EP0472869A2

Plasmids of corynebacterium glutamicum and derived plasmid vectors.

Abstract

The invention relates to two plasmids isolated from the strain Corynebacterium glutamicum LP-6, deposited under the number DSM 5816, one of which has a high and the other has a low copy number, and from which plasmid vectors capable of autonomous replication in coryneform bacteria (shuttle vectors) can be derived. …<IMAGE>…

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9 claims: 3 independent, 6 dependent

  1. 1
    Plasmid pGA1, isoliert aus Corynebacterium glutamicum LP-6, hinterlegt unter der Nummer DSM 5816 charakterisiert durch eine Länge von∼ 49 Kb und folggende Restriktionschnittstellen:
  2. 2
    Plasmid pGA2, isoliert aus Corynebacterium glutamicum LP-6, hinterlegt unter der Nummer DSM 5816 charakterisiertdurch eine Länge von ∼ 19,5 Kb und folgende Restriktionsschnittstellen:
  3. 3
    Zur autonomen Replikation in coryneformen Bakterien befähigtes rekombinantes Plasmid, konstruiert aus Plasmid pGA1 nach Anspruch 1 durch Hinzufügen mindestens eines Fremd-DNA-Fragments.
  4. 4
    Zur autonomen Replikation in coryneformen Bakterien befähigtes rekombinantes Plasmid, konstruiert aus Plasmid pGA2 nach Anspruch 2 durch Hinzufügen mindestens eines Fremd-DNA-Fragments.
  5. 5
    Rekombinantes Plasmid (Plasmidvektor) gemäß den Ansprüchen 3 oder 4, zusammengesetzt aus a) dem Plasmid pGA1 oder pGA2 oder einer von diesen Plasmiden abgeleiteten DNA-Sequenz, b) einem DNA-Fragment, abgeleitet von einem in E.coli replizierenden Vektor, das ein Resistenzgen trägt.
  6. 6
    Plasmidvektor pHS2-1, gemäß Anspruch 5, bestehend aus dem Plasmid pGA1 und dem E.coli-Vektor pHSKml, charakterisiert durch die Restriktionskarte entsprechend Fig. 4.
  7. 7
    Plasmidvektor pFBH2 gemäß Anspruch 5, bestehend aus einer DNA-Sequenz aus pGA2 und dem mobilisierbaren E.coli-Vektor pK18::mob, charakterisiert durch die Restriktionskarte entsprechend Fig. 5 und Fig. 6.
  8. 8
    Rekombinantes Plasmid gemäß einem der Ansprüche 3 bis 7, welches zusätzlich ein in coryneformen Bakterien exprimierbares Gen enthält.
  9. 9
    Coryneforme Bakterien, welche ein rekombinantes Plasmid gemäß einem der Ansprüche 3 bis 8 enthalten.