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BRPI0809877A2

Delta-5 desaturases and their use in making polyunsaturated fatty acids

Abstract

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37 claims: 11 independent, 26 dependent

  1. 1
    Claims Reivindicações 1. ISOLATED POLYNUCLEOTIDE, comprising:1. POLINUCLEOTÍDEO ISOLADO, que compreende: (a) a nucleotide sequence encoding a polypeptide that has delta-5 desaturase activity, where the polypeptide has at least 80% amino acid identity, based on the Clustal V method of alignment, compared to an amino acid sequence as described in SEQ ID No. 13;(a) uma sequência de nucleotídeos que codifica um polipeptídeo que possui atividade de delta-5 dessaturase, em que o polipeptídeo possui identidade de aminoácidos de pelo menos 80%, com base no método Clustal V de alinhamento, em comparação com uma sequência de aminoácidos conforme descrito em SEQ ID N° 13;(b) a nucleotide sequence that encodes a polypeptide that has delta-5 desaturase activity, where the nucleotide sequence has sequence identity of at least 80%, based on the BLASTN method of alignment, compared to a sequence of nucleotides as described in SEQ ID No. 12;(b) uma sequência de nucleotídeos que codifica um polipeptídeo que possui atividade de delta-5 dessaturase, em que a sequência de nucleotídeos possui identidade de sequências de pelo menos 80%, com base no método BLASTN de alinhamento, em comparação com uma sequência de nucleotídeos conforme descrito em SEQ ID N° 12;(c) a nucleotide sequence encoding a polypeptide that has delta-5 desaturase activity, wherein the nucleotide sequence hybridizes under stringent conditions to a nucleotide sequence as described in SEQ ID No. 12;or (d) a complement of the nucleotide sequence of (a), (b) or (c), where the complement and the nucleotide sequence consist of the same amount of nucleotides and are 100% complementary. (c) uma sequência de nucleotídeos que codifica um polipeptídeo que possui atividade de delta-5 dessaturase, em que a sequência de nucleotídeos hibridiza-se sob condições estringentes em uma sequência de nucleotídeos conforme descrito em SEQ ID N° 12;ou (d) um complemento da sequência de nucleotídeos de (a), (b) ou (c), em que o complemento e a sequência de nucleotídeos consistem da mesma quantidade de nucleotídeos e são 100% complementares.
  2. 8
    BUILDING RECOMBINANT DNA, comprising the polynucleotide according to any of claims 1, 5, 6 or 7, operably linked to at least one regulatory sequence. 8. CONSTRUÇÃO DE DNA RECOMBINANTE, que compreende o polinucleotídeo de acordo com qualquer das reivindicações 1, 5, 6 ou 7, ligado operativamente a pelo menos uma sequência reguladora.
  3. 11
    METHOD OF PRODUCTION OF A TRANSFORMED PLANT, comprising the transformation of a plant cell with the polynucleotide according to any of claims 1, 5, 6 or 7 and regeneration of a plant from the transformed plant cell. 11. MÉTODO DE PRODUÇÃO DE UMA PLANTA TRANSFORMADA, que compreende a transformação de uma célula vegetal com o polinucleotídeo de acordo com qualquer das reivindicações 1, 5, 6 ou 7 e regeneração de uma planta a partir da célula vegetal transformada.
  4. 14
    TRANSGENIC SEED, obtained from plant 5 prepared by the method according to any of claims 11 or 12. 14. SEMENTE TRANSGÊNICA, obtida a partir da planta 5 elaborada por meio do método de acordo com qualquer das reivindicações 11 ou 12.
  5. 16
    OIL OR BY-PRODUCTS obtained from seed, 16. ÓLEO OU SUBPRODUTOS obtidos a partir da semente, 10 according to claim 14. 10 de acordo com a reivindicação 14.
  6. 17
    METHOD OF PREPARING POLYINSATURATED FATTY ACIDS, long chain in a plant cell, comprising:17. MÉTODO DE ELABORAÇÃO DE ÁCIDOS GRAXOS PÓLIINSATURADOS, de cadeia longa em uma célula vegetal, que compreende: (a) transformação de uma célula vegetal com a construção recombinante de acordo com a reivindicação 8;e (a) transforming a plant cell with the recombinant construct according to claim 8;and 15 (b) selection of transformed plant cells that produce long-chain polyunsaturated fatty acids. 15 (b) seleção das células vegetais transformadas que elaboram ácidos graxos póli-insaturados de cadeia longa.
  7. 18
    METHOD OF PRODUCTION OF AT LEAST ONE POLL-INSATURATED FATTY ACID, in an oilseed cell, comprising:18. MÉTODO DE PRODUÇÃO DE PELO MENOS UM ÁCIDO GRAXO PÓLI-INSATURADO, em uma célula de planta oleaginosa, que compreende: 20 (a) transformation of an oilseed cell with a first recombinant DNA construct comprising an isolated polynucleotide encoding at least one delta-5 desaturase polypeptide, operably linked to at least one regulatory sequence and at least one additional recombinant DNA construct which comprises 20 (a) transformação de uma célula de planta oleaginosa com uma primeira construção de DNA recombinante que compreende um polinucleotídeo isolado que codifica pelo menos um polipeptídeo delta-5 dessaturase, ligado operativamente a pelo menos uma sequência reguladora e pelo menos uma construção de DNA recombinante adicional que compreende 25 an isolated polynucleotide, operably linked to at least one regulatory sequence, encoding a polypeptide selected from the group consisting of a delta-4 desaturase, delta-5 desaturase, delta-6 desaturase, delta-8 desaturase, delta-12 desaturase , delta-15 desaturase, delta-17 desaturase, delta-9 desaturase, delta-9 elongase, Ci elongase4.i6, elongase C16-18, C18-20 elongase and C20-22 elongase;25 um polinucleotídeo isolado, ligado operativamente a pelo menos uma sequência reguladora, que codifica um polipeptídeo selecionado a partir do grupo que consiste de uma delta-4 dessaturase, delta-5 dessaturase, delta-6 dessaturase, delta-8 dessaturase, delta-12 dessaturase, delta-15 dessaturase, delta-17 dessaturase, delta-9 dessaturase, delta-9 elongase, elongase Ci4.i6, elongase C16-18, elongase C18-20 e elongase C20-22;(b) regeneration of an oleaginous plant from the transformed cell of step (a);and (c) selecting the seeds obtained from the plants in step (b) that have an altered level of polyunsaturated fatty acids compared to the level in seeds obtained from an unprocessed oil plant. (b) regeneração de uma planta oleaginosa a partir da célula transformada da etapa (a);e (c) seleção das sementes obtidas a partir das plantas da etapa (b) que possuem um nível alterado de ácidos graxos póli-insaturados em comparação com o nível em sementes obtidas a partir de uma planta oleaginosa não transformada.
  8. 21
    OLEAGINOSA PLANT, comprising:21. PLANTA OLEAGINOSA, que compreende: (a) a first recombinant DNA construct comprising an isolated polynucleotide that encodes at least one delta-5 desaturase polypeptide operably linked to at least one regulatory sequence;and (b) at least one additional recombinant DNA construct comprising an isolated polynucleotide, operably linked to at least one regulatory sequence, which encodes a polypeptide selected from the group consisting of a delta-4 desaturase, delta-5 desaturase, delta-6 desaturase, delta-8 desaturase, delta-12 desaturase, delta-15 desaturase, delta-17 desaturase, delta-9 desaturase, delta-9 elongase, elongase Ci4.6, elongase C16-18. elongase Ci8.20 and elongase C2o-2222. OIL PLANT, according to either of claims 20 or 21, wherein the oilseed plant is selected from the group consisting of soybeans, Brassica species, sunflower, corn, cotton, flax and saffron. (a) uma primeira construção de DNA recombinante que compreende um polinucleotídeo isolado que codifica pelo menos um polipeptídeo delta-5 dessaturase ligado operativamente a pelo menos uma sequência reguladora;e (b) pelo menos uma construção de DNA recombinante adicional que compreende um polinucleotídeo isolado, ligado operativamente a pelo menos uma sequência reguladora, que codifica um polipeptídeo selecionado a partir do grupo que consiste de uma delta-4 dessaturase, delta-5 dessaturase, delta-6 dessaturase, delta-8 dessaturase, delta-12 dessaturase, delta-15 dessaturase, delta-17 dessaturase, delta-9 dessaturase, delta-9 elongase, elongase Ci4.i6, elongase C16-18. elongase Ci8.20 e elongase C2o-2222. PLANTA OLEAGINOSA, de acordo com qualquer das reivindicações 20 ou 21, em que a planta oleaginosa é selecionada a partir do grupo que consiste de soja, espécies de Brassica, girassol, milho, algodão, linho e açafrão.
  9. 26
    27. OIL, obtained by the method according to any of claims 17 or 18. 27. ÓLEO, obtido por meio do método de acordo com qualquer das reivindicações 17 ou 18.
  10. 36
    37. PROLEY PLANTS, obtained from the plant made using the method according to either of claims 11 or 12. 37. PLANTAS DE PROLE, obtidas a partir da planta elaborada por meio do método de acordo com qualquer das reivindicações 11 ou 12.
  11. 37
    38. PROLEY PLANTS, obtained from the oilseed plant 5 according to any of claims 20 or 21. 38. PLANTAS DE PROLE, obtidas a partir da planta oleaginosa 5 de acordo com qualquer das reivindicações 20 ou 21. 1/13 1/13 Stearic acid Acid for| mythical Miristic acid [C18:0] Ciezie elongase [C16: 0] Cu ,,;elongase [C14.0] Ácido esteárico Ácido pa|mítico Ácido mirístico [C18:0] Ciezie elongase [C16:0] Cu,,;elongase [C14.0] 2/13 2/13 3/13 3/13
Independent claims11