Nova Patents
MX353340B

Cell culture improvements.

Abstract

The invention describes improved methods and compositions for producing a recombinant protein, e.g., an antibody, in mammalian cell culture. In addition, the invention provides improved cell culture media, including improved production media, feed solutions, and combination feeds, which may be used to improve protein productivity in mammalian cell culture.

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28 claims: 4 independent, 24 dependent

  1. 1
    CLAIMS REIVINDICACIONES IMPI IMPI INSTITUTO MSXICANO MSXICAN INSTITUTE DE LA PROHEDAD INDUSTRIAL OF INDUSTRIAL PROPERTY 1. Un método de lote alimentado para producir un anticuerpo anti-TNF-α humano que comprende una región variable de cadena ligera (LCVR) que comprende la secuencia SEQ ID NO:1 y una región variable de cadena pesada (HCVR) que comprende la secuencia SEQ ID NO:2, el método comprende cultivar células de Ovario de Hámster Chino (CHO) que comprenden un ácido nucleico que codifica la LCVR y la HCVR del anticuerpo anti-TNF-α en un medio de producción de cultivo celular a gran escala, en donde se monitorea la concentración de glucosa en el medio de producción celular, la concentración de glucosa en el medio disminuye por debajo de 2 g/L y se añade glucosa al medio cuando la concentración de glucosa en el medio disminuye por debajo de 2 g/L, o se monitorea la concentración de glucosa en el medio y se añade glucosa al medio para mantener la concentración de glucosa en el medio a una concentración de al menos 2 g/L pero no mayor de 7 g/L, de manera que se produce el anticuerpo anti-TNF-α, y en donde el anticuerpo producido se purifica adicionalmente por afinidad utilizando una resina de proteína A. one. A powered batch method of producing an anti-human TNF-α antibody comprising a light chain variable region (LCVR) comprising the sequence SEQ ID NO: 1 and a heavy chain variable region (HCVR) comprising the sequence SEQ ID NO: 2, the method comprises culturing Chinese Hamster Ovary (CHO) cells comprising a nucleic acid encoding the LCVR and HCVR of the anti-TNF-α antibody in a large-scale cell culture production medium, wherein the glucose concentration in the cell production medium is monitored, the glucose concentration in the medium decreases below 2 g / L and glucose is added to the medium when the glucose concentration in the medium falls below 2 g / L, or the glucose concentration in the medium is monitored and glucose is added to the medium to maintain the glucose concentration in the medium at a concentration of at least 2 g / L but not greater than 7 g / L, such that the anti-TNF-α antibody is produced, and wherein the produced antibody is further affinity purified using a protein A resin.
  2. 10
    A fed batch production method for producing adalimumab, which comprises cultivating Chinese Hamster Ovary (CHO) cells comprising a nucleic acid encoding adalimumab in a large-scale cell culture production medium, where the concentration of glucose in the medium, the concentration of glucose in the medium decreases by 10. Un método de producción de lote alimentado para producir adalimumab, que comprende cultivar células de Ovario de Hámster Chino (CHO) que comprenden un ácido nucleico que codifica adalimumab en un medio de producción de cultivo celular a gran escala, en donde se monitores la concentración de glucosa en el medio, la concentración de glucosa en el medio disminuye por 212 212 IMPI ^ IMPI^ INSTITUTO MEXICANO iC ^ΊΓ£χ DE LA PROPIEDAD debajo de 2 g/L, y se añade glucosa al medidNWCT^ndo¿2ta' concentración de glucosa en el medio disminuye ρδ Γ debajo der2 g7 L,1 o se monitorea la concentración de glucosa en el medio y se añade glucosa al medio para mantener la concentración de glucosa en el medio a una concentración de al menos 2 g/L pero no mayor de 7 g/L, de manera que se produce adalimumab, y en donde el adalimumab producido se purifica adicionalmente por afinidad utilizando una resina de proteína A. MEXICAN INSTITUTE iC ^ ΊΓ £ χ OF PROPERTY below 2 g / L, and glucose is added to the measureNWCT ^ ndo¿2ta 'concentration of glucose in the medium decreases ρδ Γ belowr2 g7 L,1 o The glucose concentration in the medium is monitored and glucose is added to the medium to maintain the glucose concentration in the medium at a concentration of at least 2 g / L but not greater than 7 g / L, so that adalimumab is produced , and wherein the produced adalimumab is further affinity purified using a protein A resin.
  3. 17
    17. El método de la reivindicación The method of claim IMPI® IMPI® INSTITUTO MEXICAI*’ MEXICAI INSTITUTE * ' 16, en don^e^S^c 16, in don ^ e ^ S ^ c
  4. 25
    A powered batch method of producing adalimumab, which comprises expressing adalimumab in Chinese Hamster Ovary (CHO) cells in a large-scale cell culture production medium, wherein the CHO cells comprise an expression vector encoding adalimumab, in where the glucose concentration in the medium is monitored, and the glucose concentration in the medium falls to a level between 1 and 5 g / L, and glucose is added to the medium to maintain the glucose concentration in the medium at least 1-5 g / L, and wherein adalimumab is further affinity purified using a protein A resin. 25. Un método de lote alimentado para producir adalimumab, que comprende expresar adalimumab en células de Ovario de Hámster Chino (CHO) en un medio de producción de cultivo celular a gran escala, en donde las células CHO comprenden un vector de expresión que codifica adalimumab, en donde se monitorea la concentración de glucosa en el medio, y la concentración de glucosa en el medio cae a un nivel entre 1 y 5 g/L, y se añade glucosa al medio para mantener la concentración de glucosa en el medio al menos 1-5 g/L, y en donde el adalimumab se purifica adicionalmente por afinidad utilizando una resina de proteína A.
Independent claims4