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ECSP099800A

Production of oil in microorganisms

Abstract

The invention provides methods and compositions useful for the production of oils, fuels, oleochemicals and other compounds in microorganisms. In particular, the invention provides oil-bearing microorganisms and low-cost culture methods of such microorganisms. The invention also provides microbial cells containing exogenous genes encoding, for example a lipase, sucrose transporter, sucrose invertase, fructokinase, a polysaccharide-degrading enzyme, fatty acyl-ACP thioesterase, acyl-CoA / aldehyde reductase fat, acyl-CoA fat reductase, aldehyde fatty reductase, fatty aldehyde decarbonylase and / or an acyl carrier protein. The invention also includes methods for the manufacture of transportation fuel such as renewable diesel, biodiesel and renewable jet fuel.

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  1. 1
    REIVINDICACIONES 1. Un método para producir diesel renovable, caracterizado porque comprende:(a) cultivar una población de microorganismos en presencia de una fuente fija de carbono, en donde: (i) los microorganismos acumulan por lo menos 10% de su peso seco de células como lípidos y (¡i) la fuente fija de carbono es seleccionada del grupo que consiste de glicerol, material celulósico despolimerizado, sacarosa, melazas, glucosa, arabinosa, galactosa, xilosa, fructosa, arabinosa, mañosa, acetato y cualquier combinación de las anteriores;(b) aislar los componentes lípidos de los microorganismos cultivados y (c) someter los componentes de lípido aislados a una o más reacciones químicas para generar alcanos de cadena recta, mediante el cual se produce el diesel renovable.
  2. 2
    El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el microorganismo es una microalga.
  3. 3
    El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el microorganismo es seleccionado del grupo que consiste de las microalgas enlistadas en la Tabla 1.
  4. 4
    El método de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque el microorganismo es una especie del género Chlorella.
  5. 5
    El método de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque el microorganismo es seleccionado del grupo que consiste de Chlorella anitrata, Chlorella antárctica, Chlorella aureoviridis, Chlorella candida, Chlorella capsulata, Chlorella desiccata, Chlorella, ellipsoidea, Chlorella emersonii, Chlorella fusca, Chlorella fusca var. vacuolata, Chlorella glucotropha, Chlorella infusionum, Chlorella infusionum var. Actophila, Chlorella infusorium var. Auxenophila, Chlorella kessleri, Chlorella luteoviridis, Chlorella luteoviridis var. aureoviridis, Chlorella luteoviridis var. Lutescens, Chlorella miniata, Chlorella minutissima, Chlorella mutabilis, Chlorella nocturna, Chlorella parva, Chlorella photophila, Chlorella pringsheimii, Chlorella protothecoides, Chlorella regularis, Chlorella regularis var. mínima, Chlorella regularis var. umbricata, Chlorella reisiglii, Chlorella saccharophila, Chlorella saccharophila var. Ellipsoidea, Chlorella salina, Chlorella simplex, Chlorella sorokiniana, Chlorella sp., Chlorella sphaerica, Chlorella stigmatophora, Chlorella vanniellii, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris var. tertia, Chlorella vulgaris var. airidis, Chlorella vulgaris var. vulgaris, Chlorella vulgaris var. vulgaris f. tertia, Chlorella vulgaris var. vulgaris f. viridis, Chlorella cnthella y Chlorella zofigiensis.
  6. 6
    El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el microorganismo es una levadura oleaginosa.
  7. 7
    El método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque la levadura oleaginosa es seleccionada del grupo que consiste de Cryptococcus curvatus, Cryptococcus terricolus, Candida sp., Lipomyces starkeyi, Lipomyces lipofer, Endomycopsis vernalis, Rhodotorula glutinis, Rhodotorula gracilis y Yarrowia lipolytica.
  8. 8
    El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el microorganismo es un hongo.
  9. 9
    El método de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque el hongo es seleccionado del grupo que consiste de una especie del género Mortierella, Mortierella vinacea, Mortierella alpine, Pythium debaryanum, Mucor circinelloides, Aspergillus ochraceus, Aspergillus terreus, Penniliccium iilacinum, una especie del género Hensenulo, una especie del género Chaetomium, una especie del género Cadosporium, una especie del gémero Malbranchea, una especie del género Rhizopus y una especie del género Pythium.
  10. 10
    El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el microorganismo contiene por lo menos un gen de utilización de sacarosa exógeno.
  11. 11
    El método de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado porque el gen de utilización de sacarosa codifica un transportador de sacarosa, una invertasa de sacarosa, una hexocinasa, una glucocinasa o una fructocinasa.
  12. 12
    El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el microorganismo contiene por lo menos un gen exógeno que codifica una enzima de la ruta de lípido.
  13. 13
    El método de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque la ruta de enzima de lípidos es seleccionada del grupo que consiste de una estearoil-ACP desaturasa, una glicerolípido desaturasa, una piruvato deshidrogenasa, una acetil-CoA carboxilasa, una proteína portadora de acilo y una glicerol-3 fosfato aciltransferasa.
  14. 14
    Un método para producir combustible de jet, caracterizado porque comprende:(a) cultivar una población de microorganismos en presencia de una fuente fija de carbono, en donde: (i) los microorganismos acumulan por lo menos 10% de su peso seco de célula como lípido y (¡i) la fuente fija de carbono es seleccionada del grupo que consiste de glicerol, material celulósico despolimerizado, sacarosa, glucosa, arabinosa, galactosa, xilosa, fructosa, arabinosa, mañosa, acetato y cualquier combinación de los anteriores: (b) aislar componentes de lípidos a partir de los microorganismos cultivados y (c) someter los componentes de lípido aislados a una o más reacciones químicas para generar alcanos de cadena recta, mediante el cual se produce el combustible de jet.
  15. 15
    El método de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque el microorganismo es una microalga.
  16. 16
    El método de conformidad con la reivindicación 15, caracterizado porque el microorganismo es seleccionado del grupo que consiste de las microalgas enlistadas en la Tabla 1.
  17. 17
    El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque el microorganismo es una especie del género Chlorella.
  18. 18
    El método de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado porque el microorganismo es seleccionado del grupo que consiste de Chlorella anitrata, Chlorella antárctica, Chlorella aureoviridis, Chlorella candida, Chlorella capsulata, Chlorella desiccata, Chlorella, ellipsoidea, Chlorella emersonii, Chlorella fusca, Chlorella fusca var. vacuolata, Chlorella glucotropha, Chlorella infusionum, Chlorella infusionum var. Actophila, Chlorella infusorium var. Auxenophila, Chlorella kessleri, Chlorella luteoviridis, Chlorella luteoviridis var. aureoviridis, Chlorella luteoviridis var. Lutescens, Chlorella miniata, Chlorella minutissima, Chlorella mutabilis, Chlorella nocturna, Chlorella parva, Chlorella photophila, Chlorella pringsheimii, Chlorella protothecoides, Chlorella regularis, Chlorella regularis var. mínima, Chlorella regularis var. umbricata, Chlorella reisiglii, Chlorella saccharophila, Chlorella saccharophila var. Ellipsoidea, Chlorella salina, Chlorella simplex, Chlorella sorokiniana, Chlorella sp., Chlorella sphaerica, Chlorella stigmatophora, Chlorella vanniellii, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris var. tedia, Chlorella vulgaris var. airtáis, Chlorella vulgaris var. vulgaris, Chlorella vulgaris var. vulgaris f. tedia, Chlorella vulgaris var. vulgaris f. viridis, Chlorella cnthella y Chlorella zofigiensis.
  19. 19
    El método de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque el microorganismo es una levadura oleaginosa.
  20. 20
    El método de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado porque la levadura oleaginosa es seleccionada del grupo que consiste de Cryptococcus curvatus, Cryptococcus terricolus, Candida sp., Lipomyces starkeyi, Lipomyces lipofer, Endomycopsis vernalis, fíhodotorula glutinis, fíhodotorula gracilis y Yarrowia lipolytica.
  21. 21
    El método de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque el microorganismo es un hongo.
  22. 22
    El método de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque el hongo es seleccionado a partir del grupo que consiste de una especie del género Modierella, Modierella vinacea, Modierella alpine, Pythium debaryanum, Mucor circinellotáes, Aspergillus ochraceus, Aspergillus terreus, Penniliccium iilacinum, una especie del género Hensenulo, una especie del género Chaetomium, una especie del género Cadosporíum, una especie del gémero Malbranchea, una especie del género fíhizopus y una especie del género Pythium.
  23. 23
    El método de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque el microorganismo contiene por lo menos un gen de utilización de sacarosa exógeno.
  24. 24
    El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque el gen de utilización de sacarosa codifica un transportador de sacarosa, una invertasa de sacarosa, una hexocinasa, una glucocinasa o una fructocinasa.
  25. 25
    El método de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque el microorganismo contiene por lo menos un gen exógeno que codifica una enzima de la ruta de lípidos.
  26. 26
    El método de conformidad con la reivindicación 25, caracterizado porque la enzima de la ruta de lípido es seleccionada a partir del grupo que consiste de estearoil-ACP desaturasa, una glicerolípido desaturasa, una piruvato deshidrogenasa, una acetil-CoA carboxilasa, una proteína portadora de acilo y una glicerol-3 fosfato aciltransferasa.
  27. 27
    Una composición de hidrocarburos líquidos, caracterizada porque es elaborada de acuerdo con el método de la reivindicación 1, en donde la composición se conforma a las especificaciones de ASTM D975.
  28. 28
    La composición de conformidad con la reivindicación 27, caracterizada porqueel microorganismo es una microalga.
  29. 29
    La composición de conformidad con la reivindicación 28, caracterizada porqueel microorganismo es seleccionado a partir del grupo que consiste de las microalgas enlistadas en la Tabla 1.
  30. 30
    La composición de conformidad con la reivindicación 29, caracterizada porqueel microorganismo es una especia del género Chlorella.
  31. 31
    La composición de conformidad con la reivindicación 30, caracterizada porqueel microorganismo es seleccionado del grupo que consiste de Chlorella anitrata, Chlorella antartica, Chlorella aureoviridis, Chlorella candida, Chlorella capsulata, Chlorella dessicata, Chlorella ellipsoidea, Chlorella emersonii, Chlorella fusca, Chlorella fusca var. Vacuolata, Chlorella glucorotropha, Chlorella infosium, Chlorella infosium var actophila, Chlorella infosium var auxeophila, Chlorella kessleri, Chlorella luteoviridis, Chlorella luteoviridis var aureoviridis, Chlorella luteoviridis var lutescens, Chlorellaminiata, Chlorella minutissima, Chlorella mutabilis, Chlorella nocturna, Chlorella parva, Chlorella photophila, Chlorella pringsheimii, Chlorella protothecoides, Chlorella regularis, Chlorella regularis var mínima, Chlorella regularis var umbricata, Chlorella reisiglii, Chlorella saccharophila, Chlorella saccharofila var ellipsoidea, Chlorella salina, Chlorella simplex, Chlorella sorokiniana, Chlorella sp., Chlorella sphaerica, Chlorella stigmatophora, Chlorella vannielli, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris var tedia, Chlorella vulgaris var airidis, Chlorellavulgaris var vulgarís, Chlorella vulgaris var vulgarías f. tedia, Chlorella vulgarias var vulgarias f. viridis, Chlorella xanthella y Chlorella zofingiensis.
  32. 32
    La composición de conformidad con la reivindicación 27, caracterizada porque el microorganismo es una levadura oleaginosa.
  33. 33
    La composición de conformidad con la reivindicación 32, caracterizada porque la levadura oleaginosa es seleccionada del grupo que consiste de Cryptococcus curvatus, Cryptococcus terrícolus, Candida sp., Lipomyces starkeyi, Lipomyces lipofer, Endomyces vernalis, Flhodotorula glutinis, fíhodotorula gracilis y Yarrowia lipolytica.
  34. 34
    La composición de conformidad con la reivindicación 27, caracterizada porque el microorganismo es un hongo.
  35. 35
    La composición de conformidad con la reivindicación 34, caracterizada porque el hongo es seleccionado del grupo que consiste de una especie del género Mortierella, Mortierella vinacea, Mortierella alpine, Pythium debaryanum, Mucor circinelloides, Aspergillus ochraceus, Aspergillus terreus, Pennicilium iilacinum, una especie del género Hansenulo, una especie del género Chaetomium, una especie del género Cladosporium, una especie del género Malbranchea, una especie del género Rhizopus y una especie del género Pythium.
  36. 36
    La composición de conformidad con la reivindicación 27, caracterizada porque el microorganismo contiene por lo menos un gen de utilización de sacarosa exógeno.
  37. 37
    La composición de conformidad con la reivindicación 36, caracterizada porque el gen de utilización de sacarosa codifica un transportador de sacarosa, una invertasa de sacarosa, una hexocinasa, una glucocinasa o una fructocinasa.
  38. 38
    La composición de conformidad con la reivindicación 27, caracterizada porque el microorganismo contiene por lo menos un gen exógeno que codifica a una enzima de ruta de lípido.
  39. 39
    La composición de conformidad con la reivindicación 38, caracterizada porque la enzima de ruta de lípido es seleccionada del grupo que consiste de una estearoil-ACP desaturasa, una glicerolípido desaturasa, una priruvato deshidrogenasa, acil-CoA carboxilasa, una proteína portadora de acilo y una glicerol-3-fosfato aciltransferasa.
  40. 40
    Una composición de hidrocarburos líquidos caracterizada porque es producida de acuerdo con el método de la reivindicación 14, en donde la composición se conforma a las especificaciones de D1655 de ASTM.
  41. 41
    La composición de conformidad con la reivindicación 40, caracterizada porque el microorganismo es una microalga.
  42. 42
    La composición de conformidad con la reivindicación 41, caracterizada porque el microorganismo es seleccionado del grupo que consiste de las microalgas enlistadas en la tabla 1.
  43. 43
    La composición de conformidad con la reivindicación 42, caracterizada porque el microorganismo es una especie del género Chlorella.
  44. 44
    La composición de conformidad con la reivindicación 43, caracterizada porque el microorganismo es seleccionado del grupo que consiste de Chlorella anitrata, Chlorella antartica, Chlorella aureoviridis, Chlorella candida, Chlorella capsúlala, Chlorella dessicata, Chlorella ellipsoidea, Chlorella emersonii, Chlorella fusca, Chlorella fusca var. Vacuoiata, Chlorella glucorotropha, Chlorella infosium, Chlorella infosium var actophila, Chlorella infosium var auxeophila, Chlorella kessleri, Chlorella luteoviridis, Chlorella luteoviridis var aureoviridis, Chlorella luteoviridis var lutescens, Chlorellaminiata, Chlorella minutissima, Chlorella mutabilis, Chlorella nocturna, Chlorella parva, Chlorella photophila, Chlorella pringsheimii, Chlorella protothecoides, Chlorella regularis, Chlorella regularis var mínima, Chlorella regularis var umbricata, Chlorella reisiglii, Chlorella saccharophila, Chlorella saccharofila var ellipsoidea, Chlorella salina, Chlorella simplex, Chlorella sorokiniana, Chlorella sp., Chlorella sphaerica, Chlorella stigmatophora, Chlorella vannielli, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris var tertia, Chlorella vulgaris var airidis, Chlorellavulgaris var vulgaris, Chlorella vulgaris var vulgarias f. tertia, Chlorella vulgarias var vulgarias f. viridis, Chlorella xanthella y Chlorella zofingiensis.
  45. 45
    La composición de conformidad con la reivindicación 40, caracterizada porque el microorganismo es una levadura oleaginosa.
  46. 46
    La composición de conformidad con la reivindicación 45, caracterizada porque la levadura oleaginosa es seleccionada del grupo que consiste de Cryptococcus curvatus, Cryptococcus terricolus, Candida sp., Lipomyces starkeyi, Lipomyces lipofer, Endomyces vernalis, Rhodotorula glutinis, Rhodotorula gracilis y Yarrowia lipolytica.
  47. 47
    La composición de conformidad con la reivindicación 40, caracterizada porque el microorganismo es un hongo.
  48. 48
    La composición de conformidad con la reivindicación 47, caracterizada porque el hongo es seleccionado del grupo que consiste de una especie del género Mortierella, Mortierella vinacea, Mortierella alpine, Pythium debaryanum, Mucor circinelloides, Aspergillus ochraceus, Aspergillus terreus, Pennicilium iilacinum, una especie del género Hansenulo, una especie del género Chaetomium, una especie del género Cladosporium, una especie del género Malbranchea, una especie del género Rhizopus y una especie del género Pythium.
  49. 49
    La composición de conformidad con la reivindicación 40, caracterizada porque el microorganismo contiene por lo menos un gen de utilización de sacarosa exógeno.
  50. 50
    La composición de conformidad con la reivindicación 49, caracterizada porque el gen de utilización de sacarosa codifica un transportador de sacarosa, una invertasa de sacarosa, una hexocinasa, una glucocinasa o una fructocinasa.
  51. 51
    La composición de conformidad con la reivindicación 40, caracterizada porque el microorganismo contiene por lo menos un gen exógeno que codifica a una enzima de ruta de lípido.
  52. 52
    La composición de conformidad con la reivindicación 51, caracterizada porque la enzima de ruta de lípido es seleccionada del grupo que consiste de una estearoil-ACP desaturasa, una glicerolípido desaturasa, una priruvato deshidrogenasa, acil-CoA carboxilasa, una proteína portadora de acilo y una glicerol-3-fosfato aciltransferasa.
  53. 53
    Una microalga o células de levadura caracterizada porque ha sido diseñada genéticamente y/o seleccionada para expresar una enzima de la ruta de lípido a un nivel alterado en comparación con una célula tipo silvestre de la misma especia.
  54. 54
    La célula de conformidad con la reivindicación 53, caracterizada porque la célula produce más lípido en comparación con la célula tipo silvestre cuando ambas células son cultivadas bajo las mismas condiciones.
  55. 55
    La célula de conformidad con la reivindicación 53, caracterizada porque la célula ha sido diseñada genéticamente y/o seleccionada para expresar una enzima de ruta de lípido a un nivel más alto que las células tipo silvestre.
  56. 56
    La célula de conformidad con la reivindicación 55, caracterizada porque la enzima de ruta de lípido es seleccionada del grupo que consiste de piruvato deshidrogenasa, acil-CoA carboxilasa, una proteína portadora de acilo y una glicerol-3-fosfato aciltransferasa.
  57. 57
    La célula de conformidad con la reivindicación 53, caracterizada porque la célula ha sido diseñada genéticamente y/o seleccionada para expresar una enzima de ruta de lípido a un nivel más bajo que las células tipo silvestre.
  58. 58
    La célula de conformidad con la reivindicación 57, caracterizada porque la enzima de ruta de lípido comprende citrato cintasa.
  59. 59
    La célula de conformidad con la reivindicación 53, caracterizada porque la célula ha sido diseñada genéticamente y/o seleccionada para expresar un regulador global de síntesis de ácido graso a un nivel más alterado en comparación con la célula tipo silvestre, mediante lo cual los niveles de expresión de una prioridad de genes sintéticos de acido graso son alterados en comparación con la célula tipo silvestre.
  60. 60
    La célula de conformidad con la reivindicación 57, caracterizada porque la enzima de ruta de lípido comprende una enzima que modifica un acido graso.
  61. 61
    La célula de conformidad con la reivindicación 60, caracterizada porque la enzima de ruta de lípido es seleccionada de estearoil-ACP desaturasa y una glicerolípido desaturasa.
  62. 62
    La célula de conformidad con la reivindicación 53, caracterizada porque la célula es una especie de microalga seleccionada de la tabla 1.
  63. 63
    La célula de microalga de conformidad con la reivindicación 62, caracterizada porque la microalga es del género Chlorella.
  64. 64
    La microalga de de conformidad con la reivindicación 63, caracterizada porque la microalga es de la especie seleccionada del grupo que consiste de Chlorella anitrata, Chlorella antartica, Chlorella aureoviridis, Chlorella candida, Chlorella capsúlala, Chlorella dessicata, Chlorella ellipsoidea, Chlorella emersonii, Chlorella fusca, Chlorella fusca var. Vacuoiata, Chlorella glucorotropha, Chlorella infosium, Chlorella infosium var actophila, Chlorella infosium var auxeophila, Chlorella kessleri, Chlorella luteoviridis, Chlorella luteoviridis var aureoviridis, Chlorella luteoviridis var lutescens, Chlorellaminiata, Chlorella minutissima, Chlorella mutabilis, Chlorella nocturna, Chlorella parva, Chlorella photophila, Chlorella pringsheimii, Chlorella protothecoides, Chlorella regularis, Chlorella regularis var mínima, Chlorella regularis var umbricata, Chlorella reisiglii, Chlorella saccharophila, Chlorella saccharofila var ellipsoidea, Chlorella salina, Chlorella simplex, Chlorella sorokiniana, Chlorella sp., Chlorella sphaerica, Chlorella stigmatophora, Chlorella vannielli, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris var tertia, Chlorella vulgaris var airidis, Chlorellavulgaris var vulgaris, Chlorella vulgaris var vulgarias f. tertia, Chlorella vulgarias var vulgarias f. viridis, Chlorella xanthella y Chlorella zofingiensis.
  65. 65
    Un microbio productor de aceite que contiene una o más genes exógenos caracterizados, porque los genes exógenos codifican proteínas seleccionadas del grupo que consiste de una acil-ACP tioesterasa grasa, acil-CoA reductasa grasa, una aldehido reductasa grasa, una acil-CoA/aldehído reductasa grasa, una aldehido descarbonilasa grasa y una proteína portadora de acilo.
  66. 66
    El microbio de conformidad con la reivindicación 65, caracterizada porque el microbio es una microalga.
  67. 67
    El microbio de conformidad con la reivindicación 65, caracterizado porque el microorganismo es una levadura oleaginosa.
  68. 68
    El microbio de conformidad con la reivindicación 65, caracterizada porque la levadura oleaginosa es seleccionada del grupo que consiste de Cryptococcus curvatus, Cryptococcus terricolus, Candida sp., Lipomyces starkeyi, Lipomyces lipofer, Endomyces vernalis, Rhodotorula glutinis, Flhodotorula gracilis y Yarrowia lipolytica.
  69. 69
    El microbio de conformidad con la reivindicación 65, caracterizada porque el microorganismo es un hongo.
  70. 70
    El microbio de conformidad con la reivindicación 69, caracterizada porque el hongo es seleccionado del grupo que consiste de una especie del género Mortierella, Mortierella vinacea, Mortierella alpine, Pythium debaryanum, Mucor circinelloides, Aspergillus ochraceus, Aspergillus terreus, Pennicilium iilacinum, una especie del género Hansenulo, una especie del género Chaetomium, una especie del género Cladosporíum, una especie del género Malbranchea, una especie del género fíhizopus y una especie del género Pythium.
  71. 71
    El microbio de conformidad con la reivindicación 65, caracterizada porque el microbio es seleccionado del grupo que consiste de los microorganismos enlistados en la tabla 1.
  72. 72
    El microbio de conformidad con la reivindicación 71, caracterizada porque el microbio es una especia del género Chlorella.
  73. 73
    El microbio de conformidad con la reivindicación 72, caracterizada porque la microalga es de la especie seleccionada del grupo que consiste de Chlorella anitrata, Chlorella antartica, Chlorella aureoviridis, Chlorella candida, Chlorella capsulata, Chlorella dessicata, Chlorella ellipsoidea, Chlorella emersonii, Chlorella fusca, Chlorella fusca var. Vacuolata, Chlorella glucorotropha, Chlorella infosium, Chlorella infosium var actophila, Chlorella infosium var auxeophila, Chlorella kessleri, Chlorella luteoviridis, Chlorella luteoviridis var aureoviridis, Chlorella luteoviridis var lutescens, Chlorellaminiata, Chlorella minutissima, Chlorella mutabilis, Chlorella nocturna, Chlorella parva, Chlorella photophila, Chlorella pringsheimii, Chlorella protothecoides, Chlorella regularis, Chlorella regularis var mínima, Chlorella regularis var umbricata, Chlorella reisiglii, Chlorella saccharophila, Chlorella saccharofila var ellipsoidea, Chlorella salina, Chlorella simplex, Chlorella sorokiniana, Chlorella sp., Chlorella sphaerica, Chlorella stigmatophora, Chlorella vannielli, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris var tedia, Chlorella vulgaris var airidis, Chlorellavulgaris var vulgaris, Chlorella vulgaris var vulgarías f. tedia, Chlorella vulgarias var vulgarias f. viridis, Chlorella xanthella y Chlorella zofingiensis.
  74. 74
    El microbio de conformidad con la reivindicación 73, caracterizada porque la especie seleccionada es Chlorella minutissima, Chlorella emersonii, Chlorella sorokiniana, Chlorella ellipsoidea o Chlorella sp.
  75. 75
    El microbio de conformidad con la reivindicación 65, caracterizada el gen exógeno está en enlace operable con un promotor, que es inducible o represible en respuesta a un estímulo.
  76. 76
    El microbio de conformidad con la reivindicación 75, caracterizada porque el estimulo es seleccionado del grupo que consiste de una molécula pequeña provista exógenamente, calor, frío y luz.
  77. 77
    El microbio de conformidad con la reivindicación 65, caracterizada porque el gen exógeno es expresado en un compartimento celular.
  78. 78
    El microbio de conformidad con la reivindicación 77, caracterizada porque el compartimento celular es seleccionado del grupo que consiste de un cloroplasto y una mitocondña.
  79. 79
    El microbio de conformidad con la reivindicación 65, caracterizada porque el gen exógeno codifica a una acil-ACP tioesterasa de ácido graso.
  80. 80
    El microbio de conformidad con la reivindicación 79, caracterizada porque la tioesterasa codificada por el gen exógeno cataliza le escisión de un ácido graso de 8 a 18 átomos de carbono de una proteína portadora de acilo (ACP).
  81. 81
    El microbio de conformidad con la reivindicación 80, caracterizada porque la tioesterasa codificada por el gen exógeno cataliza la escisión de un ácido graso de 10 a 14 átomos de carbono de una ACP.
  82. 82
    El microbio de conformidad con la reivindicación 81, caracterizada porque la tioesterasa codificada por el gen exógeno cataliza la escisión de un ácido graso de 12 átomos de carbono de una ACP.
  83. 83
    El microbio de conformidad con la reivindicación 65, caracterizada porque el gen exógeno codifica a una acil-CoA/aldehído reductasa grasa.
  84. 84
    El microbio de conformidad con la reivindicación 83, caracterizada porque la reductasa codificada por el gen exógeno cataliza la reducción de una acil-CoA grasa de 20 a 30 átomos de carbono a un alcohol primario correspondiente.
  85. 85
    El microbio de conformidad con la reivindicación 83, caracterizada porque la reductasa codificada por el gen exógeno cataliza la reducción de una acil-CoA grasa de 8 a 18 átomos de carbono a un alcohol primario correspondiente.
  86. 86
    El microbio de conformidad con la reivindicación 85, caracterizada porque la reductasa codificada por el gen exógeno cataliza la reducción de una acil-CoA grasa de 10 a 14 átomos de carbono a un alcohol primario correspondiente.
  87. 87
    El microbio de conformidad con la reivindicación 86, caracterizado porque la reductasa codificada por el gen exógeno cataliza la reducción de una acil-CoA grasa de 12 átomos de carbono a un dodecanol.
  88. 88
    El microbio de conformidad con la reivindicación 65, caracterizado porque el gen exógeno codifica una acil-CoA reductasa grasa.
  89. 89
    El microbio de conformidad con la reivindicación 88, caracterizado porque la reductasa codificada por el gen exógeno cataliza la reducción de una acil-CoA grasa de 8 a 18 átomos de carbono a un aldehido correspondiente.
  90. 90
    El microbio de conformidad con la reivindicación 89, caracterizado porque la reductasa codificada por el gen exógeno cataliza la reducción de una acil-CoA grasa de 12 átomos de carbono a dodecanal.
  91. 91
    El microbio de conformidad con la reivindicación 65, caracterizado porque el microbio contiene además uno o más genes de utilización de sacarosa exógenos.
  92. 92
    Un microbio que contiene dos genes exógenos, caracterizado porque un primer gen exógeno codifica una acil-ACP tioesterasa grasa y un segundo gen exógeno codifica una proteína seleccionada del grupo que consiste de una acil-CoA reductasa grasa, una acil-CoA/aldehído reductasa grasa y una proteína portadora de acilo.
  93. 93
    El microbio de conformidad con la reivindicación 92, caracterizado porque el microbio es una microalga.
  94. 94
    El microbio de conformidad con la reivindicación 92, caracterizado porque el microorganismo es una levadura oleaginosa.
  95. 95
    El microbio de conformidad con la reivindicación 94, caracterizada porque la levadura oleaginosa es seleccionada del grupo que consiste de Cryptococcus curvatus, Cryptococcus terricolus, Candida sp., Lipomyces starkeyi, Lipomyces lipofer, Endomyces vernalis, Flhodotorula glutinis, Rhodotorula gracilts y Yarrowia lipolytica.
  96. 96
    El microbio de conformidad con la reivindicación 92, caracterizada porque el microorganismo es un hongo.
  97. 97
    El microbio de conformidad con la reivindicación 96, caracterizada porque el hongo es seleccionado del grupo que consiste de una especie del género Mortierella, Mortierella vinacea, Mortierella alpine, Pythium debaryanum, Mucor circinelloides, Aspergillus ochraceus, Aspergillus terreus, Pennicilium iilacinum, una especie del género Hansenulo, una especie del género Chaetomium, una especie del género Cladosporium, una especie del género Malbranchea, una especie del género Rhizopus y una especie del género Pythium.
  98. 98
    El microbio de conformidad con la reivindicación 92, caracterizada porque el microbio es seleccionado del grupo que consiste de los microorganismos enlistados en la tabla 1.
  99. 99
    El microbio de conformidad con la reivindicación 98, caracterizada porque el microbio es una especia del género Chlorella.
  100. 100
    El microbio de conformidad con la reivindicación 99, caracterizada porque la microalga es de la especie seleccionada del grupo que consiste de Chlorella anitrata, Chlorella antartica, Chlorella aureoviridis, Chlorella candida, Chlorella capsulata, Chlorella dessicata, Chlorella ellipsoidea, Chlorella emersonii, Chlorella fusca, Chlorella fusca var. Vacuolata, Chlorella glucorotropha, Chlorella infosium, Chlorella infosium var actophila, Chlorella infosium var auxeophila, Chlorella kessleri, Chlorella luteoviridis, Chlorella luteoviridis var aureoviridis, Chlorella luteoviridis var lutescens, Chlorellaminiata, Chlorella minutissima, Chlorella mutabilis, Chlorella nocturna, Chlorella parva, Chlorella photophila, Chlorella pringsheimii, Chlorella protothecoides, Chlorella regularis, Chlorella regularis var mínima, Chlorella regularis var umbricata, Chlorella reisiglii, Chlorella saccharophila, Chlorella saccharofila var ellipsoidea, Chlorella salina, Chlorella simplex, Chlorella sorokiniana, Chlorella sp., Chlorella sphaerica, Chlorella stigmatophora, Chlorella vannielli, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris var tedia, Chlorella vulgaris var airidis, Chlorellavulgaris var vulgaris, Chlorella vulgaris var vulgarias f. tedia, Chlorella vulgarias var vulgarias f. viridis, Chlorella xanthella y Chlorella zofingiensis.
  101. 101
    El microbio de conformidad con la reivindicación 100, caracterizada porque la especie seleccionada es Chlorella minutlssima, Chlorella emersonii, Chlorella sorokiniana, Chlorella ellipsoidea o Chlorella sp.
  102. 102
    El microbio de conformidad con la reivindicación 92, caracterizada porque cada uno de los dos genes exógenos están en enlace operable con un promotor, que es Inducible en respuesta a un estímulo.
  103. 103
    El microbio de conformidad con la reivindicación 102, caracterizado porque cada promotor es inducible en respuesta a un estímulo idéntico.
  104. 104
    El microbio de conformidad con la reivindicación 92, caracterizado porque la tioesterasa codificada por el primer gen exógeno cataliza la escisión de un ácido graso de 8 a 18 átomos de carbono de la ACP.
  105. 105
    El microbio de conformidad con la reivindicación 104, caracterizado porque el segundo gen exógeno codificada una acil-CoA/aldehpido reductasa grasa que cataliza la reducción de un acil-CoA graso de 8 a 18 átomos de carbono a un alcohol primario correspondiente.
  106. 106
    El microbio de conformidad con la reivindicación 105, caracterizado porque la tioesterasa codificada por el primer gen exógeno cataliza la escisión de un ácido graso de 10 a 14 átomos de carbono de una ACP y la reductasa codificada por el segundo gen exógeno cataliza la reducción de una acil-CoA grasa de 10 a 14 átomos de carbono al alcohol primario correspondiente, en donde la tioesterasa y la reductasa actúan sobre la misma longitud de cadena de carbonos.
  107. 107
    El microbio de conformidad con la reivindicación 106, caracterizado porque la tioesterasa codificada por el primer gen exógeno cataliza la escisión de un ácido graso de 12 átomos de carbono de una ACP y la reductasa codificada por el segundo gen exógeno cataliza la reducción de una acil-CoA grasa de 12 átomos de carbono a dodecanol.
  108. 108
    El microbio de conformidad con la reivindicación 104, caracterizado porque el segundo gen exógeno codifica una acil-CoA reductasa grasa que cataliza la reducción de una acil-CoA grasa de 8 a 18 átomos de carbono a un aldehido correspondiente.
  109. 109
    El microbio de conformidad con la reivindicación 92, caracterizado porque el segundo gen exógeno codifica una acil-CoA reductasa grasa y el microbio contiene además un tercer gen exógeno que codifica una aldehido descarbonilasa grasa.
  110. 110
    El microbio de conformidad con la reivindicación 109, caracterizado porque la tioesterasa codificada por el primer gen exógeno cataliza la escisión de un ácido graso de 8 a 18 átomos de carbono de una ACP, la reductasa codificada por el segundo gen exógeno cataliza la reducción de una acil-CoA grasa de 8 a 18 átomos de carbono a un aldehido graso correspondiente y la descarbonilasa codificada por el tercer gen exógeno cataliza la conversión de un aldehido graso de 8 a 18 átomos de carbono a un alcano correspondiente, en donde la tioesterasa, la reductasa y descarbonilasa actúan sobre la misma longitud de cadena de carbonos.
  111. 111
    El microbio de conformidad con la reivindicación 92, caracterizado porque el microbio contiene además uno o más genes de utilización de sacarosa exógenos.
  112. 112
    El microbio de conformidad con la reivindicación 92, caracterizado porque el segundo gen exógeno codifica una proteína portadora de acilo que es co- expresada naturalmente con al acil-ACP tioesterasa grasa.
  113. 113
    El microbio de conformidad con la reivindicación 92, caracterizado porque el segundo gen exógeno codifica una proteína portadora de acilo y el microbio contiene además un tercer gen exógeno que codifica una proteína seleccionada del grupo que consiste de una acil-CoA reductasa grasa y una acil-CoA/aldehído reductasa.
  114. 114
    El microbio de conformidad con la reivindicación 113, caracterizado porque el tercer gen exógeno codifica una acil-CoA reductasa grasa y el microbio contiene además un cuarto gen exógeno que codifica una aldehido desacarbonilasa grasa.
  115. 115
    Un método para producir una molécula en una población de microbios, el método comprende cultivar una población de microbios en un medio de cultivo, caracterizado porque los microbios contienen:i) un primer gen exógeno que codifica una acil-ACP tioesterasa grasa y ¡i) un segundo gen exógeno que codifica una acil-CoA/aldehído reductasa grasa y en donde los microbios sintetizan un ácido graso enlazado a una proteína portadora de acilo (ACP), la acil-ACP tioesterasa grasa cataliza la escisión del ácido graso de ACP para producir, por medio de procesamiento adicional, una acil-CoA reductasa grasa y la acilCoA/aldehído reductasa grasa cataliza la reducción del acil-CoA a un alcohol.
  116. 116
    El método de conformidad con la reivindicación 115, caracterizado porque el microbio es una microalga.
  117. 117
    El método de conformidad con la reivindicación 115, caracterizado porque el microorganismo es una levadura oleaginosa.
  118. 118
    El método de conformidad con la reivindicación 117, caracterizado porque la levadura oleaginosa es seleccionada del grupo que consiste de Cryptococcus curvatus, Cryptococcus terricolus, Candida sp., Lipomyces starkeyi, Lipomyces lipofer, Endomyces vernalis, Rhodotorula glutinis, Rhodotorula gracilis y Yarrowia lipolytica.
  119. 119
    El método de conformidad con la reivindicación 115, caracterizado porque el microorganismo es un hongo.
  120. 120
    El método de conformidad con la reivindicación 119, caracterizado porque el hongo es seleccionado del grupo que consiste de una especie del género Mortierella, Mortierella vinacea, Mortierella alpine, Pythium debaryanum, Mucor circinelloides, Aspergillus ochraceus, Aspergillus terreus, Pennicilium iilacinum, una especie del género Hansenulo, una especie del género Chaetomium, una especie del género Cladosporíum, una especie del género Malbranchea, una especie del género fíhizopus y una especie del género Pythium.
  121. 121
    El método de conformidad con la reivindicación 115, caracterizado porque el microbio es seleccionado del grupo que consiste de los microorganismos enlistados en la tabla 1.
  122. 122
    El método de conformidad con la reivindicación 121, caracterizado porque el microbio es una especia del género Chlorella.
  123. 123
    El método de conformidad con la reivindicación 122, caracterizado porque la especie seleccionada del grupo que consiste de Chlorella anitrata, Chlorella antartica, Chlorella aureoviridis, Chlorella candida, Chlorella capsúlala, Chlorella dessicata, Chlorella ellipsoidea, Chlorella emersonii, Chlorella fusca, Chlorella fusca var. Vacuolata, Chlorella glucorotropha, Chlorella infosium, Chlorella infosium var actophila, Chlorella infosium var auxeophila, Chlorella kessleri, Chlorella luteoviridis, Chlorella luteoviridis var aureoviridis, Chlorella luteoviridis var lutescens, Chlorellaminiata, Chlorella minutissima, Chlorella mutabilis, Chlorella nocturna, Chlorella parva, Chlorella photophila, Chlorella pringsheimii, Chlorella protothecoides, Chlorella regularis, Chlorella regularis var mínima, Chlorella regularis var umbricata, Chlorella reisiglii, Chlorella saccharophila, Chlorella saccharofila var ellipsoidea, Chlorella salina, Chlorella simplex, Chlorella sorokiniana, Chlorella sp., Chlorella sphaerica, Chlorella stigmatophora, Chlorella vannielli, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris var tedia, Chlorella vulgaris var airidis, Chlorellavulgaris var vulgaris, Chlorella vulgaris var vulgarias f. tedia, Chlorella vulgarias var vulgarias f. viridis, Chlorella xanthella y Chlorella zofingiensis.
  124. 124
    El método de conformidad con la reivindicación 123, caracterizado porque la especie seleccionada es Chlorella minutissima, Chlorella emersonii, Chlorella sorokiniana, Chlorella ellipsoidea o Chlorella sp.
  125. 125
    El método de conformidad con la reivindicación 115, caracterizada porque el medio de cultivo contiene glicerol.
  126. 126
    El método de conformidad con la reivindicación 125, caracterizada porque el glicerol es un producto secundario de un proceso de transesterificación.
  127. 127
    El método de conformidad con la reivindicación 125, caracterizado porque el medio de cultivo contiene glicerol y por lo menos otra fuente de carbono fija.
  128. 128
    El método de conformidad con la reivindicación 127, caracterizado porque la por lo menos otra fuente de carbono fija es sacarosa.
  129. 129
    El método de conformidad con la reivindicación 127, caracterizado porque todo del glicerol y todo de la por lo menos otra fuente de carbono fija son provistos a los microbios al comienzo de la fermentación.
  130. 130
    El método de conformidad con la reivindicación 127, caracterizado porque el glicerol y por lo menos otra fuente fija de carbono son alimentados a los microbios a una velocidad predeterminada en el curso de la fermentación.
  131. 131
    El método de conformidad con la reivindicación 127, caracterizado porque:(a) el glicerol es provisto a los microbios en ausencia de la por lo menos otra fuente fija de carbono por un primer período de tiempo;(b) la por lo menos otra fuente fija de carbono es provista al final del primer período de tiempo y (c) los microbios son cultivados por un segundo período de tiempo en presencia de la por lo menos otra fuente fija de carbono.
  132. 132
    El método de conformidad con la reivindicación 115, caracterizado porque los genes exógenos están en enlace operable sobre un promotor que es inducible en respuesta a un primer estímulo y en donde el método comprende además:proveer el primer estímulo y incubar la población de microbios por un primer período de tiempo en presencia del primer estímulo para producir un alcohol.
  133. 133
    El método de conformidad con la reivindicación 132, caracterizado porque comprende además extraer el alcohol de la biomasa acuosa.
  134. 134
    El método de conformidad con la reivindicación 115, caracterizado porque la tioesterasa codificada por el primer gen exógeno cataliza la escisión de un ácido graso de 8 a 18 átomos de carbono de la ACP y la reductasa codificada por el segundo gen exógeno cataliza la reducción de una acil-CoA grasa de 8 a 18 átomos de carbono a un alcohol primario correspondiente, en donde la tioesterasa y la reductasa actúan sobre la misma longitud de cadena de carbonos.
  135. 135
    El método de conformidad con la reivindicación 134, caracterizado porque la tioesterasa codificada por el primer gen exógeno cataliza la escisión de un ácido graso de 10 a 14 átomos de carbono de la ACP y la reductasa codificada por el segundo gen exógeno cataliza la escisión de una acil-CoA grasa de 10 a 14 átomos de carbono a un alcohol primario correspondiente, en donde la tioesterasa y la reductasa actúan sobre la misma longitud de cadena de carbonos.
  136. 136
    El método de conformidad con la reivindicación 135, caracterizado porque la tioesterasa codificada por el primer gen exógeno cataliza la escisión de un ácido graso de 12 átomos de carbono de la ACP y la reductasa codificada por el segundo gen exógeno cataliza la reducción de una acil-Coa grasa de 12 átomos de carbono a dodecanol.
  137. 137
    El método de conformidad con la reivindicación 115, caracterizado porque los microbios contienen además un tercer gen exógeno que codifica una proteína portadora de acilo.
  138. 138
    El método de conformidad con la reivindicación 137, caracterizado porque el tercer gen exógeno codifica una proteína portadora de acilo que es co-expresada naturalmente con la acil-ACP tioesterasa grasa.
  139. 139
    Un método para producir una molécula de lípido en una población de microbios, el método está caracterizado porque comprende cultivar una población de microbios en un medio de cultivo, en donde los microbios contienen:(i) un primer gen exógeno que codifica una acil-ACP tioesterasa grasa y (¡i) un segundo gen exógeno que codifica una acil-CoA reductasa grasa y en donde los microbios sintetizan un ácido graso enlazado a una proteína portadora de acilo (ACP), la acil-ACP tioesterasa grasa cataliza la escisión del ácido graso de la ACP para producir, por medio de procesamiento adicional, una acil-CoA grasa y la acil-CoA reductasa grasa cataliza la reducción de la acil-CoA a un aldehido.
  140. 140
    El método de conformidad con la reivindicación 139, caracterizado porque el microbio es una microalga.
  141. 141
    El método de conformidad con la reivindicación 139, caracterizado porque el microbio es una levadura oleaginosa.
  142. 142
    El método de conformidad con la reivindicación 139, caracterizado porque la levadura oleaginosa es seleccionada del grupo que consiste de Cryptococcus curvatus, Cryptococcus terricolus, Candida sp., Lipomyces starkeyi, Lipomyces lipofer, Endomycopsis vernalis, fíhodotorula glutinis, Flhodotorula gracilis y Yarrowia lipolytica.
  143. 143
    El método de conformidad con la reivindicación 139, caracterizado porque el microbio es un hongo.
  144. 144
    El método de conformidad con la reivindicación 143, caracterizado porque el hongo es seleccionado del grupo que consiste de una especie del género Mortierella, Mortierella vinacea, Mortierella alpine, Pythium debaryanum, Mucor circinelloides, Aspergillus ochraceus, Aspergillus terreus, Penniliccium iilacinum, una especie del género Hensenulo, una especie del género Chaetomium, una especie del género Cadosporium, una especie del gémero Malbranchea, una especie del género fíhizopus y una especie del género Pythium.
  145. 145
    El método de conformidad con la reivindicación 139, caracterizado porque el microbio es seleccionado del grupo que consiste de los microorganismos enlistados en la tabla 1.
  146. 146
    El método de conformidad con la reivindicación 145, caracterizado porque el microbio es una especie del género Chlorella.
  147. 147
    El método de conformidad con la reivindicación 146, caracterizado porque la especie es seleccionada del grupo que consiste de Chlorella anitrata, Chlorella antárctica, Chlorella aureoviridis. Chlorella candida, Chlorella capsúlala, Chlorella desiccata, Chlorella, ellipsoidea, Chlorella emersonii, Chlorella fusca, Chlorella fusca var. vacuolata, Chlorella glucotropha, Chlorella infusionum, Chlorella infusionum var. Actophila, Chlorella infusorium var. Auxenophila, Chlorella kessleri, Chlorella luteoviridis, Chlorella luteoviridis var. aureoviridis, Chlorella luteoviridis var. Lutescens, Chlorella miniata, Chlorella minutissima, Chlorella mutabilis, Chlorella nocturna, Chlorella parva, Chlorella photophila, Chlorella pringsheimii, Chlorella protothecoides, Chlorella regularis, Chlorella regularis var. mínima, Chlorella regularis var. umbricata, Chlorella reisiglii, Chlorella saccharophila, Chlorella saccharophila var. Ellipsoidea, Chlorella salina, Chlorella simplex, Chlorella sorokiniana, Chlorella sp., Chlorella sphaerica, Chlorella stigmatophora, Chlorella vanniellii, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris var. tertia, Chlorella vulgaris var. airidis, Chlorella vulgaris var. vulgaris, Chlorella vulgaris var. vulgaris f. tertia, Chlorella vulgaris var. vulgaris f. viridis, Chlorella cnthella y Chlorella zofigiensis.
  148. 148
    El método de conformidad con la reivindicación 147, caracterizado porque la especie es Chlorella minutissima, Chlorella emersonii, Chlorella sorokiniana, Chlorella ellipsoidea, Chlorella sp. o Chlorella protothecoides.
  149. 149
    El método de conformidad con la reivindicación 139, caracterizado porque los genes exógenos están en enlace operable con un promotor que es inducible en respuesta a un primer estímulo y en donde el método comprende además:proveer el primer estímulo e incubar la población de microbios por un primer período de tiempo en presencia del primer estímulo para producir un aldehido.
  150. 150
    El método de conformidad con la reivindicación 149, caracterizado porque comprende además extraer el aldehido de biomasa acuosa.
  151. 151
    El método de conformidad con la reivindicación 139, caracterizado porque la tioesterasa codificada por el primer gen exógeno cataliza la escisión de un ácido graso de 8 a 18 átomos de carbono de la ACP y la reductasa codificada por el segundo gen exógeno cataliza la reducción de una acil-Coa grasa a un aldehido correspondiente, en donde la tioesterasa y la reductasa actúan sobre la misma longitud de cadena de carbonos.
  152. 152
    El método de conformidad con la reivindicación 139, caracterizado porque los microbios contienen además n tercer gen exógeno que codifica una aldehido descarbonilasa grasa que cataliza la conversión del aldehido a un alcano.
  153. 153
    El método de conformidad con la reivindicación 152, caracterizado porque los genes exógenos están en enlace operable con un promotor que es inducible en respuesta a un primer estímulo y en donde el método comprende además:proveer el primer estímulo y incubar la población de microbios por un primer período de tiempo en presencia del primer estímulo para producir un alcano.
  154. 154
    El método de conformidad con la reivindicación 153, caracterizado porque comprende además extraer el alcano de biomasa acuosa.
  155. 155
    El método de conformidad con la reivindicación 152, caracterizado porque la tioesterasa codificada por el primer gen exógeno cataliza la escisión de un ácido graso de 8 a 18 átomos de carbono de la ACP, la reductasa codificada por el segundo gen exógeno catalizan la reducción de una acil-CoA grasa de 8 a 18 átomos de carbono a un aldehido correspondiene y la descarbonilasa codificada por el tercer gen exógeno cataliza la conversión de un aldehido de 8 a 18 átomos de carbono a un alcano correspondiente, en donde la tioesterasa, la reductasa y la descarbonilasa actúan sobre la misma longitud de cadena de carbonos.
  156. 156
    El método de conformidad con la reivindicación 139, caracterizado porque los microbios contienen además un tercer gen exógeno que codifica una proteína portadora de acilo.
  157. 157
    El método de conformidad con la reivindicación 156, caracterizado porque el tercer gen exógeno codifica una proteína portadora de acilo que es co-expresada naturalmente con la acil-ACP tioesterasa grasa.
  158. 158
    El método de conformidad con la reivindicación 156, caracterizado porque los microbios contienen además un cuarto gen exógeno que codifica una aldehido descarbonilasa grasa que cataliza la conversión del aldehido a un alcano.
  159. 159
    El método de conformidad con la reivindicación 139, caracterizado porque el medio de cultivo contiene glicerol.
  160. 160
    El método de conformidad con la reivindicación 159, caracterizado porque el glicerol es un producto secundario de un proceso de transesterificación.
  161. 161
    El método de conformidad con la reivindicación 159, caracterizado porque el medio de cultivo contiene glicerol y por lo menos otra fuente fija de carbono.
  162. 162
    El método de conformidad con la reivindicación 161, caracterizado porque la por lo menos otra fuente fija es sacarosa.
  163. 163
    El método de conformidad con la reivindicación 161, caracterizado porque todo de glicerol y toda de la por lo menos otra fuente fija de carbono son provistos a los microbios al comienzo de la fermentación.
  164. 164
    El método de conformidad con la reivindicación 161, caracterizado porque el glicerol y la por lo menos otra de la fuente fija de carbono son alimentados a los microbios a una velocidad predeterminada en el curso de la fermentación.
  165. 165
    El método de conformidad con la reivindicación 161, caracterizado porque:(a) el glicerol es provisto a los microbios en ausencia de por lo menos otra fuente fija de carbono por un primer período de tiempo;(b) la por lo menos otra fuente fija de carbono es provista al final del primer período de tiempo y (c) los microbios son cultivados por un segundo período de tiempo en presencia de la por lo menos otra fuente de carbono fija.
  166. 166
    Un método para producir una molécula de ácido graso que tiene una longitud de cadena de carbonos especificada en una población de microbios, el método está caracterizado porque comprende cultivar una población de microbios que produce lípidos en un medio de cultivo, en donde los microbios contienen un gen exógeno que codifica una acil-ACP bioesterasa grasa que tiene una actividad específica a la longitud de cadena del carbono y en donde los microbios sintetizan un ácido enlazado a una proteína portadora de acilo (ACP) y la tioesterasa cataliza la escisión del ácido graso a partir de la ACP cuando el ácido graso ha sido sintetizado a la longitud de cadena de carbonos específica.
  167. 167
    El método de conformidad con la reivindicación 166, caracterizado porque el microbio es una microalga.
  168. 168
    El método de conformidad con la reivindicación 166, caracterizado porque el microbio es una levadura oleaginosa.
  169. 169
    El método de conformidad con la reivindicación 168, caracterizado porque la levadura oleaginosa es seleccionada del grupo que consiste de Cryptococcus curvatus, Cryptococcus terricolus, Candida sp., Lipomyces starkeyi, Lipomyces lipofer, Endomycopsis vernalis, fíhodotorula glutinis, fíhodotorula gracilis y Yarrowia lipolytica.
  170. 170
    El método de conformidad con la reivindicación 166, caracterizado porque el microbio es un hongo.
  171. 171
    El método de conformidad con la reivindicación 170, caracterizado porque el hongo es seleccionado del grupo que consiste de una especie del género Modierella, Modierella vinacea, Modierella alpine, Pythium debaryanum, Mucor circinelloides, Aspergillus ochraceus, Aspergillus terreus, Penniliccium iilacinum, una especie del género Hensenulo, una especie del género Chaetomium, una especie del género Cadosporium, una especie del gémero Malbranchea, una especie del género fíhizopus y una especie del género Pythium.
  172. 172
    El método de conformidad con la reivindicación 170, caracterizado porque el microbio es seleccionado del grupo que consiste de los microorganismos enlistados en la Tabla 1.
  173. 173
    El método de conformidad con la reivindicación 172, caracterizado porque el microbio es una especie del género Chlorella.
  174. 174
    El método de conformidad con la reivindicación 173, caracterizado porque la especie es seleccionada del grupo que consiste de Chlorella anitrata, Chlorella antárctica, Chlorella aureoviridis, Chlorella candida, Chlorella capsulata, Chlorella desiccata, Chlorella, ellipsoidea, Chlorella emersonii, Chlorella fusca, Chlorella fusca var. vacuolata, Chlorella glucotropha, Chlorella infusionum, Chlorella infusionum var. Actophila, Chlorella infusorium var. Auxenophila, Chlorella kessleri, Chlorella luteoviridis, Chlorella luteoviridis var. aureoviridis, Chlorella luteoviridis var. Lutescens, Chlorella miniata, Chlorella minutissima, Chlorella mutabilis, Chlorella nocturna, Chlorella parva, Chlorella photophila, Chlorella pringsheimii, Chlorella protothecoides, Chlorella regularis, Chlorella regularis var. mínima, Chlorella regularis var. umbricata, Chlorella reisiglii, Chlorella saccharophila, Chlorella saccharophila var. Ellipsoidea, Chlorella salina, Chlorella simplex, Chlorella sorokiniana, Chlorella sp., Chlorella sphaerica, Chlorella stigmatophora, Chlorella vanniellii, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris var. tertia, Chlorella vulgaris var. airidis, Chlorella vulgaris var. vulgaris, Chlorella vulgaris var. vulgaris f. tertia, Chlorella vulgaris var. vulgaris f. viridis, Chlorella cnthella y Chlorella zofigiensis.
  175. 175
    El método de conformidad con la reivindicación 174, caracterizado porque la especie es Chlorella minutissima, Chlorella emersonii, Chlorella sorokiniana, Chlorella ellipsoidea, Chlorella sp. o Chlorella protothecoides.
  176. 176
    El método de conformidad con la reivindicación 166, caracterizado porque el gen exógeno está en enlace operable con un promotor que es inducible en respuesta a un primer estímulo y en donde el método comprende además:proveer el primer estímulo e incubar la población de microbios por un período de tiempo en presencia del primer estímulo.
  177. 177
    El método de conformidad con la reivindicación 176, caracterizado porque comprende además extraer el ácido graso de la biomasa acuosa.
  178. 178
    El método de conformidad con la reivindicación 166, caracterizado porque los microbios contienen además un segundo gen exógeno que codifica una proteína portadora de acilo.
  179. 179
    El método de conformidad con la reivindicación 178, caracterizado porque el segundo gen exógeno codifica una proteína portadora de acilo que es co-expresada naturalmente con la acil-ACP tioesterasa grasa.
  180. 180
    El método de conformidad con la reivindicación 166, caracterizado porque la acil-ACP tioesterasa cataliza la escisión de un ácido graso de 8 a 18 átomos de carbono de la ACP.
  181. 181
    El método de conformidad con la reivindicación 166, caracterizado porque el medio de cultivo contiene glicerol.
  182. 182
    El método de conformidad con la reivindicación 181, caracterizado porque el glicerol es un producto secundario es un proceso de transesterificación.
  183. 183
    El método de conformidad con la reivindicación 181, caracterizado porque el medio de cultivo contiene glicerol y por lo menos otra fuente fija de carbono.
  184. 184
    El método de conformidad con la reivindicación 183, caracterizado porque la por lo menos otra fuente de carbono es sacarosa.
  185. 185
    El método de conformidad con la reivindicación 183, caracterizado porque todo del glicerol y todo de la por lo menos otra fuente fija de carbono son provistos a los microbios al comienzo de la fermentación.
  186. 186
    El método de conformidad con la reivindicación 173, caracterizado porque el glicerol y la por lo menos otra fuente fija de carbono son alimentados a los microbios a una velocidad predeterminada en el curso de la fermentación.
  187. 187
    El método de conformidad con la reivindicación 183, caracterizado porque:(a) el glicerol es provisto a los microbios en ausencia de la por lo menos otra fuente fija de carbono por un primer período de tiempo;(b) la por lo menos otra fuente fija de carbono es provista al final del primer período de tiempo y (c) los microbios son cultivados por un segundo período de tiempo en presencia de la por lo menos otra fuente fija de carbono.
  188. 188
    Una célula de microalga que contiene un gen exógeno, caracterizada porque el gen exógeno codifica una proteína seleccionada del grupo que consiste de una lipasa, un transportador de sacarosa, una invertasa de sacarosa, una fructocinasa o una enzima polisacárido no degradante.
  189. 189
    La célula de microalga de conformidad con la reivindicación 188, caracterizada porque la célula es seleccionada de los microorganismos de la Tabla 1.
  190. 190
    La célula de microalga de conformidad con la reivindicación 189, caracterizada porque la célula es una especie del género Chlorella.
  191. 191
    La célula de microalga de conformidad con la reivindicación 190, caracterizada porque la especie es seleccionada del grupo que consiste de Chlorella anitrata, Chlorella antárctica, Chlorella aureoviridis, Chlorella candida, Chlorella capsulata, Chlorella desiccata, Chlorella, ellipsoidea, Chlorella emersonii, Chlorella fusca, Chlorella fusca var. vacuolata, Chlorella glucotropha, Chlorella infusionum, Chlorella infusionum var. Actophila, Chlorella infusorium var. Auxenophila, Chlorella kessleri, Chlorella luteoviridis, Chlorella luteoviridis var. aureoviridis, Chlorella luteoviridis var. Lutescens, Chlorella miniata, Chlorella minutissima, Chlorella mutabilis, Chlorella nocturna, Chlorella parva, Chlorella photophila, Chlorella pringsheimii, Chlorella protothecoides, Chlorella regularis, Chlorella regularis var. mínima, Chlorella regularis var. umbricata, Chlorella reisiglii, Chlorella saccharophila, Chlorella saccharophila var. Ellipsoidea, Chlorella salina, Chlorella simplex, Chlorella sorokiniana, Chlorella sp., Chlorella sphaeríca, Chlorella stigmatophora, Chlorella vanniellii, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris var. tertia, Chlorella vulgaris var. airidis, Chlorella vulgaris var. vulgarís, Chlorella vulgaris var. vulgaris f. tedia, Chlorella vulgaris var. vulgaris f. viridis, Chlorella cnthella y Chlorella zofigiensis.
  192. 192
    La célula de microalga de conformidad con la reivindicación 191, caracterizada porque la célula es Chlorella minutissima, Chlorella emersonii, Chlorella sorokiniana, Chlorella ellipsoidea, Chlorella sp. o Chlorella protothecoides.
  193. 193
    La célula de microalga de conformidad con la reivindicación 188, caracterizada porque el gen exógeno está en enlace operable con un promotor.
  194. 194
    La célula de microalga de conformidad con la reivindicación 193, caracterizada porque el promotor es inducible o represible en respuesta aun estímulo.
  195. 195
    La célula de microalga de conformidad con la reivindicación 194, caracterizada porque el estímulo es seleccionado del grupo que consiste de una molécula pequeña provista exógenamente, calor, frío y luz.
  196. 196
    La célula de microalga de conformidad con la reivindicación 188, caracterizada porque el gen exógeno es expresado en un compartimiento celular.
  197. 197
    La célula de microalga de conformidad con la reivindicación 196, caracterizada porque el compartimiento celular es seleccionado del grupo que consiste de un cloroplasto y una mitocondria.
  198. 198
    La célula de microalga de conformidad con la reivindicación 188, caracterizada porque el gen codifica una lipasa que tiene por lo menos 70% de identidad de aminoácidos con una lipasa seleccioanda de la Tabla 9.
  199. 199
    La célula de microalga de conformidad con la reivindicación 198, caracterizada porque la lipasa es novozym-435.
  200. 200
    La célula de microalga de conformidad con la reivindicación 188, caracterizada porque el gen codifica una enzima polisacáñdo-degradante.
  201. 201
    La célula de microalga de conformidad con la reivindicación 200, caracterizada porque la enzima polisacárido-degradante es endógena a un virus de Chlorella.
  202. 202
    Una célula de microalga que contiene dos genes exógenos, caracterizada porque un primer gen exógeno codifica una lipasa y un segundo gen exógeno codifica una enzima polisacárido-degradante.
  203. 203
    La célula de microalga de conformidad con la reivindicación 202, caracterizada porque los genes exógenos están cada uno en enlace operable con un promotor.
  204. 204
    La célula de microalga de conformidad con la reivindicación 203, caracterizada porque los genes exógenos están cada uno en enlace operable con promotores que son inducibles en respuesta a un estímulo.
  205. 205
    La célula de microalga de conformidad con la reivindicación 204, caracterizada porque los genes exógenos están cada uno en enlace operable con promotores que son inducibles en respuesta al mismo estímulo.
  206. 206
    La célula de microalga de conformidad con la reivindicación 204, caracterizada porque los genes exógenos están cada uno en enlace operable con un promotor que es inducible en respuesta por lo menos un estímulo que no induce el otro promotor.
  207. 207
    Un método para la manufactura de una molécula de lípido en un microbio, el método está caracterizado porque comprende:(a) cultivar el microbio por un primer período de tiempo suficiente para incrementar la densidad celular, en donde el microbio contiene: (i) un gen exógeno que codifica una lipasa y/o (¡i) un gen exógeno que codifica una enzima polisacárido-degradante;en donde los genes exógenos están en enlace operable con un promotor que es inducible en respuesta a un estímulo;(b) proveer el estímulo y (c) incubar el microbio por un segundo período de tiempo en presencia del estímulo.
  208. 208
    Un método para la manufactura de una molécula de lípido en un microbio, el método está caracterizado porque comprende:(a) cultivar un microbio que produce lípidos durante un primer período de tiempo suficiente para incrementar la densidad celular;(b) proveer un virus capaz de infectar y someter a lisis el microbio cuando está en cotnacto directo con el microbio y (c) incubar el microbio por un segundo período de tiempo para producir biomasa acuosa sometida a lisis.
  209. 209
    El método de conformidad con la reivindicación 208, caracterizado porque comprende además la etapa de extraer moléculas de lípido de la biomasa acuosa sometida a lisis.
  210. 210
    Una célula de microalga que contiene un gen exógeno, caracterizada porque el gen exógeno codifica un co-factor para una enzima de ruta de lípido o codifica una proteína que participa en la síntesis del co-factor.
  211. 211
    Un método para cultivar un microbio que produce lípidos, el método está caracterizado porque comprende cultivar el microbio en presencia de una cantidad suficiente de uno o más co-factores para un enzima de ruta de lípido para incrementar el rendimiento de lípido microbiano con respecto al rendimiento de lípido microbiano en ausencia del uno o más cofactores.
  212. 212
    El método de conformidad con la reivindicación 211, caracterizado porque el uno o más co factores consisten de una vitamina requerida por una o más enzimas de ruta de lípido.
  213. 213
    El método de conformidad con la reivindicación 211, caracterizado porque el uno o más cofactores es biotina.
  214. 214
    El método de conformidad con la reivindicación 211, caracterizado porque el uno o más cofactores es/son provistos al incluir en el cultivo un microbio que ha sido diseñado genéticamente para producir el uno o más co-factores.
  215. 215
    Un método para la fermentación de un microorganismo caracterizado porque comprende proveer una mezcla que comprende glucosa y xilosa como fuente de energía al microorganismo.
  216. 216
    El método de conformidad con la reivindicación 215, caracterizado porque la mezcla comprende además lignina.
  217. 217
    El método de conformidad con la reivindicación 215, caracterizado porque la mezcla comprende además por lo menos una especie de furfural.
  218. 218
    El método de conformidad con la reivindicación 215, caracterizado porque la mezcla es material celulósico despolimerizado.
  219. 219
    El método de conformidad con la reivindicación 215, caracterizado porque el microorganismo es un microalga.
  220. 220
    El método de conformidad con la reivindicación 219, caracterizado porque la microalga es seleccionada de la Tabla 1.
  221. 221
    El método de conformidad con la reivindicación 220, caracterizado porque la microalga es una especie del género Chlorella.
  222. 222
    El método de conformidad con la reivindicación 221, caracterizado porque la microalga es seleccionada del grupo que consiste de Chlorella anitrata, Chlorella antárctica, Chlorella aureoviridis, Chlorella Candida, Chlorella capsúlala, Chlorella desiccata, Chlorella ellipsoidea, Chlorella emersonii, Chlorella fusca, Chlorella fusca var. vacuolata, Chlorella glucotropha, Chlorella infusionum, Chlorella infusionum var. Actophila, Chlorella infusionum var. Auxenophila, Chlorella kessleri, Chlorella luteoviridis, Chlorella luteoviridis var. aureoviridis, Chlorella luteoviridis var. Lutescens, Chlorella miniata, Chlorella minutissima, Chlorella mutabilis, Chlorella nocturna, Chlorella parva, Chlorella photophila, Chlorella pringsheimii, Chlorella protothecoides, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella regularis, Chlorella regularis var. mínima, Chlorella regularis var. Umbricata, Chlorella reisiglii, Chlorella saccharophila, Chlorella saccharophila var. Ellipsoidea, Chlorella salina, Chlorella simplex, Chlorella sorokiniana, Chlorella sp., Chlorella sphaerica, Chlorella stigmatophora, Chlorella vanniellii, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris f. tedia, Chlorella vulgaris var. airidis, Chlorella vulgaris var. vulgaris, Chlorella vulgaris var. Vulgaris f. tedia, Chlorella vulgaris var. Vulgaris f. viridis, Chlorella xanthella y Chlorella zofingiensis.
  223. 223
    El método de conformidad con la reivindicación 220, caracterizado porque la microalga es seleccionada del grupo que consiste de Bracteococcus minor, Chlorella ellipsoidea. Chlorella kesslerí, Chlorella luteoviridis, Bracteococcus medionucleatus, Chlorella minutissima, Chlorella ovalis, Chlorella protothecoides, Chlorella saccharophila, Chlorella sorokiniana, Chlorella sp., Chlorella vulgaris, ParaChlorella kesslerí, Prototheca moriformis y Pseudochlorella aquatica.
  224. 224
    El método de conformidad con la reivindicación 215, caracterizado porque el microorganismo es una levadura oleaginosa.
  225. 225
    El método de conformidad con la reivindicación 224, caracterizado porque la levadura oleaginosa es seleccionada del grupo que consiste de Cryptococcus curvatus, Cryptococcus terricolus, Candida sp., Lipomyces starkeyi, Lipomyces lipofer, Endomycopsis vernalis, fíhodotorula glutinis, fíhodotorula gracilis y Yarrowia lipolytica.
  226. 226
    El método de conformidad con la reivindicación 215, caracterizado porque el microorganismo es un hongo.
  227. 227
    El método de conformidad con la reivindicación 226, caracterizado porque el hongo es seleccionado del grupo que consiste de una especie del género Mortierella, Mortierrla vinacea, Mortierella alpine, Pythium debaryanum, Mucor circinelloides, Aspergillus ochraceus, Aspergillus terreus, Pennicillium iilacinum, una especie del género Hensenulo, una especie del género Chaetomium, una especie del género Cladosporium, una especie del género Malbranchea, una especie del género fíhizopus y una especie del género Pythium.
  228. 228
    El método de conformidad con la reivindicación 215, caracterizado porque la mezcla comprende además por lo menos una enzima de utilización de sacarosa.
  229. 229
    El método de conformidad con la reivindicación 228, caracterizado porque el microorganismo es del género Chlorella.
  230. 230
    El método de conformidad con la reivindicación 215, caracterizado porque el microorganismo ha sido diseñado genéticamente para expresar un gen exógeno que codifica por lo menos una enzima de modificación de lípido, enzima de modificación de hidrocarburo o enzima de utilización de sacarosa.
  231. 231
    El método de conformidad con la reivindicación 228, caracterizado porque la mezcla comprende una invertasa de sacarosa.
  232. 232
    Un método para cultivar una microalga, caracterizado porque comprende cultivar la microalga en un medio de cultivo que incluye una materia prima de alimentación que comprende por lo menos un sustrato de carbono seleccionado del grupo que consiste de un material celulósico, un azúcar de 5 átomos de carbono, un azúcar de 6 átomos de carbono y acetato.
  233. 233
    El método de conformidad con la reivindicación 232, caracterizado porque el sustrato de carbono es glucosa y la microalga es de un género seleccionado del grupo que consiste de Chlorella, Parachlorella, Pseudochlorella, Bracteococcus, Prototheca y Scenedesmus.
  234. 234
    El método de conformidad con la reivindicación 232, caracterizado porque el sustrato de carbono es xilosa y la microalga es de un género seleccionado del grupo que consiste de Chlorella, Pseudochlorella y Prototheca.
  235. 235
    El método de conformidad con la reivindicación 232, caracterizado porque el sustrato de carbono es sacarosa y la microalga es de un género seleccionado del grupo que consiste de Chlorella y Bracteococcus.
  236. 236
    El método de conformidad con la reivindicación 232, caracterizado porque el sustrato de carbono es fructosa y la microalga es de un género seleccionado del grupo que consiste de Chlorella, Parachlorella, Prototheca y Scenedesmus.
  237. 237
    El método de conformidad con la reivindicación 232, caracterizado porque el sustrato de carbono es arabinosa y la microalga es Chlorella sp.
  238. 238
    El método de conformidad con la reivindicación 232, caracterizado porque el sustrato de carbono es mañosa y la microalga es de un género seleccionado del grupo que consiste de Chlorella, Parachlorella, Bracteococcus, Prototheca y Scenedesmus.
  239. 239
    El método de conformidad con la reivindicación 232, caracterizado porque el sustrato de carbono es galactosa y la microalga es de un género seleccionado del grupo que consiste de Bracteococcus, Parachlorella, Chlorella, Pseudochlorella, Bracteococcus y Prototheca.
  240. 240
    El método de conformidad con la reivindicación 232, caracterizado porque el sustrato de carbono es acetato y la microalga es de un género seleccionado del grupo que consiste de Chlorella, Parachlorella y Prototheca.
  241. 241
    El método de conformidad con la reivindicación 232, caracterizado porque el medio de cultivo incluye además por lo menos una enzima de utilización de sacarosa.
  242. 242
    El método de conformidad con la reivindicación 241, caracterizado porque la microalga es del género Chlorella.
  243. 243
    El método de conformidad con la reivindicación 242, caracterizado porque la microalga ha sido diseñada genéticamente para expresar un gen exógeno que codifica por lo menos una enzima de modificación de lípido, enzima de modificación de hidrocarburo o enzima de utilización de sacarosa.
  244. 244
    El método de conformidad con la reivindicación 241, caracterizado porque el medio de cultivo incluye una invertasa de sacarosa.
  245. 245
    El método de conformidad con la reivindicación 232, caracterizado porque la microalga es seleccionada de la Tabla 1.
  246. 246
    Un método para cultivar microalgas caracterizado porque comprende colocar una pluralidad de células de microalgas en presencia de material celulósico despolimerizado.
  247. 247
    El método de conformidad con la reivindicación 246, caracterizado porque las microalgas son cultivadas en presencia de una fuente de carbono fija adicional seleccionada del grupo que consiste de glicerol, sacarosa, glucosa, arabinosa, galactosa, xilosa, fructosa, arabinosa, mañosa, acetato y cualquier combinación de los anteriores.
  248. 248
    El método de conformidad con la reivindicación 246, caracterizado porque la microalga es seleccionada de una especie del género Bracteococcus, una especie del género Chlorella, una especie del género Parachlorella, una especie del género Prototheca o una especie del género Pseudochlorella.
  249. 249
    El método de conformidad con la reivindicación 248, caracterizado porque la microalga es seleccionada de Bracteococcus minor, Chlorella ellipsoidea, Chlorella kessleri, Chlorella luteoviridis, Bracteococcus medionucleatus, Chlorella minutissima, Chlorella ovalis, Chlorella protothecoides, Chlorella saccharophila, Chlorella sorokiniana, Chlorella sp., Chlorella vulgaris, Parachlorella kessleri, Prototheca moriformis y Pseudochlorella aquatica.
  250. 250
    El método de conformidad con la reivindicación 246, caracterizado porque las microalgas son cultivadas en presencia de por lo menos una enzima de utilización de sacarosa.
  251. 251
    El método de conformidad con la reivindicación 250, caracterizado porque la microalga es del género Chlorella.
  252. 252
    El método de conformidad con la reivindicación 246, caracterizado porque la microalga ha sido diseñada genéticamente para expresar un gen exógeno que codifica por lo menos una enzima de modificación de lípido, enzima de modificación de hidrocarburo o enzima de utilización de sacarosa.
  253. 253
    El método de conformidad con la reivindicación 250, caracterizado porque la por lo menos una enzima de utilización de sacarosa es una invertasa de sacarosa.
  254. 254
    El método de conformidad con la reivindicación 252, caracterizado porque la por lo menos una enzima de modificación de lípido es seleccionada de una estearoil-ACP desaturasa, una glicerolípido desaturasa, una piruvato deshidrogenase, una acetil-CoA carboxilasa y una glicerol-3 fosfato aciltransferasa.
  255. 255
    El método de conformidad con la reivindicación 252, caracterizado porque la por lo menos una enzima de modificación de hidrocarburo es seleccionada de una acil-ACP tioesterasa grasa, una acil-CoA reductasa grasa, una aldehido reductasa grasa, una acil-CoA/aldehído reductasa grasa, una aldehido decarboxilasa grasa y una proteína portadora de acilo.
  256. 256
    Un método para cultivar un microbio que produce lípidos, el método está caracterizado porque comprende cultivar el microbio en presencia de ácido acético y en ausencia de una fuente de nitrógeno fija.
  257. 257
    El método de conformidad con la reivindicación 256, caracterizado porque el microbio es cultivado en presencia de una cantidad suficiente de ácido acético para incrementar el rendimiento de lípido microbiano con respecto al rendimiento de lípido microbiano en ausencia de ácido acético, en donde las condiciones de cultivo son de otra manera las mismas entre los dos cultivos.
  258. 258
    Un cultivo microbiano caracterizado porque contiene:(a) una población de microorganismos;y (b) un medio de cultivo que comprende glucosa, xilosa y una molécula seleccionada del grupo que consiste de lignina y una especie de furfural.
  259. 259
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 258, caracterizado porque los microorganismos son microalgas.
  260. 260
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 259, caracterizado porque los microorganismos son seleccionados del grupo que consiste de las microalgas enlistadas en la Tabla 1.
  261. 261
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 260, caracterizado porque los microorganismos son una especie del género Chlorella.
  262. 262
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 261, caracterizado porque los microorganismos son seleccionados del grupo que consiste de Chlorella anitrata, Chlorella antárctica, Chlorella aureoviridis, Chlorella Candida, Chlorella capsulata, Chlorella desiccata, Chlorella ellipsoidea, Chlorella emersonii, Chlorella fusca, Chlorella fusca var. vacuolata, Chlorella glucotropha, Chlorella infusionum, Chlorella infusionum var. Actophila, Chlorella infusionum var. Auxenophila, Chlorella kessleri, Chlorella luteoviridis, Chlorella luteoviridis var. aureoviridis, Chlorella luteoviridis var. Lutescens, Chlorella miniata, Chlorella minutissima, Chlorella mutabilis, Chlorella nocturna, Chlorella parva, Chlorella photophila, Chlorella pringsheimii, Chlorella protothecoides, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella regularis, Chlorella regularis var. mínima, Chlorella regularis var. Umbricata, Chlorella reisiglii, Chlorella saccharophila, Chlorella saccharophila var. Ellipsoidea, Chlorella salina, Chlorella simplex, Chlorella sorokiniana, Chlorella sp., Chlorella sphaerica, Chlorella stigmatophora, Chlorella vanniellii, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris f. tertia, Chlorella vulgaris var. airidis, Chlorella vulgaris var. vulgaris, Chlorella vulgaris var. Vulgaris f. tertia, Chlorella vulgaris var. Vulgaris f. viridis, Chlorella xanthella y Chlorella zofingiensis.
  263. 263
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 258, caracterizado porque los microorganismos son seleccionados de Bracteococcus minor, Chlorella ellipsoidea, Chlorella kessleri, Chlorella luteoviridis, Bracteococcus medionucleatus, Chlorella minutissima, Chlorella ovalis, Chlorella protothecoides, Chlorella saccharophila, Chlorella sorokiniana, Chlorella sp., Chlorella vulgaris, Parachlorella kessleri, Prototheca moriformis y Pseudochlorella aquatica.
  264. 264
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 258, caracterizado porque los microorganismos son levadura oleaginosa.
  265. 265
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 264, caracterizado porque la levadura oleaginosa son seleccionadas del grupo que consiste de Cryptococcus curvatus, Cryptococcus terricolus, Candida sp., Lipomyces starkeyi, Lipomyces lipofer, Endomycopsis vernalis, Rhodotorula glutinis, Rhodotorula gracilis y Yarrowia lipolytica.
  266. 266
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 258, caracterizado porque los microorganismos son hongos.
  267. 267
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 266, caracterizado porque los hongos son seleccionados del grupo que consiste de una especie del género Mortierella, Mortierrla vinacea, Mortierella alpine, Pythium debaryanum, Mucor circinelloides, Aspergillus ochraceus, Aspergillus terreus, Pennicillium iilacinum, una especie del género Hensenulo, una especie del género Chaetomium, una especie del género Cladosporium, una especie del género Malbranchea, una especie del género Rhizopusy una especie del género Pythium.
  268. 268
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 258, caracterizado porque los microorganismos contienen por lo menos un gen de utilización de sacarosa exógeno.
  269. 269
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 268, caracterizado porque el gen de utilización de sacarosa codifica un transportador de sacarosa, una invertasa de sacarosa, una hexocinasa, una glucocinasa o una fructocinasa.
  270. 270
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 258, caracterizado porque los microorganismos contienen por lo menos un gen exógeno que codifica un enzima de ruta de lípido.
  271. 271
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 270, caracterizado porque la enzima de ruta de lípido es seleccionado del grupo que consiste de una estearoil-ACP desaturasa, una glicerolípido desaturasa, una piruvato deshidrogenasa, una acetil-CoA carboxilasa, una proteína portadora de acilo y una glicerol-3 fosfato aciltransferasa.
  272. 272
    Un método para la manufactura de biodiesel, el método está caracterizado porque comprende:(a) cultivar un microorganismo que produce lípidos en un primer cultivo microbiano;(b) recuperar el lípido de la biomasa producida por el primer cultivo microbiano;(c) someter el lípido a transesterificación para producir ésteres de ácido graso y glicerol;y (d) agregar el glicerol a un segundo cultivo microbiano.
  273. 273
    El método de conformidad con la reivindicación 272, caracterizado porque los primeros y segundos cultivos microbianos son cultivos de la misma especie de microorganismo.
  274. 274
    El método de conformidad con la reivindicación 272, caracterizado porque el microorganismo es una microalga.
  275. 275
    El método de conformidad con la reivindicación 274, caracterizado porque el microorganismo es seleccionado del grupo que consiste de las microalgas enlistadas en la Tabla 1.
  276. 276
    El método de conformidad con la reivindicación 275, caracterizado porque el microorganismo es una especie del género Chlorella.
  277. 277
    El método de conformidad con la reivindicación 276, caracterizado porque el microorganismo es seleccionado del grupo que consiste de Chlorella anitrata, Chlorella antárctica, Chlorella aureoviridis, Chlorella Candida, Chlorella capsulata, Chlorella desiccata, Chlorella ellipsoidea, Chlorella emersonii, Chlorella fusca, Chlorella fusca var. vacuolata, Chlorella glucotropha, Chlorella infusionum, Chlorella infusionum var. Actophila, Chlorella infusionum var. Auxenophila, Chlorella kessleri, Chlorella luteoviridis, Chlorella luteoviridis var. aureoviridis, Chlorella luteoviridis var. Lutescens, Chlorella miniata, Chlorella minutissima, Chlorella mutabilis, Chlorella nocturna, Chlorella parva, Chlorella photophila, Chlorella pringsheimii, Chlorella protothecoides, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella regularis, Chlorella regularis var. mínima, Chlorella regularis var. Umbricata, Chlorella reisiglii, Chlorella saccharophila, Chlorella saccharophila var. Ellipsoidea, Chlorella salina, Chlorella simplex, Chlorella sorokiniana, Chlorella sp., Chlorella sphaerica, Chlorella stigmatophora, Chlorella vanniellii, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris f. tertia, Chlorella vulgaris var. airidis, Chlorella vulgaris var. vulgaris, Chlorella vulgaris var. vulgaris f. tertia, Chlorella vulgaris var. vulgaris f. viridis, Chlorella xanthella y Chlorella zofingiensis.
  278. 278
    El método de conformidad con la reivindicación 272, caracterizado porque el segundo cultivo microbiano comprende microorganismos seleccionados del grupo que consiste de Parachlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Bracteococcus medionucleatus, Prototheca moriformis, Chlorella minutissima, Chlorella sp. y Chlorella sorokiniana.
  279. 279
    El método de conformidad con la reivindicación 272, caracterizado porque el microorganismo es una levadura oleaginosa.
  280. 280
    El método de conformidad con la reivindicación 279, caracterizado porque la levadura oleaginosa es seleccionada del grupo que consiste de Cryptococcus curvatus, Cryptococcus terricolus, Candida sp., Lipomyces starkeyi, Lipomyces lipofer, Endomycopsis vernalis, fíhodotorula glutinis, fíhodotorula gracilis y Yarrowia lipolytica.
  281. 281
    El método de conformidad con la reivindicación 272, caracterizado porque el microorganismo es un hongo.
  282. 282
    El método de conformidad con la reivindicación 281, caracterizado porque el hongo es seleccionado del grupo que consiste de una especie del género Mortierella, Mortierrla vinacea, Mortierella alpine, Pythium debaryanum, Mucor circinelloides, Aspergillus ochraceus, Aspergillus terreus, Pennicillium iilacinum, una especie del género Hensenulo, una especie del género Chaetomium, una especie del género Cladosporium, una especie del género Malbranchea, una especie del género fíhizopus y una especie del género Pythium.
  283. 283
    El método de conformidad con la reivindicación 272, caracterizado porque el microorganismo contiene por lo menos un gen de utilización de sacarosa exógeno.
  284. 284
    El método de conformidad con la reivindicación 283, caracterizado porque el gen de utilización de sacarosa codifica un transportador de sacarosa, una invertasa de sacarosa, una hexocinasa, una glucocinasa o una fructocinasa.
  285. 285
    El método de conformidad con la reivindicación 272, caracterizado porque el microorganismo contiene por lo menos un gen exógeno que codifica una enzima de ruta de lípido.
  286. 286
    El método de conformidad con la reivindicación 285, caracterizado porque la enzima de ruta de lípido es seleccionado del grupo que consiste de una estearoil-ACP desaturasa, una glicerolípido desaturasa, una piruvato deshidrogenase, una acetil-CoA carboxilasa, una proteína portadora de acilo y una glicerol-3 fosfato aciltransferasa.
  287. 287
    Un método de fermentación caracterizado porque comprende cultivar un microorganismo en presencia de glicerol y por lo menos otra fuente de carbono fija.
  288. 288
    El método de conformidad con la reivindicación 287, caracterizado porque el glicerol y la por lo menos otra fuente de carbono fija son provistos al microorganismo simultáneamente a una proporción predeterminada.
  289. 289
    El método de conformidad con la reivindicación 288, caracterizado porque todo el glicerol y la por lo menos otra fuente de carbono fija son provistos al microorganismo al comienzo de la fermentación.
  290. 290
    El método de conformidad con la reivindicación 288, caracterizado porque todo del glicerol y la por lo menos otra fuente de carbono fija son alimentados al microorganismo a una velocidad predeterminada durante el curso de la fermentación.
  291. 291
    El método de conformidad con la reivindicación 287, caracterizado porque (a) el glicerol es provisto al microorganismo en ausencia de la por lo menos otra fuente de carbono fija por un primer período de tiempo;(b) la por lo menos otra fuente de carbono fija es provista al final del primer período de tiempo;y (c) el microorganismo es cultivado por un segundo período de tiempo en presencia de la por lo menos otra fuente de carbono fija.
  292. 292
    El método de conformidad con la reivindicación 291, caracterizado porque la por lo menos otra fuente de carbono fija es alimentada al microorganismo a una velocidad predeterminada durante el segundo período de tiempo.
  293. 293
    El método de conformidad con la reivindicación 291, caracterizado porque todo de la por lo menos otra fuente de carbono fija es provista al microorganismo al final del primer período de tiempo.
  294. 294
    El método de conformidad con la reivindicación 287, caracterizado porque:(a) la por lo menos otra fuente de carbono fija es provista al microorganismo en ausencia de glicerol por un primer período de tiempo;(b) el glicerol es provisto al final del primer período de tiempo;y (c) el microorganismo es cultivado por un segundo período de tiempo en presencia de glicerol.
  295. 295
    El método de conformidad con la reivindicación 287, caracterizado porque el microorganismo es una microalga.
  296. 296
    El método de conformidad con la reivindicación 295, caracterizado porque la microalga es seleccionada de la Tabla 1.
  297. 297
    El método de conformidad con la reivindicación 295, caracterizado porque la microalga es del género Chlorella.
  298. 298
    El método de conformidad con la reivindicación 297, caracterizado porque la microalga es seleccionada del grupo que consiste de Chlorella anitrata, Chlorella antárctica, Chlorella aureoviridis, Chlorella Candida, Chlorella capsulata, Chlorella desiccata, Chlorella ellipsoidea, Chlorella emersonii, Chlorella fusca, Chlorella fusca var. vacuolata, Chlorella glucotropha, Chlorella infusionum, Chlorella infusionum var. Actophila, Chlorella infusionum var. Auxenophila, Chlorella kessleri, Chlorella luteoviridis, Chlorella luteoviridis var. aureoviridis, Chlorella luteoviridis var. Lutescens, Chlorella miniata, Chlorella minutissima, Chlorella mutabilis, Chlorella nocturna, Chlorella parva, Chlorella photophila, Chlorella pringsheimii, Chlorella protothecoides, Chlorella regularis, Chlorella regularis var. mínima, Chlorella regularis var. Umbricata, Chlorella reisiglii, Chlorella saccharophila, Chlorella saccharophila var. Ellipsoidea, Chlorella salina, Chlorella simplex, Chlorella sorokiniana, Chlorella sp., Chlorella sphaerica, Chlorella stigmatophora, Chlorella vanniellii, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris f. tertia, Chlorella vulgaris var. airidis, Chlorella vulgaris var. vulgaris, Chlorella vulgaris var. vulgaris f. tertia, Chlorella vulgaris var. vulgaris f. viridis, Chlorella xanthella y Chlorella zofingiensis.
  299. 299
    El método de conformidad con la reivindicación 287, caracterizado porque el microorganismo es una levadura oleaginosa.
  300. 300
    El método de conformidad con la reivindicación 299, caracterizado porque la levadura oleaginosa es seleccionada del grupo que consiste de Cryptococcus curvatus, Cryptococcus terricolus, Candida sp., Lipomyces starkeyi, Lipomyces lipofer, Endomycopsis vernalis, Rhodotorula glutinis, Rhodotorula gracilis y Yarrowia lipolytica.
  301. 301
    El método de conformidad con la reivindicación 287, caracterizado porque el microorganismo es un hongo.
  302. 302
    El método de conformidad con la reivindicación 301, caracterizado porque el hongo es seleccionado del grupo que consiste de una especie del género Modierella, Modierrla vinacea, Modierella alpine, Pythium debaryanum, Mucor circinelloides, Aspergillus ochraceus, Aspergillus terreus, Pennicillium iilacinum, una especie del género Hensenulo, una especie del género Chaetomium, una especie del género Cladosporium, una especie del género Malbranchea, una especie del género fíhizopus y una especie del género Pythium.
  303. 303
    El método de conformidad con la reivindicación 287, caracterizado porque el microorganismo contiene por lo menos un gen de utilización de sacarosa exógeno.
  304. 304
    El método de conformidad con la reivindicación 303, caracterizado porque el gen de utilización de sacarosa codifica un transportador de sacarosa, una invertasa de sacarosa, una hexocinasa, unaglucocinasa, o una fructocinasa.
  305. 305
    El método de conformidad con la reivindicación 287, caracterizado porque el microorganismo contiene por lo menos un gen exógeno que codifica una enzima de ruta de lípido.
  306. 306
    El método de conformidad con la reivindicación 305, caracterizado porque la enzima de ruta de lípido es seleccionada del grupo que consiste de una estearoil-ACP desaturasa, una glicerolípido desaturasa, una piruvato deshidrogenase, una acetil-CoA carboxilasa, una proteína portadora de acilo, y una glicerol-3 fosfato aciltransferasa.
  307. 307
    El método de conformidad con la reivindicación 287, caracterizado porque el glicerol es un producto secundario de un proceso de transesterificación.
  308. 308
    El método de conformidad con la reivindicación 307, caracterizado porque el glicerol es acidulado.
  309. 309
    El método de conformidad con la reivindicación 307, caracterizado porque el glicerol es no acidulado.
  310. 310
    El método de conformidad con la reivindicación 287, caracterizado porque la por lo menos otra fuente de carbono fija es glucosa.
  311. 311
    El método de conformidad con la reivindicación 287, caracterizado porque la por lo menos otra fuente de carbono fija es material celulósico despolimerizado.
  312. 312
    El método de conformidad con la reivindicación 287, caracterizado porque la por lo menos otra fuente de carbono fija es sacarosa.
  313. 313
    Un termentador caracterizado porque comprende:(a) una población de microorganismos;(b) glicerol y (c) por lo menos un azúcar seleccionado del grupo que consiste de xilosa, glucosa y sacarosa.
  314. 314
    El termentador de conformidad con la reivindicación 313, caracterizado porque el glicerol es un producto secundario de un proceso de transesterificación de lípido.
  315. 315
    El termentador de conformidad con la reivindicación 313, caracterizado porquelos microorganismos son microalgas.
  316. 316
    El termentador de conformidad con la reivindicación 315, caracterizado porquelos microorganismos son seleccionados del grupo que consiste de las microalgas enlistados en la Tabla 1.
  317. 317
    El termentador de conformidad con la reivindicación 316, caracterizado porquelos microorganismos son una especie del género Chlorella.
  318. 318
    El termentador de conformidad con la reivindicación 317, caracterizado porquelos microorganismos son seleccionados del grupo que consiste de Chlorella anitrata, Chlorella antárctica, Chlorella aureoviridis, Chlorella Candida, Chlorella capsulata, Chlorella desiccata, Chlorella ellipsoidea, Chlorella emersonii, Chlorella fusca, Chlorella fusca var. vacuolata, Chlorella glucotropha, Chlorella infusionum, Chlorella infusionum var. Actophila, Chlorella infusionum var. Auxenophila, Chlorella kesslerí, Chlorella luteovirídis, Chlorella luteovirídis var. aureoviridis, Chlorella luteovirídis var. Lutescens, Chlorella miniata, Chlorella minutissima, Chlorella mutabilis, Chlorella nocturna, Chlorella parva, Chlorella photophila, Chlorella pringsheimii, Chlorella protothecoides, Chlorella regularis, Chlorella regularis var. mínima, Chlorella regularis var. umbricata, Chlorella reisiglii, Chlorella saccharophila, Chlorella saccharophila var. ellipsoidea, Chlorella salina, Chlorella simplex, Chlorella sorokiniana, Chlorella sp., Chlorella sphaerica, Chlorella stigmatophora, Chlorella vanniellii, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris/, tertia, Chlorella vulgaris var. airidis, Chlorella vulgaris var. vulgaris, Chlorella vulgaris var. vulgaris/, tertia, Chlorella vulgaris var. vulgaris/, viridis, Chlorella xanthella, y Chlorella zofingiensis.
  319. 319
    El termentador de conformidad con la reivindicación 313, caracterizado porque los microorganismos son seleccionados del grupo que consiste de Parachlorella kesslerí, Chlorella protothecoides, Bracteococcus medionucleatus, Prototheca mori/ormis, Chlorella minutissima, Chlorella sp., y Chlorella sorokiniana.
  320. 320
    El termentador de conformidad con la reivindicación 313, caracterizado porque los microorganismos son levadura oleaginosa.
  321. 321
    El termentador de conformidad con la reivindicación 320, caracterizado porque la levadura oleaginosa son seleccionadas del grupo que consiste de Cryptococcus curvatus, Cryptococcus terricolus, Candida sp., Lipomyces starkeyi, Lipomyces lipo/er, Endomycopsis vernalis, Rhodotorula glutinis, Rhodotorula gracilis, y Yarrowia lipolytica.
  322. 322
    El termentador de conformidad con la reivindicación 313, caracterizado porque los microorganismos son hongos.
  323. 323
    El termentador de conformidad con la reivindicación 322, caracterizado porque los hongos son seleccionados del grupo que consiste de una especie del género Mortierella, Mortierrla vinacea, Mortierella alpine, Pythium debaryanum, Mucor circinelloides, Aspergillus ochraceus, Aspergillus terreus, Pennicillium iilacinum, una especie del género Hensenulo, una especie del género Chaetomium, una especie del género Cladosporium, una especie del género Malbranchea, una especie del género Rhizopus, y una especie del género Pythium.
  324. 324
    El termentador de conformidad con la reivindicación 313, caracterizado porque los microorganismos contienen por lo menos un gen de utilización de sacarosa exógeno.
  325. 325
    El termentador de conformidad con la reivindicación 324, caracterizado porque el gen de utilización de sacarosa codifica un transportador de sacarosa, una invertasa de sacarosa, una hexocinasa, unaglucocinasa, o una fructocinasa.
  326. 326
    El termentador de conformidad con la reivindicación 313, caracterizado porque los microorganismos contienen por lo menos un gen exógeno que codifica una enzima de ruta de lípido.
  327. 327
    El termentador de conformidad con la reivindicación 326, caracterizado porque la enzima de ruta de lípido es seleccionada del grupo que consiste de una estearoil-ACP desaturasa, una glicerolípido desaturasa, una piruvato deshidrogenasa, una acetil-CoA carboxilasa, una proteína portadora de acilo, y una glicerol-3 fosfato aciltransferasa.
  328. 328
    Un método para la fermentación de un microorganismo caracterizado porque comprende proveer glicerol producto secundario de un proceso de transesterificación como una sola fuente de energía de carbono fijo.
  329. 329
    El método de conformidad con la reivindicación 328, caracterizado porque no se proporciona energía de luz al microorganismo.
  330. 330
    El método de conformidad con la reivindicación 328, caracterizado porque se proporciona energía de luz al microorganismo.
  331. 331
    El método de conformidad con la reivindicación 328, caracterizado porque el microorganismo es una microalga.
  332. 332
    El método de conformidad con la reivindicación 331, caracterizado porque el microorganismo es seleccionado del grupo que consiste de las microalgas enlistados en la Tabla 1.
  333. 333
    El método de conformidad con la reivindicación 332, caracterizado porque el microorganismo es una especie del género Chlorella.
  334. 334
    El método de conformidad con la reivindicación 333, caracterizado porque el microorganismo es seleccionado del grupo que consiste de Chlorella anitrata, Chlorella antárctica, Chlorella aureov^dis, Chlorella Candida , Chlorella capsulata, Chlorella desiccata, Chlorella ellipsoidea, Chlorella emersonii, Chlorella fusca, Chlorella fusca var. vacuolata, Chlorella glucotropha, Chlorella infusionum, Chlorella infusionum var. Actophila, Chlorella infusionum var. Auxenophila, Chlorella kessleri, Chlorella luteoviridis, Chlorella luteoviridis var. aureoviridis, Chlorella luteoviridis var. Lutescens, Chlorella miniata, Chlorella minutissima, Chlorella mutabilis, Chlorella nocturna, Chlorella parva, Chlorella photophila, Chlorella pringsheimii, Chlorella protothecoides, Chlorella regularis, Chlorella regularis var. mínima, Chlorella regularis var. umbricata, Chlorella reisiglii, Chlorella saccharophila, Chlorella saccharophila var. ellipsoidea, Chlorella salina, Chlorella simplex, Chlorella sorokiniana, Chlorella sp., Chlorella sphaerica, Chlorella stigmatophora, Chlorella vanniellii, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris/, tertia, Chlorella vulgaris var. airidis, Chlorella vulgaris var. vulgaris, Chlorella vulgaris var. vulgaris/, tertia, Chlorella vulgaris var. vulgaris/, viridis, Chlorella xanthella, y Chlorella zofingiensis.
  335. 335
    El método de conformidad con la reivindicación 328, caracterizado porque el microorganismo es seleccionado de Parachlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Bracteococcus medionucleatus, Prototheca mori/ormis, Chlorella minutissima, Chlorella sp., y Chlorella sorokiniana.
  336. 336
    El método de conformidad con la reivindicación 328, caracterizado porque el microorganismo es una levadura oleaginosa.
  337. 337
    El método de conformidad con la reivindicación 336, caracterizado porque la levadura oleaginosa es seleccionada del grupo que consiste de Cryptococcus curvatus, Cryptococcus terricolus, Candida sp., Lipomyces starkeyi, Lipomyces lipo/er, Endomycopsis vernalis, Rhodotorula glutinis, Rhodotorula gracilis, y Yarrowia lipolytica.
  338. 338
    El método de conformidad con la reivindicación 328, caracterizado porque el microorganismo es un hongo.
  339. 339
    El método de conformidad con la reivindicación 338, caracterizado porque el hongo es seleccionado del grupo que consiste de una especie del género Mortierella, Mortierrla vinacea, Mortierella alpine, Pythium debaryanum, Mucor circinelloides, Aspergillus ochraceus, Aspergillus terreus, Pennicillium iilacinum, una especie del género Hensenulo, una especie del género Chaetomium, una especie del género Cladosporium, una especie del género Malbranchea, una especie del género Rhizopus, y una especie del género Pythium.
  340. 340
    El método de conformidad con la reivindicación 328, caracterizado porque el microorganismo contiene por lo menos un gen de utilización de sacarosa exógeno.
  341. 341
    El método de conformidad con la reivindicación 340, caracterizado porque el gen de utilización de sacarosa codifica un transportador de sacarosa, una invertasa de sacarosa, una hexocinasa, unaglucocinasa, o una fructocinasa.
  342. 342
    El método de conformidad con la reivindicación 328, caracterizado porque el microorganismo contiene por lo menos un gen exógeno que codifica una enzima de ruta de lípido.
  343. 343
    El método de conformidad con la reivindicación 342, caracterizado porque la enzima de ruta de lípido es seleccionada del grupo que consiste de una estearoil-ACP desaturasa, una glicerolípido desaturasa, una piruvato deshidrogenasa, una acetil-CoA carboxilasa, una proteína portadora de acilo, y una glicerol-3 fosfato aciltransferasa.
  344. 344
    Un microorganismo caracterizado porque contiene un gen de utilización de sacarosa exógeno.
  345. 345
    El microorganismo de conformidad con la reivindicación 344, caracterizado porque el gen codifica un transportador de sacarosa.
  346. 346
    El microorganismo de conformidad con la reivindicación 344, caracterizado porque el gen codifica una invertasa de sacarosa.
  347. 347
    El microorganismo de conformidad con la reivindicación 344, caracterizado porque el gen codifica una fructocinasa.
  348. 348
    El microorganismo de conformidad con la reivindicación 344, caracterizado porqueel microorganismo es una microalga.
  349. 349
    El microorganismo de conformidad con la reivindicación 348, caracterizado porqueel microorganismo es seleccionado del grupo que consiste de las microalgas enlistadas enla Tabla 1.
  350. 350
    El microorganismo de conformidad con la reivindicación 349, caracterizado porque el microorganismo es una especie del género Chlorella.
  351. 351
    El microorganismo de conformidad con la reivindicación 350, caracterizado porque el microorganismo es una especie seleccionada del grupo que consiste de Chlorella minutissima, Chlorella emersonii, Chlorella sorokiniana, Chlorella ellipsoidea, Chlorella sp., o Chlorella protothecoides.
  352. 352
    Una célula de la especie Chlorella protothecoides, Chlorella emersonii, o Chlorella minutissima caracterizado porque la célula contiene un gen exógeno.
  353. 353
    La célula de conformidad con la reivindicación 352, caracterizada porque el gen exógeno codifica una proteína seleccionado del grupo que consiste de un transportador de sacarosa, una invertasa de sacarosa, una enzima de modificación de lípido, una enzima de modificación de hidrocarburo y una fructocinasa.
  354. 354
    La célula de conformidad con la reivindicación 353, caracterizada porque la proteína es una invertasa de sacarosa secretada al espacio extracelular.
  355. 355
    La célula de conformidad con la reivindicación 353, caracterizada porque la proteína es una invertasa de sacarosa apuntada al citoplasma.
  356. 356
    Un cultivo microbiano caracterizado porque contiene:(a) una población de microorganismos y (b) un medio de cultivo que comprende (i) sacarosa, y (¡i) una enzima de invertasa de sacarosa.
  357. 357
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 356, caracterizado porque los microorganismos son microalgas.
  358. 358
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 357, caracterizado porque los microorganismos son seleccionados del grupo que consiste de las microalgas enlistadas en la Tabla 1.
  359. 359
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 358, caracterizado porque los microorganismos son una especie del género Chlorella.
  360. 360
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 359, caracterizado porque los microorganismos son seleccionados del grupo que consiste de Chlorella anitrata, Chlorella antárctica, Chlorella aureoviridis, Chlorella Candida , Chlorella capsulata, Chlorella desiccata, Chlorella ellipsoidea, Chlorella emersonii, Chlorella fusca, Chlorella fusca var. vacuolata, Chlorella glucotropha, Chlorella infusionum, Chlorella infusionum var. Actophila, Chlorella infusionum var. Auxenophila, Chlorella kessleri, Chlorella luteoviridis, Chlorella luteoviridis var. aureoviridis, Chlorella luteoviridis var. Lutescens, Chlorella miniata, Chlorella minutissima, Chlorella mutabilis, Chlorella nocturna, Chlorella parva, Chlorella photophila, Chlorella pringsheimii, Chlorella protothecoides, Chlorella regularis, Chlorella regularis var. mínima, Chlorella regularis var. umbricata, Chlorella reisiglii, Chlorella saccharophila, Chlorella saccharophila var. ellipsoidea, Chlorella salina, Chlorella simplex, Chlorella sorokiniana, Chlorella sp., Chlorella sphaerica, Chlorella stigmatophora, Chlorella vanniellii, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris/, tertia, Chlorella vulgaris var. airidis, Chlorella vulgaris var. vulgaris, Chlorella vulgaris var. vulgaris/, tertia, Chlorella vulgaris var. vulgaris/, viridis, Chlorella xanthella, y Chlorella zofingiensis.
  361. 361
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 356, caracterizado porque los microorganismos son levadura oleaginosa.
  362. 362
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 361, caracterizado porque la levadura oleaginosa son seleccionados del grupo que consiste de Cryptococcus curvatus, Cryptococcus terricolus, Candida sp., Lipomyces starkeyi, Lipomyces lipofer, Endomycopsis vernalis, Rhodotorula glutinis, Rhodotorula gracilis, y Yarrowia lipolytica.
  363. 363
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 356, caracterizado porque los microorganismos son hongos.
  364. 364
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 363, caracterizado porque los hongos son seleccionado del grupo que consiste de una especie del género Mortierella, Mortierrla vinacea, Mortierella alpine, Pythium debaryanum, Miicor circinelloides, Aspergillus ochraceus, Aspergillus terreus, Pennicillium iilacinum, una especie del género Hensenulo, una especie del género Chaetomium, una especie del género Cladosporium, una especie del género Malbranchea, una especie del género Rhizopus y una especie del género Pythium.
  365. 365
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 356, caracterizado porque los microorganismos contienen por lo menos un gen de utilización de sacarosa exógeno.
  366. 366
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 365, caracterizado porque el gen de utilización de sacarosa codifica un transportador de sacarosa, una invertasa de sacarosa, una hexocinasa, una glucocinasa, o una fructocinasa.
  367. 367
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 366, caracterizado porque el gen de utilización de sacarosa codifica un transportador de sacarosa.
  368. 368
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 356, caracterizado porque la enzima de sacarosa invertasa es una enzima de sacarosa invertasa secretable codificada por un gen de sacarosa invertasa exógeno expresado por la población de microorganismos.
  369. 369
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 356, caracterizado porque el microorganismo contiene por lo menos un gen exógeno que codifica una enzima de ruta de lípido.
  370. 370
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 369, caracterizado porque la enzima de ruta de lípido es seleccionada del grupo que consiste de una estearoil-ACP desaturasa, una glicerolípido desaturasa, una piruvato deshidrogenasa, una acetil-CoA carboxilasa, una proteína portadora de acilo, y una glicerol-3 fosfato aciltransferasa.
  371. 371
    Un cultivo microbiano caracterizado porque contiene:(a) una población de microorganismos y (b) un medio de cultivo que comprende (i) melasas y (¡i) una enzima de sacarosa invertasa.
  372. 372
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 371, caracterizado porque los microorganismos son microalgas.
  373. 373
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 372, caracterizado porque los microorganismos son seleccionados del grupo que consiste de las microalgas enlistados en la Tabla 1.
  374. 374
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 373, caracterizado porque los microorganismos son una especie del género Chlorella.
  375. 375
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 374, caracterizado porque los microorganismos son seleccionados del grupo que consiste de Chlorella anitrata, Chlorella antárctica, Chlorella aureoviridis, Chlorella Candida, Chlorella capsulata, Chlorella desiccata, Chlorella ellipsoidea, Chlorella emersonii, Chlorella fusca, Chlorella fusca var. vacuolata, Chlorella glucotropha, Chlorella infusionum, Chlorella infusionum var. Actophila, Chlorella infusionum var. Auxenophila, Chlorella kessleri, Chlorella luteoviridis, Chlorella luteoviridis var. aureoviridis, Chlorella luteoviridis var. Lutescens, Chlorella miniata, Chlorella minutissima, Chlorella mutabilis, Chlorella nocturna, Chlorella parva, Chlorella photophila, Chlorella pnngsheimii, Chlorella protothecoides, Chlorella regular is, Chlorella regularis var. mínima, Chlorella regularis var. umbricata, Chlorella reisiglii, Chlorella saccharophila, Chlorella saccharophila var. ellipsoidea, Chlorella salina, Chlorella simplex, Chlorella sorokiniana, Chlorella sp., Chlorella sphaerica, Chlorella stigmatophora, Chlorella vanniellii, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris/, tertia, Chlorella vulgaris var. airidis, Chlorella vulgaris var. vulgaris, Chlorella vulgaris var. vulgaris/, tertia, Chlorella vulgaris var. vulgaris f. viridis, Chlorella xanthella, y Chlorella zofingiensis.
  376. 376
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 371 , caracterizado porque los microorganismos son levadura oleaginosa.
  377. 377
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 376, caracterizado porque las levaduras oleaginosas son seleccionadas del grupo que consiste de Cryptococcus curvatus, Cryptococcus terricolus, Candida sp., Lipomyces starkeyi, Lipomyces lipofer, Endomycopsis vernalis, Rhodotorula glutinis, Rhodotorula gracilis, y Yarrowia lipolytica.
  378. 378
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 371, caracterizado porque los microorganismos son hongos.
  379. 379
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 378, caracterizado porque los hongos son seleccionados del grupo que consiste de una especie del género Mortierella, Mortierrla vinacea, Mortierella alpine, Pythium debaryanum, Mucor circinelloides, Aspergillus ochraceus, Aspergillus terreus, Pennicillium ¡ilacinum, una especie del género Hensenulo, una especie del género Chaetomium, una especie del género Cladosporium, una especie del género Malbranchea, una especie del género Rhizopus, y una especie del género Pythium.
  380. 380
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 371, caracterizado porque el microorganismo contienen por lo menos un gen de utilización de sacarosa exógeno.
  381. 381
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 380, caracterizado porque el gen de utilización de sacarosa codifica un transportador de sacarosa, una invertasa de sacarosa, una hexocinasa, una glucocinasa, o una fructocinasa.
  382. 382
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 381, caracterizado porque el gen de utilización de sacarosa codifica un transportador de sacarosa.
  383. 383
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 371, caracterizado porque la enzima de sacarosa invertasa es una enzima de sacarosa invertasa secretable codificada por un gen de sacarosa invertasa exógeno expresado por la población de microorganismos.
  384. 384
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 371, caracterizado porque los microorganismos contienen por lo menos un gen exógeno que codifica una enzima de ruta de lípido.
  385. 385
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 384, caracterizado porque la enzima de ruta de lípido es seleccionada del grupo que consiste de una esteaoril-ACP desaturasa, una glicerolípido desaturasa, una piruvato deshidrogenase, una acetil-CoA carboxilasa, una proteína portadora de acilo, y una glicerol-3 fosfato aciltransferasa.
  386. 386
    Un cultivo microbiano caracterizado porque contiene:(a) una población de microorganismos y (b) un medio de cultivo que comprende (i) sacarosa;(¡i) lignina y (¡ii) una enzima de sacarosa invertasa.
  387. 387
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 386, caracterizado porque los microorganismos son microalgas.
  388. 388
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 387, caracterizado porque los microorganismos son seleccionados del grupo que consiste de las microalgas enlistadas en la Tablal.
  389. 389
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 388, caracterizado porque los microorganismos son una especie del género Chlorella.
  390. 390
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 389, caracterizado porque los microorganismos son seleccionados del grupo que consiste de Chlorella anitrata, Chlorella antárctica, Chlorella aureoviridis, Chlorella Candida, Chlorella capsulata, Chlorella desiccata, Chlorella ellipsoidea, Chlorella emersonii, Chlorella fusca, Chlorella fusca var. vacuolata, Chlorella glucotropha, Chlorella infusionum, Chlorella infusionum var. Actophila, Chlorella infusionum var. Auxenophila, Chlorella kessleri, Chlorella luteoviridis, Chlorella luteoviridis var. aureoviridis, Chlorella luteoviridis var. Lutescens, Chlorella miniata, Chlorella minutissima, Chlorella mutabilis, Chlorella nocturna, Chlorella parva, Chlorella photophila, Chlorella pringsheimii, Chlorella protothecoides, Chlorella regularis, Chlorella regular is var. mínima, Chlorella regularis var. umbricata, Chlorella reisiglii, Chlorella saccharophila, Chlorella saccharophila var. ellipsoidea, Chlorella salina, Chlorella simplex, Chlorella sorokiniana, Chlorella sp., Chlorella sphaerica, Chlorella stigmatophora, Chlorella vanniellii, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris/, tertia, Chlorella vulgaris var. airidis, Chlorella vulgaris var. vulgaris, Chlorella vulgaris var. vulgaris/, tertia, Chlorella vulgaris var. vulgaris/, viridis, Chlorella xanthella, y Chlorella zofingiensis.
  391. 391
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 386, caracterizado porque los microorganismos son levadura oleaginosa.
  392. 392
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 391, caracterizado porque la levadura oleaginosa son seleccionadas del grupo que consiste de Cryptococcus curvatus, Cryptococcus terricolus, Candida sp., Lipomyces starkeyi, Lipomyces lipo/er, Endomycopsis vernalis, Rhodotorula glutinis, Rhodotorula gracilis, y Yarrowia lipolytica.
  393. 393
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 386, caracterizado porque los microorganismos son hongos.
  394. 394
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 393, caracterizado porque los hongos son seleccionados del grupo que consiste de una especie del género Mortierella, Mortierrla vinacea, Mortierella alpine, Pythium debaryanum, Mucor circinelloides, Aspergillus ochraceus, Aspergillus terreus, Pennicillium ¡ilacinum, una especie del género Hensenulo, una especie del género Chaetomium, una especie del género Cladosporium, una especie del género Malbranchea, una especie del género Rhizopus, y una especie del género Pythium.
  395. 395
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 386, caracterizado porque los microorganismos contienen por lo menos un gen de utilización de sacarosa exógeno.
  396. 396
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 395, caracterizado porque el gen de utilización de sacarosa codifica un transportador de sacarosa, una sacarosa invertasa, una hexocinasa, unaglucocinasa, o una fructocinasa.
  397. 397
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 396, caracterizado porque el gen de utilización de sacarosa codifica un transportador de sacarosa.
  398. 398
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 386, caracterizado porque la enzima de sacarosa invertasa es una enzima de sacarosa invertasa secretable codificada por un gen de sacarosa invertasa exógeno expresado por la población de microorganismos.
  399. 399
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 386, caracterizado porque los microorganismos contienen por lo menos un gen exógeno que codifica una enzima de ruta de lípido.
  400. 400
    El cultivo microbiano de conformidad con la reivindicación 399, caracterizado porque la enzima de ruta de lípido es seleccionada del grupo que consiste de una estearoil-ACP desaturasa, una glicerolípido desaturasa, una piruvato deshidrogenasa, una acetil-CoA carboxilasa, una proteína portadora de acilo, y una glicerol-3 fosfato aciltransferasa.
  401. 401
    Un ácido nucleico caracterizado porque comprende:(a) un cADN que codifica un gen de utilización de sacarosa y (b) un cADN que codifica una proteína que confiere resistencia al antibiótico higromicina o el antibiótico G418.
  402. 402
    Un método para cultivar microalgas, caracterizado porque comprende:(a) proveer una célula de microalga apta de efectuar crecimiento heterotrópico;(b) colocar la célula de microalga en un medio de cultivo, en donde el medio de cultivo comprende material celulósico despolimerizado y (c) incubar las microalgas por un periodo de tiempo suficiente para permitir que las células crezcan.
Independent claims402