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ES2561427T3

Polypeptides with xylanase activity

Abstract

A polypeptide with xylanase activity and comprising an amino acid sequence, said amino acid sequence having at least an 88% identity with SEQ ID No. 1 and whose polypeptide has an amino acid substitution at position 110 with any other different amino acid residue selected from the group consisting of: asparagine (N), glutamic acid (E), tryptophan (W), alanine (A) and cysteine (C), and one or more amino acid substitutions selected from the group consisting of: 11F, 12F, 122D, 113A, 13Y, 54Q, 54W, 113D, 141Q, 175L, 122F, 34K, 99Y, 104W, 154R, 159D, 175K, 81I, 166F, 162E, 162D, 164F, 114D, 114Y, 114F, 118V, 175K, 77L, 77M, 77V, and 77Y, the position (s) being determined as the corresponding position (s) of the amino acid sequence of B. subtilis shown as SEQ ID No . 1; wherein the xylanase variant has a better bran solubilization activity, higher than that obtainable by using the corresponding wild type xylanase of SEQ ID No. 1.

Term

3.2 yearsto projected expiry

Projected expiry 23 December 2029, counted from filing; an application has no term until it is granted.

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10 claims: 7 independent, 3 dependent

  1. 1
    ES 2 561 427 T3 REIVINDICACIONES 1. Un polipéptido con actividad de xilanasa y que comprende una secuencia de aminoácidos, teniendo dicha secuencia de aminoácidos al menos una identidad del 88% con SEQ ID No. 1 y cuyo polipéptido tiene una sustitución de aminoácidos en la posición 110 con cualquier otro resto de aminoácido diferente seleccionado a partir del grupo que consiste en:asparagina (N), ácido glutámico (E), triptófano (W), alanina (A) y cisteína (C), y una o más sustituciones de aminoácidos seleccionadas a partir del grupo que consiste en: 11F, 12F, 122D, 113A, 13Y, 54Q, 54W, 113D, 141Q, 175L, 122F, 34K, 99Y, 104W, 154R, 159D, 175K, 81I, 166F, 162E, 162D, 164F, 114D, 114Y, 114F, 118V, 175K, 77L, 77M, 77V, y 77Y, estando determinada la(s) posición(ones) como la(s) posición(ones) correspondiente(s) de la secuencia de aminoácidos de B. subtilis mostrada como SEQ ID No. 1;en donde la variante de xilanasa tiene una mejor actividad de solubilización del salvado, más alta que la que puede obtenerse mediante el uso de la correspondiente xilanasa tipo salvaje de SEQ ID No. 1.
  2. 2
    El polipéptido de acuerdo con la reivindicación 1, en donde dicho polipéptido tiene mejor actividad de xilanasa cuando se compara con SEQ ID NO:1.
  3. 3
    El polipéptido de acuerdo con las reivindicaciones 1 ó 2, en donde dicho polipéptido tiene al menos 90, 92 ó 95% de identidad con SEQ ID No. 1.
  4. 4
    El polipéptido de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-3 que tiene un plegamiento β-enrollado.
  5. 5
    El polipéptido de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde la modificación de aminoácidos en la posición 110 es una sustitución en alanina.
  6. 6
    El polipéptido de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5 que tiene un número total de aminoácidos de menos de 250, tal como menos de 240, tal como menos de 230, tal como menos de 220, tal como menos de 210, tal como menos de 200 aminoácidos, tal como en el intervalo de 160 a 240, tal como en el intervalo de 160 a 220 aminoácidos.
  7. 7
    Un método para preparar un polipéptido de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1- 6, comprendiendo dicho método expresar una secuencia de nucleótidos que codifica a dicho polipéptido;y opcionalmente aislar y/o purificar el polipéptido después de la expresión.
  8. 8
    Una secuencia de nucleótidos que codifica un polipéptido de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6.
  9. 9
    Una composición que comprende el polipéptido de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-6 o un polipéptido preparado de acuerdo con la reivindicación 7 o la secuencia de nucleótidos de acuerdo con la reivindicación 8 en mezcla con un componente no tóxico.
  10. 10
    El uso del polipéptido de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-6 o un polipéptido preparado de acuerdo con la reivindicación 7 o la secuencia de nucleótidos de acuerdo con la reivindicación 8 en mezcla con un componente no tóxico o una composición de acuerdo con la reivindicación 9 en un método para modificar materiales de plantas.
Independent claims10