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EP0719862B1

A regulatory factor for expression of nitrilase gene and a gene thereof

Abstract

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EP0719862B1, drawing sheet 1
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Expired 27 December 2015, 10.7 years ago.

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8 claims: 8 independent, 0 dependent

  1. 1
    A two component regulatory factor which activates a nitrilase gene promoter, comprising a polypeptide having the amino acid sequence of SEQ ID No:1 and a polypeptide having the amino acid sequence of SEQ ID No: 2. Facteur régulateur à deux composants qui active un promoteur de gène de nitrilase, comprenant un polypeptide ayant la séquence d'acides aminés de SEQ ID No :1 et un polypeptide ayant la séquence d'acides aminés de SEQ ID No : 2. Zwei Komponenten-Regulationsfaktor, der einen Nitrilasegen-Promotor aktiviert, umfassend ein Polypeptid mit der Aminosäuresequenz von SEQ ID No. 1 und ein Polypeptid mit der Aminosäuresequenz von SEQ ID No. 2.
  2. 2
    A regulatory factor according to claim 1 whose activation of the nitrilase gene promoter is enhanced in the presence of a nitrile. Facteur régulateur selon la revendication 1, dont l'activation du promoteur de gène de nitrilase est augmentée en présence d'un nitrile. Regulationsfaktor nach Anspruch 1, dessen Aktivierung des Nitrilasegen-Promotors in Gegenwart eines Nitrils verstärkt ist.
  3. 3
    A DNA molecule encoding a regulatory factor of claim 1 or 2. DNA-Molekül, das einen Regulationsfaktor nach Anspruch 1 oder 2 codiert. Molécule d'ADN codant un facteur régulateur selon la revendication 1 ou 2.
  4. 4
    A DNA molecule according to claim 3 which possesses the nucleotide sequences of SEQ ID Nos:3 and 4. DNA-Molekül nach Anspruch 3, das die Nucleotidsequenzen von SEQ ID No. 3 und 4 besitzt. Molécule d'ADN selon la revendication 3, qui possède les séquences nucléotidiques de SEQ ID No : 3 et 4.
  5. 5
    A recombinant plasmid containing DNA coding for a regulatory factor of claim 1 or 2, a nitrilase gene containing a promoter region and a DNA region capable of replicating in cells of a microorganism belonging to the genus Rhodococcus. Plasmide recombiné contenant un ADN codant un facteur régulateur selon la revendication 1 ou 2, un gène de nitrilase contenant une région promotrice et une région d'ADN capable de se répliquer dans les cellules d'un micro-organisme appartenant au genre Rhodococcus. Rekombinantes Plasmid, enthaltend DNA, die einen Regulationsfaktor nach Anspruch 1 oder 2 codiert, ein Nitrilasegen, das eine Promotorregion enthält, und eine DNA-Region, die fähig ist zur Replikation in Zellen eines Mikroorganismus der Gattung Rhodococcus.
  6. 6
    A recombinant plasmid according to claim 5 wherein the DNA region capable of replicating in cells of a microorganism belonging to the genus Rhodococcus is from plasmid pRCOO1 (ATCC 4276), pRC002 (ATCC 14349), pRC003 (ATCC 14348) or pRC004 (IFO 3338). Plasmide recombiné selon la revendication 5 où la région d'ADN capable de se répliquer dans les cellules d'un micro-organisme appartenant au genre Rhodococcus provient du plasmide pRC001 (ATCC 4276), pRC002 (ATCC 14349), pRC003 (ATCC 14348) ou pRC004 (IFO 3338). Rekombinantes Plasmid nach Anspruch 5, wobei die DNA-Region, die in Zellen eines Mikroorganismus der Gattung Rhodococcus replizieren kann, vom Plasmid pRC001 (ATCC 4276), pRC002 (ATCC 14349), pRC003 (ATCC 14348) oder pRC004 (IFO 3338) stammt.
  7. 7
    A microorganism belonging to the genus Rhodococcus transformed with a recombinant plasmid of claim 5 or 6. Micro-organisme appartenant au genre Rhodococcus transformé avec un plasmide recombiné selon la revendication 5 ou 6. Mikroorganismus der Gattung Rhodococcus, transformiert mit einem rekombinanten Plasmid nach Anspruch 5 oder 6.
  8. 8
    A process for producing nitrilase, which process comprises:(i) culturing a microorganism of the genus Rhodococcus containing a recombinant DNA molecule encoding the regulatory factor of claim 1 or 2 and a nitrilase gene including its promoter under conditions such that the regulatory factor activates expression of the nitrilase gene;and(ii) recovering nitrilase from the culture. Procédé de production de nitrilase, lequel procédé comprend: (i) la culture d'un micro-organisme du genre Rhodococcus contenant une molécule d'ADN recombiné codant le facteur régulateur selon la revendication 1 ou 2 et un gène de nitrilase incluant son promoteur dans des conditions telles que le facteur régulateur active l'expression du gène de nitrilase;et(ii) la récupération de nitrilase à partir de la culture. Verfahren zur Produktion von Nitrilase, umfassend (i) Züchten eines Mikroorganismus der Gattung Rhodococcus, der ein rekombinantes DNA-Molekül enthält, das den Regulationsfaktor nach Anspruch 1 oder 2 codiert, und ein Nitrilasegen einschließlich seines Promotors, unter Bedingungen, unter denen der Regulationsfaktor die Expression des Nitrilasegens aktiviert;und(ii) Gewinnung der Nitrilase aus der Kultur.
Independent claims8