en nitrógeno líquido y se almacena a -80°C. Se extrae el 2[¹⁴C]desoxiglucosa-6-fosfato del tejido y se calculan las tasas de captación de glucosa (Rg).

La radiactividad plasmática de [³H] y [¹⁴C] se determina en plasma desproteinizado después de la evaporación de [³H₂O]. Los flujos de glucosa en las condiciones básales y entre los momentos de abrazadera de glucosa 60 a 90 y 90 a 120 se estiman como sigue: tasa de desaparición de glucosa en todo el cuerpo (Rd) = [3-³H]GIR (dpm/minuto)/actividad específica de plasma [3-³H]glucosa (dpm/min*mol); Endo basal Ra basal = [3-³H] GIR (dpm/min)/actividad especifica de plasma [3-³H]glucosa (dpm/min*mol); abrazadera de glucosa Endo Ra = GIR-Rd. Centelleo-cóctel Ultima-Gold, radioisótopos, y un Tri-Carb2910TR se obtienen de Perkin Elmer (Alemania).

Ensayos de sangre, plasma, orina

Se extraen muestras de sangre de las venas laterales de la cola. La glucosa en sangre se mide con un glucómetro (Contour, Bayer Vital, Alemania), glucosa en orina y plasma con un LabAssay de glucosa colorimétrica (Wako, Alemania) y HbAlc con AlcNow+ (Bayer Vital) o analizador Clover (Inopia, Corea del Sur).

IMPI

136

Análisis de! inicio y supervivencia de ia enfermedad

El inicio de la enfermedad se define como el último día del peso corporal individual antes de que ocurra la pérdida gradual. Las etapas de la enfermedad se definen de la siguiente manera: la etapa temprana de la enfermedad se define como la duración del tiempo entre el pico de peso corporal hasta la pérdida del 10% del peso corporal máximo. La última etapa de la enfermedad se define como la duración del tiempo entre el 10% de pérdida de peso corporal máximo hasta el final de la fase de la enfermedad. El estadio final de la enfermedad se define como el día en que un animal ya no puede enderezarse a sí mismo dentro de los 30 segundos por tres ensayos consecutivos cuando se coloca en su lado. Los animales son eutanasiados en la etapa final de la enfermedad.

Medidas de ia composición corporal

Los pesos corporales se evalúan semanalmente durante al menos 13 semanas. Se diseca el tejido adiposo marrón (BAT) y el tejido adiposo blanco gonadal (WAT) y se pesan a la edad indicada. La masa magra total, el% de WAT y la BMD (densidad mineral ósea) se determinan mediante DEXA (PIXImus DEXA, GE).

Calorimetría indirecta, ingesta de alimentos y actividad

Los animales se pesan inicialmente y se aclimatan a la jaula de ensayo. El volumen de oxígeno (VO₂) y la producción de dióxido de carbono en volumen (VCO₂) se miden cada 20 minutos utilizando el Sistema de Monitoreo de Animales de Laboratorio Compreensivo Oxymax (CLAMS) (Columbus Instruments) y se informan como VO₂ promedio por hora normalizado al peso corporal (ml/h/kg). Mediante la máquina CLAMS se miden simultáneamente los recuentos de actividad por interrupciones del haz infrarrojo y la ingesta de alimentos. Más específicamente, la ingesta de alimentos se mide deduciendo el peso de los gránulos de alimento en polvo al final de la experimentación a partir del peso inicial al comienzo de la experimentación. Para complementar este experimento y para controlar un ambiente novedoso que puede afectar el comportamiento de alimentación, también realizamos un experimento más manual, en el que un peso establecido de pellas de alimento se coloca a la misma hora cada día en una jaula doméstica limpia, que tiene un ratón. Al día siguiente se registra el peso de las pellas restantes y se deduce del peso inicial. Este experimento se realiza durante 14 días seguidos. El peso corporal de cada ratón también se registra diariamente. Los resultados para cada genotipo son similares a los adquiridos de la CLAMS.

Análisis estadísticos

Teniendo en cuenta un l-β más grande que 0.9 estadísticamente potente,

ΙΜΡΙ g

137 estimamos números de grupo apropiado de los estudios piloto a priori. Se realizan análisis de una o dos vías de la varianza (pos-pruebas de Bonferroni) o pruebas t.

EJEMPLO 41

Estudio de los efectos de los compuestos de fórmula fIL fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula flIL o fórmula (III) sobre la enfermedad hepática grasa no alcohólica f NAFLDl v la esteatohepatitis no alcohólica fNASHl en ratones

Se realiza un estudio para determinar los efectos de los compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la enfermedad de hígado graso no alcohólico (NAFLD) y esteatohepatitis no alcohólica (NASH) en C57BL/6J machos alimentados con una dieta alta en grasa y alta en sacarosa.

Los ratones macho C57BL/6J (The Jackson Laboratory, Bar Harbor, Maine, USA) se alojan bajo un ciclo de 14 horas luz-10 horas de oscuridad a 21-23°C y tienen acceso ad libitum al agua durante todo el experimento. A partir de la edad de 6 semanas, los ratones son alimentados con un HF-HSD Occidental' con 44.6% de kcal derivado de la grasa (de los cuales 61% de ácidos grasos saturados) y 40.6% de kcal derivados de carbohidratos (principalmente sacarosa 340 g/kg dieta ) (TD.08811, 45% kcal de dieta de grasa, Harían Laboratories Inc., Madison, Wisconsin, USA) o dieta normal de chow (NCD) como control (V1534-000 ssniff R/MH, ssniff Spezialdiáten GmbH, Soest, Alemania). Los animales se tratan después con un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o un control para 4, 12 o 20 semanas (n = 8 por grupo por cada punto de tiempo), después de lo cual se sacrifican.

El peso corporal y la ingesta de alimentos se monitorean semanalmente el mismo día. Después de la sedación con pentobarbital sódico (inyección intraperitoneal, 50 mg/kg de peso corporal), se analiza la masa grasa total mediante absorciometría de rayos X de doble energía (DEXA) (densltómetro PIXImus, Lunar Corp., Madison, Wisconsin, USA). La prueba de tolerancia a la glucosa intraperitoneal (IPGTT) se realiza en 6 horas de ratones en ayunas. Los niveles de glucosa de la vena de la cola se miden con un glucómetro Bayer Contour inmediatamente antes (punto de tiempo 0 min) y 15, 30, 60, 90 y 150 min después de la administración de glucosa (1 g de glucosa/kg de peso corporal). La resistencia a la insulina se calcula usando el modelo de homeostasis del índice de resistencia a la insulina (HOMA-IR): (insulina en ayunas (ng/ml) x glucosa en ayunas (mg/dL) )/405.

IMPI σι

138

Sacrificio

Después de un período de ayuno de 6 horas, los ratones se anestesian con pentobarbítal sódico (inyección intraperitoneal, 50 mg / kg de peso corporal) y se sacrifican mediante muestreo de sangre mediante punción cardiaca. El plasma se obtiene por centrifugación de sangre (6000 rpm durante 5 min a 4°C) que se recoge en jeringas heparinizadas. Los tejidos se congelan instantáneamente en nitrógeno líquido o se almacenan a -80°C junto con el plasma hasta análisis bioquímicos y moleculares adicionales o se conservan para análisis histológico.

Anáfisis histológicos

Las muestras de hígado se fijan rutinariamente en formalina amortiguada (4%) y se incrusta en parafina. Las secciones seriadas de 4 mm de espesor se tinen con H&E y rojo picrosirius para evaluar la fibrosis. Las secciones de hígado congeladas se tiñen con aceite rojo O para evaluar la acumulación de lípidos. Todas las biopsias hepáticas son analizadas por un patólogo experto en el hígado, cegado a la condición dietética o a la intervención quirúrgica. La esteatosis, la actividad y la fibrosis se puntúan semiquantitativamente según los criterios de la NASH-Clinical Research NetWork. La cantidad de esteatosis (porcentaje de hepatocitos que contienen gotitas de grasa) se califica como 0 (<5%), 1 (5-33%), 2 (>33-66%) y 3 (>66%). El globo de los hepatocitos se clasifica como 0 (ninguno), 1 (pocos) o 2 (muchas células/globos prominentes). Los focos de inflamación lobular se puntuaron como 0 (sin focos), 1 (<2 focos por 200xcampo), 2 (2-4 focos por 200xcampo) y 3 (>4 focos por 200xcampo). La fibrosis se clasifica como la etapa F0 (sin fibrosis), etapa Fia (leve, zona 3, fibrosis perisinusoidal), etapa Flb (moderado, zona 3, fibrosis perisinusoidal), etapa Fie (fibrosis portal/periportal), etapa F2 (perisinusoidal y portal/fibrosis periportal), etapa F3 (fibrosis puente) y etapa F4 (cirrosis). El diagnóstico de la NASH se basa en criterios histológicos aceptados. La gravedad de la enfermedad se evalúa utilizando el ÑAS (puntuación de la actividad NAFLD) como la suma no ponderada de las puntuaciones de la esteatosis, el hinchamiento de los hepatocitos y la inflamación lobular. El porcentaje de fibrosis se cuantifica mediante morfometría a partir de secciones teñidas en rojo sirius digitalizadas usando el sistema Aperio después de ajustar el umbral de detección de fibrosis bajo control visual. Los resultados se expresan como área proporcional de colágeno.

IMPI

139

EJEMPLO 42

Estudio de los efectos de los compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III) sobre la enfermedad hepática grasa no alcohólica (NAFLD) v la esteatohepatitis no alcohólica (NASH) en ratones deficientes en metionina v colina

Se realiza un estudio para determinar los efectos de los compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la enfermedad de hígado graso no alcohólico (NAFLD) y esteatohepatitis no alcohólica (NASH) en ratones machos de tipo salvaje alimentados con una dieta deficiente en metionina y colina.

Se utilizan ratones tipo salvaje alojados en ciclos de luz/oscuridad de 12 horas, con acceso libre a alimentos y agua. Se analizan al menos 5 animales por punto de tiempo. Todos los experimentos se repiten al menos tres veces. Para el tratamiento dietético, ratones machos de 8-12 semanas que pesan 25 g se alimentan con una dieta deficiente en metionina y colina (MCD para inducir la NASH) o dieta chow (como un control). Los experimentos con animales y la evaluación de NAFLD y NASH como se describió anteriormente en el ejemplo 40 para ratones alimentados con la dieta con alto contenido de grasa y alto contenido de sacarosa.

EJEMPLO 43

Estudio de los efectos de los compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III) en aterosclerosis en ratones knockout LDL-R alimentados con altocontenidodecolesterol

Se realiza un estudio para determinar los efectos de los compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la aterosclerosis en ratones knockout LDL-R alimentados con alto contenido de colesterol. Λ

Los ratones knockout de LDL-R (KO) son retrocruzados durante diez generaciones con la cepa C57BL/6J, produciendo animales C57BL/6J congénicos. Los controles que se usan son compañeros de camada en todos los experimentos. Los animales se tratan con un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o un control. Los ratones se sacrifican 12 semanas después del inicio de la dieta aterogénica (TD94059, Harían), después de lo cual el corazón y la aorta se perfunden con PBS y posteriormente se fijan (Shandon Formal Fixx, Thermo Scientific). La aterosclerosis se evalúa mediante una coloración con tinción de aceite rojo O de la raíz aórtica y se cuantifica con el software MetaMorph. Los parámetros bioquímicos se miden con los kits apropiados en el COBAS Clll

IMPI

140 (Roche). Para el estudio de lipopolisacárido in vivo (LPS), se inyectan intraperitonealmente ratones con 100 mg de LPS y se extrae sangre de la vena de la cola. Los niveles de TNFg se cuantifican con el ensayo de ratón TNFa ELISA Ready-Go! (EBioscience). Los recuentos de células sanguíneas se determinan con Advia2120 (Siemens Healthcare Diagnostics).

La prueba t de Student se utiliza para calcular la significación estadística. En el caso de pruebas múltiples (es decir, la comparación de más de dos grupos), esta prueba está precedida por la prueba de ANOVA. P &lt;0.05 se considera estadísticamente significativo. Los resultados representan la media ± SEM.

EJEMPLO 44

Estudio de los efectos de los compuestos de fórmula fl), fórmula fia), fórmula flb), fórmula fll), o fórmula flll) sobre la enfermedad mitocondrial heredada en ratones

Sco2^KO/ia

Se realiza un estudio para determinar los efectos de compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, sobre enfermedad mitocondrial hereditaria en ratones Sco2^KO/KI.

Anti-COI, anti-COX5a, anti-Ndufa9, anti-SDH-HA y anti-Core 2 son de Invitrogen; Anti-GAPDH es de Millipore; Anti-FoxOl y anti-acetilado-FoxOl son de Cell Signaling y Santa Cruz, respectivamente. Los anticuerpos secundarios anti-ratón son de Amersham. Los productos químicos son de Sigma. Los oligonucleótidos son de PRIMM, Italia.

Los compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se disuelven en agua y se añaden a una dieta en polvo estándar (Mucedola, Italia ) a la concentración apropiada de 50 mg/kg/día. Las pellas que contienen los compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o los vehículos se reconstituyen a mano y se mantienen congelados a -20°C hasta que sea necesario. El suministro de la dieta se cambia cada tres días, y sólo la cantidad necesaria se descongela en cada momento y se administra ad íibitum durante un mes. Los ratones Sco2^KO/KI se mantienen en una instalación de cuidado de animales controlada de temperatura y humedad, con un ciclo de luz/oscuridad de 12 horas y acceso libre al agua y los alimentos. Los animales se sacrifican por dislocación cervical.

Análisis Morfológico

Para el análisis histoquímico, los tejidos se congelan en isopentano pre-enfriado con nitrógeno líquido. Serie de secciones de 8 mm de espesor se tinen para COX y SDH.

£ &lt;Λ

141

IMPI

INSTITUTO MEXICANO DE LA PROPIEDAD INDUSTRIAL

Análisis bioquímico de /os complejos MRC

Las muestras de cuádriceps muscular almacenadas en nitrógeno líquido se homogeneizan en regulador de pH de fosfato 10 mM (pH 7.4), y la actividad espectrofotométrica de cl, di, cIII y cIV, así como CS, se mide como se describe. Tenga en cuenta que en todos los paneles la actividad de di se multiplica por 10 para la claridad de visualizacíón.

Determinación de NAD

NAD⁺ se extrae utilizando métodos de extracción ácida y alcalina, respectivamente.

Se analiza NAD⁺ de tejido con espectrometría de masas como se describe anteriormente.

EJEMPLO 45

Estudio de los efectos de los compuestos de fórmula fIL fórmula fia), fórmula flbl fórmula fll), o fórmula (III) sobre enfermedad mitocondrial heredada en ratones Deletor

Se realiza un estudio para determinar los efectos de compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, sobre enfermedad mitocondrial hereditaria en ratones Deletor.

El modelo de ratón Deletor se genera en un fondo congénico C57BL/6 y se ha caracterizado previamente (Tyynismaa et al, 2005); los ratones WT son compañeros de camada de la misma cepa de ratón congénica C57BL/61 Los ratones machos Deletor y WT se administran ya sea con dieta de comida comercial (CD) o un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, mezclado con el CD a la concentración apropiada. Las pellas de alimento se preparan manualmente mezclando un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el alimento en polvo como se describe para los ratones Sco2^KO/KI en el ejemplo 43 y se almacenaron a -20°C. Los ratones se alojan en instalaciones de animales estándar, bajo un ciclo de oscuridad/luz de 12 horas. Tienen acceso ad libitum a la comida y al agua. El grupo de pre-manifestación consiste en 12 ratones Deletors y 12 ratones WT, y el grupo post-manifestación de 24 Deletors y 24 ratones WT, que reciben un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o dieta de CD. Durante la intervención, los ratones son monitoreados regularmente por el peso, el consumo de alimentos y la resistencia física. Su capacidad de ejercicio se mide dos veces por la prueba de ejercicio de la rueda de ardilla (Exer-6M Treadmill, Columbus Instrument) al inicio y al final de la dieta. El protocolo de prueba de ejercicio consiste de una velocidad de avance inicial de £

ΙΜΡΙ

142 m/s que se incrementa cada 2 min por 2 m/s y continúa hasta que el animal no puede correr o cae repetidamente del cinturón en el sitio del estímulo.

El consumo de oxígeno y la producción de dióxido de carbono, así como las actividades espontáneas de movimiento y alimentación, se registran por el sistema de monitoreo de animales Oxymax Lab (CLAMS, Columbus Instruments, OH, EUA). Los ratones se mantienen en jaulas individuales dentro de una cámara de CLAMS durante 3 días; el primer día y la noche es un período de ajuste no registrado seguido de un registro de 24 horas a termoneutralidad (+30°C). Los resultados del consumo de O₂ y la producción de CO₂ se utilizan para calcular la tasa de intercambio respiratorio y se analizan por separado de los períodos de luz (inactivo) y oscuro (activo) del día.

Análisis morfológico

Las secciones de tejido se preparan a partir de los cuadríceps, hígado y BAT. Las muestras se incrustan con medio de incrustación de compuesto OCT (Tissue-Tek) y se congelan instantáneamente en 2-metilbutano en nitrógeno líquido. Las secciones congeladas (12 Im) cuádriceps se ensayan para COX de histoquímica in situ y actividades de deshidrogenada succinato (SDH) simultáneamente. Se calculan las actividades de las secciones de cuádriceps, de de las fibras COX-negativas y COX-negativas más SDH positivas y normales. Aproximadamente 2000 fibras se cuentan a partir de cada muestra de ratón. La intensidad de la actividad histoquímica de COX de los cuádriceps para las fibras tanto oxidativas como no oxidativas se mide con el software Image J. Las secciones congeladas (8 pm) del hígado y BAT se tiñen con aceite rojo O. Para cuádriceps, de incrustado plástico, hígado y muestras de BAT se fijan en 2.5% de glutaraldehído, tratados con 1% de tetróxido de osmio, deshidratados en etanol e incorporados en resina epóxica. Las secciones semi-delgadas (1 pm) se tiñen con azul de metilo (0.5% p/v) y ácido bórico (1% p/v). Las áreas interesantes para los análisis ultraestructurales se seleccionan mediante la inspección de las secciones microscópicas de luz. Para la microscopía electrónica de transmisión, las secciones ultradelgadas (60-90 nm) se cortan en cuadrículas y se tiñen con acetato de uranilo y citrato de plomo y se observan con un microscopio electrónico de transmisión. El contenido de crista tanto en BAT como en los músculos se determina a partir de micrografías electrónicas, utilizando un bastón de medida intramitochondrial de 1 pm, colocado perpendicular a las crestas. Las muestras de músculo esquelético también se analizan para la actividad de citrato sintasa.

ΙΜΡΙ

143

EJEMPLO 46

Estudio de los efectos de los compuestos de fórmula (I), fórmula fia), fórmula (Ib fórmula (II), o fórmula (IIP sobre enfermedad renal

Se realiza un estudio para determinar los efectos de compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (Π), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, sobre enfermedad renal en ratones C57BL/6J WT. (Wei, Q., et al. Mouse model ofischemic acute kidney injury: technicai notes and trickd' American Journal of Physiology-Renal Physiology, 303(11), F1487-F1494)

Los ratones C57BL/6J WT se compran de Charles River. Todos los ratones se alimentan con una dieta comercial estándar mientras se alojan a una temperatura ambiente de 2022°C con una humedad relativa de 50 ± 5% bajo 12/12 horas de ciclo luz-oscuridad en una instalación específica libre de patógenos. Los ratones experimentales tienen 8 semanas de edad y se dividen en cuatro grupos: control (n = 5); cisplatino (20 mg/kg, Sigma Chemical, St. Louis, MO, n = 5); un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y cisplatino (n = 5); y un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, solo (40 mg/kg; n = 5). La dosis y el tiempo de tratamiento con cisplatino para nefrotoxicidad se eligen de acuerdo con un método publicado. Un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se administra oralmente una vez al día durante 4 días. El cisplatino se inyecta una vez a 12 horas después de la primera administración de un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Los ratones se sacrifican a las 72 horas después de la única inyección de cisplatino.

Ensayos para marcadores funcionales renales y citoauinas proinflamatorias

Para el análisis de la función renal, el suero se aísla y se almacena a -80°C hasta su uso. La creatinina sérica y los niveles de BUN se miden usando un kit de ensayo de acuerdo con las instrucciones del fabricante (BioVision, Milpitas, CA). Además, se cuantifican las citoquinas proinflamatorias TNF-o, IL-lb e IL-6 a partir del suero u homogenados del tejido renal mediante ELISA (Quantikine Kit, R &amp; D Systems, Minneápolis, MN) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Para medir las citoquinas, el tejido renal se homogeneiza en solución salina regulada de pH con fosfato que contiene 0.05% de Tween-20. Se utilizan alícuotas que contienen 300 mg de proteína total. Una jaula metabólica se utiliza para recolectar orina para analizar el nivel de citoquinas urinarias. El tamaño de la muestra para cada grupo es cinco.

£

IMPI

144

Estudio alternativo de los efectos de compuestos de fórmula (I), fórmula (la).

fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III) sobre enfermedad renal

Alternativamente, los ratones C57BL/6J WT se numeran y se mantienen en aclimatación durante un periodo de 5-7 días antes del inicio del experimento. (Wel, Q., et al. Mouse model of ischemic acute kidney injury: technical notes and tricks American Journal of PhysiologyRenal Physiology, 303(11), F1487-F1494). Los ratones se distribuyen al azar en diferentes grupos de tratamiento basándose en su peso corporal. Diferentes grupos se mantienen en dieta Harían 2916. Los ratones se mantienen después en las dietas respectivas durante 10 días antes de la lesión renal isquémica bilateral. La medición del peso corporal se realiza una vez al azar y una vez en el día 7. El consumo de alimentos se evalúa una vez en el día 7. La sangre se recoge mediante punción retroorbital bajo anestesia leve con isoflurano y se utiliza para el análisis de los niveles básales de nitrógeno ureico en sangre (BUN) en el día 9.

Los ratones se anestesian con quetamina (80 mg/kg i.p.) y/o Xilazina (10 mg/kg, i.p.) y se colocan sobre una plataforma quirúrgica en posición dorsal. Ambos riñones están expuestos a través de las incisiones de los flancos y los pedículos renales se ocluyen utilizando pinzas vasculares durante 25 minutos. La pinza entonces se retira y el sitio quirúrgico se sutura. 1 mi de solución salina fisiológica se administra intraperitonealmente después de cerrar la herida para evitar la deshidratación. El grupo operado simuladamente se somete a procedimientos quirúrgicos similares, excepto que no se aplica la pinza de oclusión. Los animales son monitoreados hasta la recuperación de la anestesia y devueltos a su jaula de origen. Los animales se observan todos los días para los signos y síntomas clínicos generales y la mortalidad.

Un día antes de la terminación, los animales se alojan individualmente en jaulas metabólicas durante 12 horas y se recoge orina para estimar la urea, creatinina, sodio y potasio.

En los días 12, 14 y 16 se recolecta sangre por punción retro orbital bajo anestesia leve con isoflurano y se utiliza plasma para el análisis de los niveles de nitrógeno de urea en sangre (BUN) y creatinina sérica. Los animales son asesinados sin dolor por inhalación de CO₂ y se recogen órganos. Un riñón se fija en formalina regulada de pH neutra al 10% y el otro se congela instantáneamente en nitrógeno líquido, se almacena a -80°C y se utiliza para la estimación de la peroxidación lipídica, los niveles de GSH, MPO y SOD.

Análisis histológico v recuento de neutrófilos

Los riñones de ratón se fijan en formaldehído al 4% y se incrustan en cera de parafina. Las secciones de 5 mm de grosor se desparafinan en xileno y se rehidratan a través de concentraciones graduadas de etanol. Las tinciones de H&amp;E y PAS se realizan usando protocolos

IMPI σι

145 estándar. Las imágenes se recolectan y se analizan con un microscopio óptico (1X71, Olympus, Tokio, Japón) con un software de analizador DP (DP70-BSW, Tokio, Japón). El daño tubular en las secciones de riñón manchadas con PAS se examina bajo un microscopio de luz y se anota basándose en el porcentaje de necrosis tubular cortical: 0 = normal, 1 = 1-10, 2 = 11-25, 3 = 26-45, 4 = 46-75 y 5 = 76-100%. Las diapositivas se marcan de manera ciega, y los resultados son medias ± s.d. de 10 campos/grupo representativos. El criterio de gravedad para la necrosis tubular que muestra la pérdida del borde del cepillo tubular proximal y la formación de colada se utilizan para clasificar las muestras. El tamaño de la muestra para cada grupo es 10. La infiltración de neutrófilos se evalúa cuantitativamente en tejidos teñidos con PAS por un patólogo renal mediante el conteo del número de neutrófilos por campo de alta potencia (x400). Al menos 10 campos se cuentan en la franja exterior de la médula externa para cada diapositiva.

Todos los valores se representan como la media ± s.d. El análisis unidireccional de la varianza se utiliza para calcular la significación estadística de los resultados de todos los ensayos y los valores de P &lt;0.05 se consideran estadísticamente significativos.

EJEMPLO 47

Estudio de los efectos de los compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib fórmula (II) o fórmula (III) sobre la lesión renal aguda inducida por isauemia/reperfusión

Se realiza un estudio para determinar los efectos de compuestos de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, sobre la lesión renal aguda inducida por isquemia/reperfusión (inducida por I/R) en ratones CD-I (ICR).

Los ratones CD-I (ICR) se compran a Charles River Laboratory (Wilmington, MA). Los ratones se alojan en un entorno controlado por la temperatura y la humedad con un ciclo de 12:12 horas luz-oscuridad y se les permite el libre acceso a la comida estándar de roedores (TekLad, Madison, WI) y el agua del grifo.

Los ratones se someten a una incisión en la parte media de la espalda, y ambos pedículos renales se sujetan durante 45 minutos con pinzas de microaneurisma (00396-01, Fine Science Tools, Foster City, CA). Después de retirar la abrazadera, los riñones se inspeccionan para la restauración del flujo sanguíneo. Se deja que los animales se recuperen, y se sacrifican 48 horas después de la reperfusión. Los ratones se tratan con 100 mg/kg de un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, por sonda oral una vez por día. Los ratones CD-I se dividen en cuatro grupos: (1) ratones

IMPI

146 jóvenes con lesión simulada (n = 4) (6-7 semanas de edad); (2) ratones jóvenes con lesión I/R (n = 8); (3) ratones adultos con lesión simulada (n = 4) (20-24 semanas de edad); y (4) ratones adultos con lesión I/R (n = 11). Unos 27 ratones adultos adicionales (20-24 semanas de edad) se distribuyen al azar en dos grupos: 13 ratones recibieron un compuesto de fórmula (I), fórmula (la), fórmula (Ib), fórmula (II), o fórmula (III), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y los otros 14 ratones recibieron el vehículo como un control.

El nivel de creatinina sérica se mide utilizando el kit de ensayo de creatinina QuantiChrom (DICT-500, BioAssay Systems, Hayward, CA). Las mediciones de BUN se registran utilizando el reactivo estable líquido de Urea Infinity (Nitrógeno) (TR12421; ThermoTrace, Victoria, AU).

Evaluación de! tejido renal

Los riñones se fijan en 4% de paraformaldehído, incrustados en parafina, y teñidos con hematoxilina y eosina (4 mm de grosor). La lesión tubular se anota en una escala de 0-4 en base al porcentaje de túbulos con necrosis, dilatación o inflamación celular: 0, menos del 5%; 1, 525%; 2, 25-50%; 3, 50-75%; y 4, más del 75%. Todos los campos de alta potencia (x 400) en la corteza y la médula externa son evaluados por un patólogo de manera ciega.

Todos los valores se expresan como media ± s.e. El análisis estadístico se lleva a cabo utilizando GraphPad Prism 4.00 (San Diego, CA) con la prueba t de Student no pareada para dos conjuntos de datos y un análisis de varianza con una post-prueba de Bonferroni para múltiples grupos. P &lt; 0.05 se consideró significativo.

EJEMPLO 48 Determinación de los efectos de los compuestos 1 v 17 sobre los niveles de fosforilación de FoxOl

Las células AML-12 se trataron con diferentes concentraciones del compuesto 1 o compuesto 17 durante 24 horas. Las células se lisaron a continuación en regulador de pH de lisis (Tris 50 mM, KCI 150 mM, EDTA 1 mM, NP40 al 1%) que contiene inhibidores de proteasa y fosfatase, y se analizaron mediante SDS-PAGE/western blot. El bloqueo y las incubaciones de anticuerpos se realizaron en leche al 5%. Cada proteína presente se detectó con su anticuerpo específico. El anticuerpo de tubulina se obtuvo de los anticuerpos Sigma Inc, FoxOl y phopho-FoxOl (Ser256) se obtuvieron de Cell Signalíng. Las reacciones de detección de anticuerpos se desarrollaron mediante quimioluminiscencia mejorada (Advansta, CA, E.U.A.) usando películas de rayos X.

IMPI

147

La fosforilación de FoxOl en Ser256 resulta en su exportación nuclear y en la inhibición de su actividad de factor de transcripción. Se observó una disminución en la fosforilación de FoxOl en Ser256 con una dosis incrementada de compuesto 1 y 17 (figuras 6A y 6B), lo que indica un aumento de la FoxOl translocado nuclear y por tanto, actividad transcripcional FoxOl incrementada.

A menos que se defina de otra forma, todos los términos técnicos y científicos utilizados en la presente tienen el mismo significado que entiende comúnmente un experto en la técnica al cual pertenece esta invención. En la especificación, las formas singulares también incluyen el plural a menos que el contexto claramente indique lo contrario. Aunque los métodos y materiales similares o equivalentes a los descritos en este documento pueden utilizarse en la práctica de la prueba de la presente descripción, métodos adecuados y materiales se describen a continuación. Todas las publicaciones, solicitudes de patentes, patentes y otras referencias mencionadas aquí se incorporan expresamente por referencia. Las referencias citadas en el presente documento no se admiten como técnica anterior de la descripción reclamada. En caso de conflicto, la presente especificación, incluyendo definiciones, se controlarán. Además, los materiales, métodos y ejemplos son ilustrativos y no pretenden ser limitantes.

EJEMPLO 49

Síntesis de compuestos ejemplificados ho₂c

<img file="MX389591B_D0095.tif" />

MeOH, HCI

Reflujo

2a

MeO₂C

1) dietil (cianometil) fosfonato, K₂CO₃, THF, H₂O, 60 C, 1 h;

MeO₂C

2b

2)H₂,10% Pd/C, EtOH, THF, rt, 2 h

<img file="MX389591B_D0096.tif" />

2c

CN

HCI (g) sat en EtOH/CH₂CI₂1:1,00, 20 h;

2NNH₃, 0C, 18 h;

NH

MeO₂C

<img file="MX389591B_D0097.tif" />

HCI

2d nh₂

NC

HCI nh

OEt

HN

<img file="MX389591B_D0098.tif" />

CO₂Me

2d

2M, NaOH MeOH

NC

NH

CO₂H

2e

DMA

Ver, Hirose M, et al., Design and synthesis of novel DFG-out RAF/vascular endothelial growth factor receptor 2 (VEGFR2) inhibitors: 3. Evaluation of 5-amino-linked thiazolo[5,4-d]pyrimidine and thiazolo[5,4-b]pyridine derivatives. Bioorg. Med. Chem. 2012, 15;20

IMPI σι

148 (25):5600-15.

ho₂c nh₂

Benzoilcloroformiato, ho₂c

CH₂N₂. MeOH Rear. de Wolff.

CO₂Me o

<img file="MX389591B_D0099.tif" />

7b

2M, NaOH, MeOH

NaHCO₃ H₂o,Dioxano

CO₂Me

NH₂

7c

78%

7d

7e

Ver, Clift MD, Silverman RB., Synthesis y evaluation of novel aromatic substrates y competitive inhibitors of GABA aminotransferase, Bioorg. Med. Chem. Lett,. 2008, 15;18(10):31225.

NC

NH

NC

7f

X = Cl, Br, SMe, SO₂Me

H₂N

<img file="MX389591B_D0100.tif" />

CO₂Et

7e

H₂N HCI

<img file="MX389591B_D0101.tif" />

Comercial 7g co₂h base, DMF

2M, NaOH, MeOH

NC

NH

N H

<img file="MX389591B_D0102.tif" />

co₂h

N H

<img file="MX389591B_D0103.tif" />

CO₂H

7a

A. M. El-Reedy, A. O. Ayyad y A. S. Ali, Azolopyrimidlnes y pyrimidoquinazolines from 4-chloropyrimidines, J. Het Chem. 1989, 26, 313-16.

HO

<img file="MX389591B_D0104.tif" />

CO₂Me

11c

DMF, CO₂CI₂

DME, 40 °C'

NC

NH O ♦

O

Cl

<img file="MX389591B_D0105.tif" />

CO₂Me

11d

N H

<img file="MX389591B_D0106.tif" />

CO₂H

NC

NH base, DMF

NH₂

Cl

CO₂Me

2M, NaOH MeOH

NC

NH O

CO₂H

11e

11f Comercial

11a

<img file="MX389591B_D0107.tif" />

<img file="MX389591B_D0108.tif" />

IMPI

149 prostaglandin D₂ receptor

Ver, Iwahashi M, et al., Design y synthesis of new antagonists, Bioorg. Med. Chem. 2011, 19(25):5361-71.

Br

<img file="MX389591B_D0109.tif" />

CO₂Et

13b > CaCOj h₂o ¡ Dioxano,6h,80°C t

HO

<img file="MX389591B_D0110.tif" />

CO₂Et

13c

NC

7f

HO

<img file="MX389591B_D0111.tif" />

13d ♦

CO₂Me

NC

NH

O

N

<img file="MX389591B_D0112.tif" />

CO₂H base, DMF

2M, NaOH MeOH

NC

NH

O

N

<img file="MX389591B_D0113.tif" />

13a

CO₂H

X = Cl, Br, SO₂Me, SMe

NH3-THF, THF, rt, 34h, rt

O

HO

<img file="MX389591B_D0114.tif" />

C0₂Me

13e

Ver, U.S. 2008/004,3O2(A1); y U.S. 8,716,470 (B2).

Equivalentes

Aquellos especializados en la técnica reconocerán, o ser capaces para determinar utilizando no más de experimentación de rutina, muchos equivalentes a las modalidades específicas y métodos descritos en este documento. Tales equivalentes están diseñados para ser comprendidos en el ámbito de la presente descripción.